| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-19页 |
| 第一章 绪论 | 第19-40页 |
| 第一节 果胶及果胶合成相关酶的研究概况 | 第19-27页 |
| ·果胶在苎麻脱胶过程中的负面影响 | 第19-20页 |
| ·果胶的研究现状 | 第20-27页 |
| ·果胶的结构 | 第20-22页 |
| ·果胶的生物功能 | 第22页 |
| ·果胶的生物合成 | 第22-25页 |
| ·GalAT(α-1,4-Galacturonosyltransferase)的研究现状 | 第25-26页 |
| ·UGlcAE(UDP-glucuronic acid-4-epimerase)的研究现状 | 第26-27页 |
| 第二节 CDNA 文库技术简介 | 第27-34页 |
| ·cDNA 文库构建的基本原理与方法 | 第27-28页 |
| ·全长cDNA 文库构建 | 第28-29页 |
| ·SMART 方法原理 | 第29-31页 |
| ·cDNA 文库质量的评价分析 | 第31-32页 |
| ·全长cDNA 克隆的筛选和识别 | 第32页 |
| ·从cDNA 文库分离新基因的方法 | 第32-34页 |
| 第三节 REAL-TIME PCR 简介 | 第34-39页 |
| ·PCR 过程分析 | 第34-35页 |
| ·实时定量 PCR 中的术语 | 第35-36页 |
| ·荧光化学 | 第36-37页 |
| ·定量方法 | 第37-39页 |
| 第四节 本研究的目的与意义 | 第39-40页 |
| 第二章 苎麻韧皮部全长 CDNA 文库的构建 | 第40-45页 |
| 第一节 材料与方法 | 第40-42页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·主要试剂 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-42页 |
| 第二节 结果与分析 | 第42-43页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第42页 |
| ·双链cDNA 的合成 | 第42页 |
| ·cDNA 的蛋白酶 K 降解、Sfi I 酶切及分级分离 | 第42-43页 |
| ·文库滴度与重组率测定 | 第43页 |
| ·插入片段大小检测 | 第43页 |
| 第三节 讨论 | 第43-45页 |
| 第三章 苎麻果胶合成相关酶 GALAT、UGLCAE 基因的克隆与分析.. | 第45-78页 |
| 第一节 苎麻果胶合成相关酶 GALAT 基因的克隆与分析 | 第45-61页 |
| ·材料与方法 | 第45-50页 |
| ·材料与试剂 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-61页 |
| ·GalAT 基因核心序列的克隆 | 第50-53页 |
| ·GalAT 基因的生物信息学分析 | 第53-61页 |
| 第二节 苎麻果胶合成相关酶 UGLCAE 基因的克隆与分析 | 第61-76页 |
| ·材料与方法 | 第61-64页 |
| ·材料与试剂 | 第61页 |
| ·方法 | 第61-64页 |
| ·结果与分析 | 第64-76页 |
| ·UGlcAE 基因核心片段的克隆 | 第64-67页 |
| ·UGlcAE 基因全长序列的克隆 | 第67-69页 |
| ·UGlcAE 基因的生物信息学分析 | 第69-76页 |
| 第三节 讨论 | 第76-78页 |
| ·提取的总 RNA 质量是克隆目的基因的关键所在 | 第76页 |
| ·简并引物的设计及反应条件的优化 | 第76页 |
| ·分子进化分析 | 第76-77页 |
| ·GalAT 基因及 UGlcAE 基因可能存在的基因家族分析 | 第77-78页 |
| 第四章 苎麻果胶合成相关酶 GALAT、UGLCAE 基因的组织表达分析 | 第78-95页 |
| 第一节 苎麻果胶合成相关酶 GALAT 基因的组织表达分析 | 第78-87页 |
| ·材料与方法 | 第78-80页 |
| ·材料 | 第78页 |
| ·方法 | 第78-80页 |
| ·结果与分析 | 第80-87页 |
| ·Actin 基因作为内参的可行性分析及研究 | 第80-81页 |
| ·内参照 Actin 基因的实时扩增 | 第81-83页 |
| ·GalAT 基因的实时扩增 | 第83-86页 |
| ·试验结果的校正 | 第86-87页 |
| 第二节 苎麻果胶合成相关酶UGLCAE 基因的组织表达分析 | 第87-92页 |
| ·材料与方法 | 第87-88页 |
| ·材料 | 第87页 |
| ·方法 | 第87-88页 |
| ·结果与分析 | 第88-92页 |
| ·内参照 Actin 基因的实时扩增 | 第88页 |
| ·UGlcAE 基因的扩增 | 第88-91页 |
| ·试验结果的校正 | 第91页 |
| ·GalAT 基因与 UGlcAE 基因组织表达差异的分析 | 第91-92页 |
| 第三节 讨论 | 第92-95页 |
| ·荧光实时定量 PCR 使用探讨 | 第92页 |
| ·GalAT 基因组织表达分析的意义及结果 | 第92-93页 |
| ·UGlcAE 基因组织表达分析的意义及结果 | 第93页 |
| ·GalAT 基因和 UGlcAE 基因组织表达量的比较 | 第93-95页 |
| 第五章 结论 | 第95-97页 |
| 1 主要研究结果 | 第95-96页 |
| 2 主要创新点 | 第96页 |
| 3 今后研究的方向与目标 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-107页 |
| 附录 | 第107-117页 |
| 致谢 | 第117-118页 |
| 作者简 历 | 第118页 |
