| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 主要缩略语 | 第7-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-18页 |
| ·莱芜猪的研究进展 | 第10-11页 |
| ·莱芜猪的生物学特性 | 第10页 |
| ·莱芜猪的发展前景 | 第10-11页 |
| ·莱芜猪的保护与利用 | 第11页 |
| ·基因文库 | 第11-16页 |
| ·基因组文库 | 第12页 |
| ·cDNA文库 | 第12-16页 |
| ·EST技术及应用 | 第16-17页 |
| ·EST的概念及原理 | 第16页 |
| ·EST技术及其应用 | 第16-17页 |
| ·鉴定及发现新基因 | 第16页 |
| ·构建遗传学图谱 | 第16-17页 |
| ·制作DNA芯片 | 第17页 |
| ·研究进展及意义 | 第17-18页 |
| 第二章 莱芜猪心脏组织cDNA文库的构建 | 第18-31页 |
| ·实验材料 | 第18页 |
| ·仪器和药品 | 第18-21页 |
| ·实验仪器 | 第18页 |
| ·主要药品及试剂 | 第18-19页 |
| ·溶液的配置 | 第19-21页 |
| ·方法 | 第21-27页 |
| ·莱芜猪心脏组织总RNA的提取 | 第21页 |
| ·总RNA质量及完整性检测 | 第21-22页 |
| ·cDNA合成技术路线 | 第22-23页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第23页 |
| ·双链cDNA的合成 | 第23页 |
| ·双链cDNA蛋白酶K消化 | 第23-24页 |
| ·Sfi I酶切 | 第24页 |
| ·双链cDNA的分级分离 | 第24页 |
| ·cDNA与λTriplEx2的连接与包装 | 第24页 |
| ·细菌培养平板的制备 | 第24-25页 |
| ·原始文库滴度及重组率的测定 | 第25页 |
| ·文库的扩增 | 第25-26页 |
| ·扩增文库滴度及重组率的测定 | 第26页 |
| ·λTriplEx2转化为pTriplEx2 | 第26页 |
| ·插入片段大小测定 | 第26-27页 |
| ·结果 | 第27-29页 |
| ·总RNA的提取与纯化 | 第27页 |
| ·双链cDNA的合成 | 第27页 |
| ·CHROMA SPIN-400凝胶过柱分离 | 第27-28页 |
| ·原始文库滴度及重组率的测定 | 第28页 |
| ·扩增文库滴度及重组率的测定 | 第28页 |
| ·插入片段大小 | 第28-29页 |
| ·讨论 | 第29-31页 |
| ·文库质量评价 | 第29页 |
| ·cDNA文库的完整性 | 第29页 |
| ·影响文库质量的因素 | 第29-30页 |
| ·载体的特点 | 第30-31页 |
| 第三章 莱芜猪心脏组织随机测序及部分表达序列标签的分析 | 第31-39页 |
| ·实验材料与试剂 | 第31页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·试剂 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-32页 |
| ·λTriplEx2转化为pTriplEx2 | 第31页 |
| ·PCR扩增 | 第31-32页 |
| ·数据处理与分析 | 第32页 |
| ·去除小片段、引物序列及部分载体序列 | 第32页 |
| ·寻找ORF进行BLASTp比对 | 第32页 |
| ·EST同源性比较 | 第32页 |
| ·结果与分析 | 第32-38页 |
| ·测序结果分析 | 第32-34页 |
| ·相似性结果分析 | 第34-38页 |
| ·开放阅读框及BLASTp比对分析 | 第34-37页 |
| ·BLASTx比对分析 | 第37页 |
| ·BLASTn比对分析 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-44页 |
| 附录 | 第44-49页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50页 |