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鸡Mx基因克隆及表达分析

摘要第1-7页
Abstract第7-16页
第一章 文献综述第16-30页
   ·禽类抗病育种第16-20页
     ·机体免疫系统抗病毒感染的功能与机制第16-18页
     ·抗病毒感染的免疫因素第18-19页
     ·抗病育种途径第19-20页
   ·转基因鸡研发现状第20-21页
   ·抗禽流感转基因鸡研发意义及前景第21页
   ·Mx 蛋白基因研究进展第21-26页
     ·Mx 蛋白的发现第21-23页
     ·禽类Mx 蛋白第23-24页
     ·Mx 蛋白的作用机制第24-26页
     ·Mx 蛋白的应用第26页
   ·Real-time PCR 基本原理与方法第26-29页
     ·原理第26-27页
       ·技术方法第27-28页
       ·定量方法的选择第28-29页
   ·本研究的目的意义第29-30页
第二章 鸡 Mx 基因 GED 分析第30-47页
   ·实验材料第30-31页
     ·实验品种第30页
     ·仪器设备第30-31页
     ·试剂第31页
   ·实验方法第31-38页
     ·PCR-SSCP第31-35页
     ·PCR-PFLP第35-37页
     ·统计分析方法第37-38页
   ·结果与分析第38-44页
     ·PCR-SSCP第38-42页
     ·PCR-RFLP第42-44页
   ·讨论第44-47页
第三章 鸡胚成纤维细胞培养诱导、Mx 基因克隆、基因组结构 及生物信息学分析第47-67页
   ·材料第47-48页
     ·主要仪器设备第47页
     ·主要试剂第47页
     ·主要试剂的配制第47-48页
   ·实验方法第48-54页
     ·鸡胚成纤维细胞培养及诱导第48-50页
     ·Mx 蛋白基因全长的获得及生物信息学分析第50-52页
     ·基因组结构分析第52-54页
   ·结果与分析第54-63页
     ·原代细胞培养第54-55页
     ·Mx 基因的获得及生物信息学分析第55-59页
     ·Mx 蛋白基因结构第59-63页
   ·讨论第63-67页
第四章 不同诱导条件下白来航和北京油鸡鸡胚成纤维细胞 Mx 基因表达分析第67-77页
   ·实验材料与方法第67-69页
     ·实验材料第67页
     ·实验方法第67-69页
   ·结果与分析第69-75页
     ·半定量结果第69-71页
     ·白来航鸡胚成纤维细胞诱导表达定量结果第71-75页
   ·讨论第75-77页
第五章 Mx 基因的原核表达体系第77-91页
   ·材料第77-78页
     ·实验材料与设备第77页
     ·试剂及配制第77-78页
     ·载体与菌株第78页
   ·方法第78-81页
     ·质粒提取及纯化第78-80页
     ·酶切、目的片断回收及连接转化第80-81页
     ·重组质粒的筛选第81页
   ·原核表达载体构建及表达第81-86页
     ·Mx 蛋白ORF 的获得第81-82页
     ·稀有密码子分析第82-83页
     ·重组表达载体pET28-Mx 和pGEX-Mx 的构建与鉴定第83页
     ·翻译起始区二级结构预测第83-84页
     ·菌落PCR 鉴定阳性克隆第84-85页
     ·重组子的诱导表达第85页
     ·表达产物鉴定第85-86页
   ·结果第86-88页
     ·重组载体pETMx 和pGEXMx 的酶切鉴定第86-88页
     ·诱导表达后重组子的鉴定结果第88页
   ·讨论第88-89页
   ·稀有密码子对表达量的影响第89-91页
     ·翻译起始区对表达量的影响第90-91页
第六章 结论第91-92页
参考文献第92-102页
致谢第102-103页
附件第103-108页

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