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拟南芥蓝光受体与SPA1蛋白相互作用和功能的生化分析

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
英文缩写词第8-9页
目录第9-12页
第一章 绪论第12-32页
   ·隐花色素的介绍第12页
   ·隐花色素的历史背景第12-13页
   ·隐花色素的功能第13-21页
     ·隐花色素的表达与亚细胞定位第13-14页
     ·去黄化的光照刺激第14-16页
       ·下胚轴伸长的蓝光抑制第14-15页
       ·蓝光刺激子叶伸长第15页
       ·蓝光促使叶绿体发育第15-16页
     ·开花时间的光周期调节第16-17页
     ·光调节植物生物钟第17-18页
     ·光照刺激对于保卫细胞的发育与叶片气孔开度的影响第18页
     ·根发育的光照调节第18-19页
     ·其他功能第19-21页
       ·磁场感应第19页
       ·细胞程序性死亡(PCD)第19-20页
       ·向光性第20页
       ·向地性第20-21页
       ·有没有不依赖 CRY 的蓝光响应第21页
   ·隐花色素的结构第21-25页
     ·PHR 结构域第22-23页
     ·CCR第23-24页
     ·光诱导性构象变化第24-25页
   ·隐花色素光生物化学第25-26页
     ·蓝光依赖的隐花色素磷酸化第25-26页
     ·蓝光响应的 CRY2 蛋白降解第26页
   ·CRY 相互作用蛋白与隐花色素的信号传导第26-32页
     ·光敏色素第27-28页
     ·含有 LOV 结构域的 F-box 蛋白 ZTL第28页
     ·E3 连接酶 COP1第28-29页
     ·CRY 相互作用 bHLH 蛋白第29-31页
     ·植物蓝光受体互作蛋白的筛选第31-32页
第二章 植物蓝光受体 CRY2 与 SPA1 蛋白蓝光依赖的相互作用第32-47页
   ·材料与方法第32-36页
     ·实验材料第32-33页
       ·酵母菌株第32页
       ·酵母双杂交载体第32页
       ·光源第32-33页
       ·主要试剂及培养基配置第33页
     ·实验方法第33-36页
       ·RNA 的提取第33页
       ·PCR 扩增目的片段或启动子第33-34页
       ·酵母双杂交载体构建及转化第34-35页
       ·DNA 目的片段与载体连接反应第35页
       ·转化 DH5α大肠杆菌感受态第35页
       ·酵母双杂交载体转化第35-36页
       ·β-半乳糖苷酶活性检测第36页
   ·结果与讨论第36-47页
     ·拟南芥 SPA1 蛋白与 CRY2 蛋白在酵母细胞中蓝关依赖的相互作用第36-42页
     ·拟南芥 SPA1 蛋白与 CRY2 在植物细胞中蓝光依赖的相互作用第42-44页
     ·拟南芥 SPA1 蛋白与 CRY2 蛋白在蓝光下共定位于植物细胞中第44-45页
     ·蓝光或红光光源纯度的测定第45-47页
第三章 植物蓝光受体 CRY1 与 SPA1 蛋白蓝光依赖的相互作用第47-53页
   ·材料与方法第47页
     ·实验材料第47页
     ·实验方法第47页
   ·结果与讨论第47-53页
     ·拟南芥 SPA1 蛋白与 CRY1 在酵母细胞中蓝关依赖的相互作用第47-50页
     ·拟南芥 SPA1 蛋白与 CRY1 在植物细胞中蓝光依赖的相互作用第50-51页
     ·拟南芥 SPA1 蛋白与 CRY2 蛋白在蓝光下共定位于植物细胞中第51-53页
第四章 植物蓝光受体 CRY1、CRY2 与 SPA1 蛋白相互作用的结构域第53-68页
   ·材料与方法第53-54页
     ·实验材料第53-54页
       ·酵母菌株第53页
       ·酵母双杂交载体第53页
       ·植物材料第53-54页
     ·实验方法第54页
       ·拟南芥的种植第54页
       ·农杆菌转化第54页
       ·拟南芥的转化第54页
   ·结果与讨论第54-68页
     ·拟南芥 SPA1 蛋白与 CRY2 相互作用的结构域第54-61页
     ·拟南芥 SPA1 蛋白与 CRY1 相互作用的结构域第61-63页
     ·拟南芥 CRY1 蛋白与 CRY2 蛋白通过不同的结构域与 SPA1 相互作用第63-68页
第五章 SPA1 蛋白在蓝光信号传导途径中的作用第68-82页
   ·材料与方法第68-70页
     ·实验材料第68-69页
       ·植物材料第68页
       ·主要试剂第68-69页
     ·实验方法第69-70页
       ·RNA 的提取第69页
       ·酵母转化第69页
       ·荧光实时定量 PCR(Q-PCR)第69-70页
   ·结果与讨论第70-82页
     ·SPA1 蛋白参与 CRY2 蛋白调节植物开花第70-71页
     ·SPA1 蛋白与 CRY2 蛋白调节 CO 蛋白降解第71-73页
     ·SPA1 蛋白与 CRY2 蛋白调节 FT 基因的表达第73-74页
     ·SPA1 蛋白参与 CRY1 蛋白调节植物下胚轴的伸长第74-75页
     ·SPA1 蛋白与 CRY2 蛋白调节 HY5 蛋白降解第75-77页
     ·SPA1 蛋白与 CRY2 蛋白调节 CHS 基因的表达第77-78页
     ·SPA4 蛋白与 CRY1 蛋白蓝光依赖的相互作用第78-82页
第六章 蓝光受体 CRY1、CRY2 调节 SPA1-COP1 蛋白复合体的分子机制第82-96页
   ·材料与方法第82-83页
     ·实验材料及主要试剂第82页
     ·主要试剂第82页
     ·实验方法第82-83页
       ·酵母三杂交实验第82页
       ·其他实验方法第82-83页
   ·结果与讨论第83-96页
     ·蓝光下 CRY1 蛋白在酵母细胞中抑制 SPA1-COP1 蛋白复合体的功能第83-86页
     ·蓝光下 CRY1 蛋白在植物细胞中抑制 SPA1-COP1 蛋白复合体的功能第86-88页
     ·蓝光下 CRY2 蛋白在酵母细胞中抑制 SPA1-COP1 蛋白复合体的功能第88-91页
     ·蓝光下 CRY2 蛋白在植物细胞中抑制 SPA1-COP1 蛋白复合体的功能第91-93页
     ·蓝光下 CRY1、CRY2 蛋白抑制 SPA1-COP1 蛋白复合体不同的分子机制第93-96页
结论第96-98页
参考文献第98-123页
附录 A 攻读学位期间所发表和完成的学术论文目录第123-124页
致谢第124页

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