摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-30页 |
·禽类抗病育种 | 第16-20页 |
·机体免疫系统抗病毒感染的功能与机制 | 第16-18页 |
·抗病毒感染的免疫因素 | 第18-19页 |
·抗病育种途径 | 第19-20页 |
·转基因鸡研发现状 | 第20-21页 |
·抗禽流感转基因鸡研发意义及前景 | 第21页 |
·Mx 蛋白基因研究进展 | 第21-26页 |
·Mx 蛋白的发现 | 第21-23页 |
·禽类Mx 蛋白 | 第23-24页 |
·Mx 蛋白的作用机制 | 第24-26页 |
·Mx 蛋白的应用 | 第26页 |
·Real-time PCR 基本原理与方法 | 第26-29页 |
·原理 | 第26-27页 |
·技术方法 | 第27-28页 |
·定量方法的选择 | 第28-29页 |
·本研究的目的意义 | 第29-30页 |
第二章 鸡 Mx 基因 GED 分析 | 第30-47页 |
·实验材料 | 第30-31页 |
·实验品种 | 第30页 |
·仪器设备 | 第30-31页 |
·试剂 | 第31页 |
·实验方法 | 第31-38页 |
·PCR-SSCP | 第31-35页 |
·PCR-PFLP | 第35-37页 |
·统计分析方法 | 第37-38页 |
·结果与分析 | 第38-44页 |
·PCR-SSCP | 第38-42页 |
·PCR-RFLP | 第42-44页 |
·讨论 | 第44-47页 |
第三章 鸡胚成纤维细胞培养诱导、Mx 基因克隆、基因组结构 及生物信息学分析 | 第47-67页 |
·材料 | 第47-48页 |
·主要仪器设备 | 第47页 |
·主要试剂 | 第47页 |
·主要试剂的配制 | 第47-48页 |
·实验方法 | 第48-54页 |
·鸡胚成纤维细胞培养及诱导 | 第48-50页 |
·Mx 蛋白基因全长的获得及生物信息学分析 | 第50-52页 |
·基因组结构分析 | 第52-54页 |
·结果与分析 | 第54-63页 |
·原代细胞培养 | 第54-55页 |
·Mx 基因的获得及生物信息学分析 | 第55-59页 |
·Mx 蛋白基因结构 | 第59-63页 |
·讨论 | 第63-67页 |
第四章 不同诱导条件下白来航和北京油鸡鸡胚成纤维细胞 Mx 基因表达分析 | 第67-77页 |
·实验材料与方法 | 第67-69页 |
·实验材料 | 第67页 |
·实验方法 | 第67-69页 |
·结果与分析 | 第69-75页 |
·半定量结果 | 第69-71页 |
·白来航鸡胚成纤维细胞诱导表达定量结果 | 第71-75页 |
·讨论 | 第75-77页 |
第五章 Mx 基因的原核表达体系 | 第77-91页 |
·材料 | 第77-78页 |
·实验材料与设备 | 第77页 |
·试剂及配制 | 第77-78页 |
·载体与菌株 | 第78页 |
·方法 | 第78-81页 |
·质粒提取及纯化 | 第78-80页 |
·酶切、目的片断回收及连接转化 | 第80-81页 |
·重组质粒的筛选 | 第81页 |
·原核表达载体构建及表达 | 第81-86页 |
·Mx 蛋白ORF 的获得 | 第81-82页 |
·稀有密码子分析 | 第82-83页 |
·重组表达载体pET28-Mx 和pGEX-Mx 的构建与鉴定 | 第83页 |
·翻译起始区二级结构预测 | 第83-84页 |
·菌落PCR 鉴定阳性克隆 | 第84-85页 |
·重组子的诱导表达 | 第85页 |
·表达产物鉴定 | 第85-86页 |
·结果 | 第86-88页 |
·重组载体pETMx 和pGEXMx 的酶切鉴定 | 第86-88页 |
·诱导表达后重组子的鉴定结果 | 第88页 |
·讨论 | 第88-89页 |
·稀有密码子对表达量的影响 | 第89-91页 |
·翻译起始区对表达量的影响 | 第90-91页 |
第六章 结论 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-102页 |
致谢 | 第102-103页 |
附件 | 第103-108页 |