摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
第一篇研究报告 | 第11-45页 |
第一章 基因 C 型鸭甲肝炎病毒的分离鉴定 | 第11-20页 |
1 材料和方法 | 第11-15页 |
·病料、毒株、鸭胚和实验动物 | 第11-12页 |
·主要试剂 | 第12页 |
·主要仪器 | 第12页 |
·病毒分离培养 | 第12页 |
·病毒分离培养物的 RT-PCR 鉴定 | 第12-14页 |
·样本总RNA的提取 | 第12-13页 |
·cDNA的合成 | 第13页 |
·RT-PCR 鉴定 | 第13页 |
·病毒分离培养 | 第13-14页 |
·RT- PCR 产物序列测定与遗传进化分析 | 第14页 |
·排它性试验 | 第14-15页 |
·人工感染试验 | 第15页 |
2 结果 | 第15-19页 |
·病毒分离培养结果 | 第15-16页 |
·病毒鉴定结果 | 第16-18页 |
·DHAV 分离毒株的遗传进化分析 | 第18页 |
·人工感染试验 | 第18-19页 |
3 讨论 | 第19-20页 |
第二章 鸭甲肝病毒基因 A 型和 C 型双重 RT-PCR 检测方法的建立 | 第20-29页 |
1 材料与方法 | 第20-24页 |
·毒(菌)株、鸭胚和病料来源 | 第20-21页 |
·主要试剂 | 第21页 |
·主要仪器 | 第21页 |
·引物设计 | 第21-22页 |
·病毒 RNA 提取及 cDNA 合成 | 第22页 |
·引物的特异性 | 第22页 |
·阳性标准品的制备 | 第22页 |
·双重 RT-PCR 检测方法的建立 | 第22-23页 |
·双重 RT-PCR 方法的特异性试验 | 第23页 |
·双重 RT-PCR 方法的灵敏度试验 | 第23-24页 |
·双重 RT-PCR 方法检测临床样品 | 第24页 |
2 结果 | 第24-27页 |
·引物的特异性 | 第24页 |
·优化的双重 RT-PCR 反应条件 | 第24-26页 |
·双重 RT-PCR 的特异性 | 第26页 |
·双重 RT-PCR 的灵敏度 | 第26-27页 |
·对临床样本的检测 | 第27页 |
3 讨论 | 第27-29页 |
第三章 基因 C 型鸭甲肝炎病毒实时荧光定量 RT-PCR 检测方法的建立 | 第29-39页 |
1 材料和方法 | 第29-33页 |
·毒株、菌株、鸭胚和临床样本来源 | 第29-30页 |
·主要试剂 | 第30页 |
·主要仪器 | 第30-31页 |
·引物设计与合成 | 第31页 |
·病毒总 RNA 的提取及 cDNA 的合成 | 第31页 |
·标准品的制备 | 第31-32页 |
·DHAV-C 实时荧光定量 RT-PCR 方法的建立 | 第32-33页 |
·应用 DHAV-C 实时荧光定量 RT-PCR 方法对临床病料进行检测和验证 | 第33页 |
2 结果 | 第33-38页 |
·引物的特异性 | 第33-34页 |
·优化的实时荧光定量 RT-PCR 条件结果 | 第34-35页 |
·建立的实时荧光定量 RT-PCR 方法的标准曲线分析 | 第35-36页 |
·实时荧光定量 RT-PCR 方法的特异性 | 第36页 |
·实时荧光定量 RT-PCR 方法的重复性和再现性 | 第36页 |
·对临床样本的检测 | 第36-38页 |
3 讨论与小结 | 第38-39页 |
第四章 基因 C 型鸭甲肝炎病毒在雏鸭体内的动态定量分布 | 第39-44页 |
1 材料和方法 | 第39-40页 |
·毒株和实验动物 | 第39页 |
·主要试剂 | 第39页 |
·主要仪器 | 第39-40页 |
·动物分组及处理 | 第40页 |
·样品总 RNA 的抽提及 cDNA 的合成 | 第40页 |
·样品的检测 | 第40页 |
·数据处理 | 第40页 |
2 结果 | 第40-43页 |
·人工感染雏鸭的临床症状及剖检变化 | 第40-41页 |
·DHAV-C 在雏鸭体内的的动态定量分布 | 第41-43页 |
3 讨论 | 第43-44页 |
第五章 结论与创新点 | 第44-45页 |
1 本论文的结论 | 第44页 |
2 本论文的创新点 | 第44页 |
3 本论文的不足 | 第44-45页 |
第二篇 文献综述 | 第45-53页 |
基因 C 型鸭甲肝病毒的分子生物学研究进展 | 第45-53页 |
1. 鸭肝炎病毒的分类 | 第45页 |
2.新型病毒性肝炎的发现 | 第45-46页 |
3. 小 RNA 肝炎病毒的基因分析 | 第46页 |
4. 基因 C 型鸭甲肝病毒的基因组结构 | 第46-48页 |
5. 基因 C 型鸭甲肝病毒的基因序列分析 | 第48-49页 |
7. 展望 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-53页 |
附录 | 第53-54页 |
致谢 | 第54-55页 |