| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-8页 |
| 文献综述 | 第8-16页 |
| 一． 转化的必要条件 | 第8-9页 |
| 二． 莱茵衣藻的转化 | 第9-11页 |
| 三． 硅藻及其它真核单细胞藻的转化 | 第11-12页 |
| 四． 大型藻的转化 | 第12-13页 |
| 五． 海带基因工程研究 | 第13-15页 |
| 六． 本文研究内容和目标 | 第15-16页 |
| 第一章： 海带GUS本底的研究 | 第16-21页 |
| 1． 材料与方法 | 第16-18页 |
| 1．1 海带材料 | 第16页 |
| 1．2 培养基 | 第16页 |
| 1．3 GUS本底的组织化学检测 | 第16-17页 |
| 1．4 GUS活性的荧光测定 | 第17-18页 |
| 1．4．1 粗酶液的提取 | 第17页 |
| 1．4．2 荧光强度的检测 | 第17-18页 |
| 1．4．3 蛋白质含量的测定 | 第18页 |
| 2． 结果与讨论 | 第18-21页 |
| 2．1 实验结果 | 第18-19页 |
| 2．1．1 各种海带材料GUS本底的组织化学检测 | 第18页 |
| 2．1．2 各种海带材料的GUS本底定量研究 | 第18-19页 |
| 2．2 讨论 | 第19-21页 |
| 2．2．1 野生海带假阳性本底的排除 | 第19页 |
| 2．2．2 荧光分析法检测GUS活性的空白设置 | 第19页 |
| 2．2．3 GUS本底与海带发育阶段的相关性 | 第19-21页 |
| 第二章： 海带基因工程适用高效启动子的筛选 | 第21-26页 |
| 1． 材料 | 第21-22页 |
| 1．1 菌株 | 第21页 |
| 1．2 海带材料 | 第21页 |
| 1．3 细菌培养基 | 第21页 |
| 1．4 溶液配置 | 第21-22页 |
| 2． 方法 | 第22-24页 |
| 2．1 转化供体质粒的制备 | 第22-23页 |
| 2．1．1 供体质粒 | 第22页 |
| 2．1．2 大肠杆菌感受态的制备 | 第22页 |
| 2．1．3 大肠杆菌的转化 | 第22-23页 |
| 2．1．4 质粒DNA的提取 | 第23页 |
| 2．1．5质粒的电泳鉴定 | 第23页 |
| 2．2 海带的基因枪转化 | 第23-24页 |
| 2．2．1 基因枪子弹的制作 | 第23-24页 |
| 2．2．2 基因枪转化 | 第24页 |
| 2．3 GUS活性的荧光分析检测 | 第24页 |
| 3． 结果与讨论 | 第24-26页 |
| 3．1 四种启动子驱动GUS基因在海带中瞬间表达的结果 | 第24-25页 |
| 3．2 高效启动子的选择 | 第25-26页 |
| 第三章： GUS基因在孤雌生殖海带中的稳定表达 | 第26-33页 |
| 1． 材料 | 第26页 |
| 2． 方法 | 第26-29页 |
| 2．1 质粒的制备 | 第26页 |
| 2．2 受体的制备 | 第26页 |
| 2．3 海带雌配子体的转化 | 第26页 |
| 2．4 GUS的组织化学染色法检测 | 第26-27页 |
| 2．5 PCR检测转基因海带中的GUS基因 | 第27-29页 |
| 2．5．1 海带总DNA的提取 | 第27页 |
| 2．5．2 PCR引物的设计 | 第27-28页 |
| 2．5．3 PCR检测 | 第28-29页 |
| 3． 结果 | 第29-30页 |
| 3．1 GUS的组织化学染色法检测 | 第29-30页 |
| 3．1．1 GUS基因在海带雌配子体中的瞬间表达 | 第29页 |
| 3．1．2 GUS基因在孤雌生殖海带中的稳定表达 | 第29-30页 |
| 3．1．3 FCP启动子被海带转录系统识别的验证 | 第30页 |
| 3．2 转基因海带的PCR检测 | 第30页 |
| 4． 讨论 | 第30-33页 |
| 4．1 转化率 | 第30-31页 |
| 4．2 表达效率 | 第31-33页 |
| 第四章： 孤雌生殖海带对草丁膦的敏感性研究 | 第33-38页 |
| 1． 材料和方法 | 第33-34页 |
| 1．1 孤雌生殖海带及其培养方法 | 第33页 |
| 1．2 孤雌生殖海带对草丁膦的敏感性实验 | 第33页 |
| 1．3 半致死剂量（LD_（50））及95％可信限的计算 | 第33-34页 |
| 1．4 不同长度孤雌生殖海带LD_（50）差异的显著性检验 | 第34页 |
| 2． 实验结果 | 第34-36页 |
| 2．1 孤雌生殖海带对不同浓度草丁膦的毒性反应现象 | 第34-35页 |
| 2．2 孤雌生殖海带对草丁膦敏感性的统计分析 | 第35-36页 |
| 3． 讨论与结语 | 第36-38页 |
| 参考文献 | 第38-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
