中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
符号说明 | 第10-12页 |
第一章 空肠弯曲菌检测技术进展 | 第12-27页 |
1. 基于生化反应的常规检测方法 | 第12-13页 |
2. 常规检测方法的改良 | 第13-14页 |
3. 基于免疫学技术的新型检测方法 | 第14-17页 |
·常规免疫学检测方法 | 第14-15页 |
·免疫磁珠 | 第15页 |
·电化学免疫传感器 | 第15-17页 |
4. 基于分子生物学的新型检测方法 | 第17-21页 |
·核酸探针 | 第17-18页 |
·PCR 技术 | 第18-20页 |
·NASBA 技术 | 第20-21页 |
·LAMP 技术 | 第21页 |
5. 展望 | 第21-22页 |
参考文献 | 第22-27页 |
第二章 空肠弯曲菌cjaA 基因在大肠杆菌中的表达及其单克隆抗体的研制 | 第27-42页 |
1 材料与方法 | 第27-33页 |
·材料 | 第27-28页 |
·方法 | 第28-33页 |
·PCR 扩增cjaA 基因 | 第28-29页 |
·PCR 产物的克隆、鉴定 | 第29页 |
·重组原核表达质粒pGEX-6p-1-cjaA、pET-cjaA 的构建与鉴定 | 第29页 |
·cjaA 基因在重组菌中的表达及蛋白纯化 | 第29-30页 |
·抗血清制备 | 第30页 |
·表达产物的免疫生物学活性测定 | 第30页 |
·免疫原和检测原的制备 | 第30-31页 |
·动物免疫 | 第31页 |
·细胞融合 | 第31页 |
·阳性克隆的筛选 | 第31-32页 |
·单抗腹水制备 | 第32页 |
·单抗生物学特性鉴定 | 第32-33页 |
2 结果 | 第33-39页 |
·cjaA 基因的扩增及重组质粒构建 | 第33-34页 |
·重组菌表达产物的SDS-PAGE 分析 | 第34-35页 |
·多抗血清效价 | 第35-36页 |
·表达产物的免疫生物学活性测定 | 第36页 |
·单克隆抗体筛选方法的建立 | 第36-37页 |
·杂交瘤细胞株的建立 | 第37页 |
·单抗生物学特性 | 第37-38页 |
·单抗特异性分析 | 第38-39页 |
3 讨论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-42页 |
第三章 基于CjaA 蛋白检测鸡空肠弯曲菌抗体的间接ELISA 方法建立及初步应用 | 第42-59页 |
1 材料与方法 | 第42-46页 |
·材料 | 第42-43页 |
·方法 | 第43-46页 |
·CjaA 蛋白同源性分析 | 第43页 |
·200 株空肠弯曲菌中cjaA 基因检测 | 第43页 |
·His-CjaA 蛋白阳性血清制备 | 第43页 |
·间接ELISA 检测空肠弯曲菌抗体方法的建立与优化 | 第43-45页 |
·间接ELISA 方法阳性临界值的确定 | 第45页 |
·特异性试验 | 第45页 |
·鸡人工感染空肠弯曲菌后不同时间血清抗体测定 | 第45页 |
·重复性试验 | 第45页 |
·间接ELISA 方法的初步应用 | 第45-46页 |
2 结果 | 第46-56页 |
·CjaA 蛋白同源性分析 | 第46页 |
·200 株空肠弯曲菌中cjaA 基因检测结果 | 第46页 |
·His-CjaA 阳性血清的制备 | 第46页 |
·间接ELISA 方法的建立与优化 | 第46-51页 |
·间接ELISA 方法操作程序的确定 | 第51页 |
·间接ELISA 方法阳性临界值的确定 | 第51-52页 |
·特异性实验 | 第52-53页 |
·鸡人工感染空肠弯曲菌抗体测定 | 第53页 |
·重复性实验 | 第53-54页 |
·间接ELISA 方法的初步应用 | 第54-56页 |
3 讨论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
攻读学位论文期间发表的文章目录 | 第60页 |