| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-26页 |
| ·根癌农杆菌的研究历史 | 第13-15页 |
| ·Ti 质粒的结构区及相关的功能 | 第13-14页 |
| ·根癌农杆菌的生物学特性 | 第14页 |
| ·利用根癌农杆菌转化的原理 | 第14-15页 |
| ·根癌农杆菌的侵染能力 | 第15页 |
| ·转基因植物中外源 DNA 的整合特性 | 第15-18页 |
| ·整合位点 | 第15-16页 |
| ·整合拷贝数 | 第16页 |
| ·外源DNA 结构对整合的影响 | 第16-17页 |
| ·转化后整合位点的DNA 结构变化 | 第17页 |
| ·转化方法对整合外源基因结构的影响 | 第17-18页 |
| ·转录因子 | 第18-19页 |
| ·近年来克隆的胁迫诱导的基因 | 第18页 |
| ·转录因子的结构与功能 | 第18-19页 |
| ·转录因子的调控作用 | 第19页 |
| ·DREB(dehydration responsive element binding)转录因子 | 第19-23页 |
| ·DREB 基因在逆境胁迫中的作用 | 第20-21页 |
| ·DREB 转录因子的结构 | 第21页 |
| ·在逆境胁迫中DREB 对顺势作用元件的识别 | 第21-22页 |
| ·DREB 完成的是不依靠ABA 的信号传导途径 | 第22-23页 |
| ·DREB 转录因子对于逆境的调控反应 | 第23页 |
| ·苜蓿研究进展 | 第23-25页 |
| ·苜蓿生产的现状 | 第23-24页 |
| ·苜蓿组织培养的研究进展 | 第24-25页 |
| ·外植体的选择 | 第24-25页 |
| ·生长激素的配比 | 第25页 |
| ·目前存在问题及发展趋势 | 第25-26页 |
| 第二章 保定苜蓿高频再生体系的建立 | 第26-35页 |
| ·前言 | 第26页 |
| ·材料与方法 | 第26-27页 |
| ·材料 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-28页 |
| ·无菌苗的培养 | 第27页 |
| ·外植体的准备 | 第27页 |
| ·培养条件 | 第27页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第27-28页 |
| ·胚状体的诱导与植株的再生 | 第28页 |
| ·不同浓度的KT 对于胚状体的发生与成熟的影响 | 第28页 |
| ·水解酪蛋白对于胚状体成熟的影响 | 第28页 |
| ·结果与分析 | 第28-31页 |
| ·不同培养基对于愈伤组织诱导的影响 | 第28-29页 |
| ·外植体的选择 | 第29页 |
| ·不同浓度的KT 对于胚状体诱导的起始和成熟的影响 | 第29-30页 |
| ·水解酪蛋白对于胚状体成熟的影响 | 第30-31页 |
| ·植株的再生 | 第31页 |
| ·讨论 | 第31-35页 |
| 第三章 DREB1C—GFP 融合基因植物表达载体的构建 | 第35-49页 |
| ·前言 | 第35页 |
| ·材料与方法 | 第35-42页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-42页 |
| ·质粒提取 | 第36页 |
| ·DREB1C 基因的获得 | 第36-37页 |
| ·GFP 基因的获得 | 第37-38页 |
| ·回收PCR 扩增产物 | 第38-39页 |
| ·融合基因的获得 | 第39页 |
| ·表达载体的构建 | 第39-40页 |
| ·转化感受态细胞 | 第40-41页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第41页 |
| ·与T 载体的连接 | 第41-42页 |
| ·结果与分析 | 第42-47页 |
| ·融合基因的克隆 | 第42-45页 |
| ·表达载体pDR1- GFP 的鉴定 | 第45-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 第四章 根癌农杆菌介导的DREB1C 基因转化苜蓿 | 第49-61页 |
| ·前言 | 第49页 |
| ·材料与方法 | 第49-55页 |
| ·材料 | 第49-50页 |
| ·植物材料 | 第49页 |
| ·农杆菌菌株和质粒 | 第49-50页 |
| ·主要试剂 | 第50页 |
| ·农杆菌培养基 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-55页 |
| ·农杆菌的保存 | 第50页 |
| ·农杆菌质粒的提取及检测 | 第50-51页 |
| ·潮霉素选择压的确定 | 第51页 |
| ·头孢霉素对于苜蓿组织培养的影响 | 第51页 |
| ·农杆菌最佳侵染时间的确定 | 第51页 |
| ·最佳共培养时间的确定 | 第51-52页 |
| ·保定苜蓿再生过程中各步培养基的组成 | 第52页 |
| ·利用农杆菌侵染外植体的操作 | 第52页 |
| ·再生植株的获得 | 第52页 |
| ·植物基因组DNA 的提取 | 第52-53页 |
| ·再生植株的PCR 检测 | 第53页 |
| ·RT-PCR | 第53-55页 |
| ·试剂及材料的处理 | 第53-54页 |
| ·RNA 提取 | 第54页 |
| ·RNA 纯化 | 第54-55页 |
| ·mRNA 的反转录 | 第55页 |
| ·PCR 扩增反应 | 第55页 |
| ·结果与分析 | 第55-59页 |
| ·表达载体的鉴定 | 第55-56页 |
| ·潮霉素选择压的确定 | 第56页 |
| ·头孢霉素对于苜蓿组织培养的影响 | 第56-57页 |
| ·农杆菌最佳侵染时间的确定 | 第57页 |
| ·最佳共培养时间的确定 | 第57页 |
| ·凝胶电泳检测提取的基因组DNA | 第57-58页 |
| ·再生植株的PCR 检测 | 第58页 |
| ·再生植株总RNA 的提取和RT-PCR 检测 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| ·潮霉素（hyg）浓度的筛选 | 第59页 |
| ·苜蓿转化体系的建立 | 第59-61页 |
| 第五章 全文结论 | 第61-62页 |
| ·主要结论 | 第61页 |
| ·后续研究工作展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 作者简历 | 第70页 |
