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基于CjaA蛋白检测鸡空肠弯曲菌抗体的间接ELISA方法建立及其单克隆抗体研制

中文摘要第1-5页
Abstract第5-10页
符号说明第10-12页
第一章 空肠弯曲菌检测技术进展第12-27页
 1. 基于生化反应的常规检测方法第12-13页
 2. 常规检测方法的改良第13-14页
 3. 基于免疫学技术的新型检测方法第14-17页
   ·常规免疫学检测方法第14-15页
   ·免疫磁珠第15页
   ·电化学免疫传感器第15-17页
 4. 基于分子生物学的新型检测方法第17-21页
   ·核酸探针第17-18页
   ·PCR 技术第18-20页
   ·NASBA 技术第20-21页
   ·LAMP 技术第21页
 5. 展望第21-22页
 参考文献第22-27页
第二章 空肠弯曲菌cjaA 基因在大肠杆菌中的表达及其单克隆抗体的研制第27-42页
 1 材料与方法第27-33页
   ·材料第27-28页
   ·方法第28-33页
     ·PCR 扩增cjaA 基因第28-29页
     ·PCR 产物的克隆、鉴定第29页
     ·重组原核表达质粒pGEX-6p-1-cjaA、pET-cjaA 的构建与鉴定第29页
     ·cjaA 基因在重组菌中的表达及蛋白纯化第29-30页
     ·抗血清制备第30页
     ·表达产物的免疫生物学活性测定第30页
     ·免疫原和检测原的制备第30-31页
     ·动物免疫第31页
     ·细胞融合第31页
     ·阳性克隆的筛选第31-32页
     ·单抗腹水制备第32页
     ·单抗生物学特性鉴定第32-33页
 2 结果第33-39页
   ·cjaA 基因的扩增及重组质粒构建第33-34页
   ·重组菌表达产物的SDS-PAGE 分析第34-35页
   ·多抗血清效价第35-36页
   ·表达产物的免疫生物学活性测定第36页
   ·单克隆抗体筛选方法的建立第36-37页
   ·杂交瘤细胞株的建立第37页
   ·单抗生物学特性第37-38页
   ·单抗特异性分析第38-39页
 3 讨论第39-40页
 参考文献第40-42页
第三章 基于CjaA 蛋白检测鸡空肠弯曲菌抗体的间接ELISA 方法建立及初步应用第42-59页
 1 材料与方法第42-46页
   ·材料第42-43页
   ·方法第43-46页
     ·CjaA 蛋白同源性分析第43页
     ·200 株空肠弯曲菌中cjaA 基因检测第43页
     ·His-CjaA 蛋白阳性血清制备第43页
     ·间接ELISA 检测空肠弯曲菌抗体方法的建立与优化第43-45页
     ·间接ELISA 方法阳性临界值的确定第45页
     ·特异性试验第45页
     ·鸡人工感染空肠弯曲菌后不同时间血清抗体测定第45页
     ·重复性试验第45页
     ·间接ELISA 方法的初步应用第45-46页
 2 结果第46-56页
     ·CjaA 蛋白同源性分析第46页
     ·200 株空肠弯曲菌中cjaA 基因检测结果第46页
     ·His-CjaA 阳性血清的制备第46页
     ·间接ELISA 方法的建立与优化第46-51页
     ·间接ELISA 方法操作程序的确定第51页
     ·间接ELISA 方法阳性临界值的确定第51-52页
     ·特异性实验第52-53页
     ·鸡人工感染空肠弯曲菌抗体测定第53页
     ·重复性实验第53-54页
     ·间接ELISA 方法的初步应用第54-56页
 3 讨论第56-57页
 参考文献第57-59页
致谢第59-60页
攻读学位论文期间发表的文章目录第60页

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