| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-22页 |
| ·PRRS 及PRRSV | 第13-17页 |
| ·PRRS 概述 | 第13页 |
| ·PRRSV 的基因组结构及编码蛋白 | 第13-16页 |
| ·PRRSV 的遗传变异 | 第16-17页 |
| ·高致病性PRRS | 第17-21页 |
| ·高致病性PRRS 的由来 | 第17-18页 |
| ·疫病流行情况 | 第18页 |
| ·流行特点 | 第18-19页 |
| ·临床症状 | 第19-20页 |
| ·剖检变化 | 第20页 |
| ·病理组织学变化 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离与鉴定 | 第22-36页 |
| ·材料与方法 | 第22-27页 |
| ·毒株、单抗、细胞与菌种 | 第22页 |
| ·主要试剂与药品 | 第22-23页 |
| ·实验动物 | 第23页 |
| ·仪器设备 | 第23页 |
| ·临床送检样品 | 第23页 |
| ·引物设计 | 第23-24页 |
| ·样品的RT-PCR 检测 | 第24-25页 |
| ·病毒的分离 | 第25页 |
| ·分离病毒的RT-PCR 鉴定 | 第25页 |
| ·分离病毒的间接免疫荧光鉴定 | 第25页 |
| ·外源病毒的排查 | 第25页 |
| ·全长基因序列的测定 | 第25-26页 |
| ·全长基因序列的分析 | 第26-27页 |
| ·动物试验 | 第27页 |
| ·结果 | 第27-33页 |
| ·样品的检测 | 第27-28页 |
| ·病毒的分离 | 第28页 |
| ·外源病毒的检测 | 第28-29页 |
| ·分离病毒的IFA 检测 | 第29页 |
| ·PRRSV HUN4 株的8 个基因片段的获得 | 第29-30页 |
| ·HUN4 株全基因序列分析 | 第30-31页 |
| ·HUN4 株致病性试验 | 第31-33页 |
| ·讨论 | 第33-36页 |
| 第三章 高致病性PRRSV 变异毒株的分子流行病学研究 | 第36-55页 |
| ·材料和方法 | 第36-38页 |
| ·临床检测样品来源 | 第37页 |
| ·载体和菌株 | 第37页 |
| ·试剂 | 第37页 |
| ·主要仪器 | 第37页 |
| ·引物设计与合成 | 第37页 |
| ·样品总RNA 的提取 | 第37-38页 |
| ·样品的RT-PCR 检测 | 第38页 |
| ·PCR 产物的克隆 | 第38页 |
| ·序列的测定与分析 | 第38页 |
| ·结果 | 第38-51页 |
| ·不同省市临床发病猪样品中PRRSV 检出率比较 | 第38-39页 |
| ·PRRSV 分离株NSP2 蛋白部分氨基酸序列的比较分析 | 第39-42页 |
| ·PRRSV 分离株NSP2 蛋白部分氨基酸序列的同源性分析 | 第42-43页 |
| ·PRRSV 分离株NSP2 蛋白部分氨基酸序列的系统进化分析 | 第43-45页 |
| ·PRRSV 分离株GP5 蛋白氨基酸序列的系统进化分析 | 第45-47页 |
| ·PRRSV 分离株GP5 蛋白氨基酸序列的同源性分析 | 第47页 |
| ·PRRSV 分离株GP5 蛋白氨基酸序列的比较分析 | 第47-51页 |
| ·讨论 | 第51-55页 |
| 第四章 高致病性PRRSV RT-PCR 鉴别诊断方法的建立 | 第55-64页 |
| ·材料和方法 | 第55-58页 |
| ·主要试剂、菌种、载体 | 第55-56页 |
| ·仪器设备 | 第56页 |
| ·对照毒株 | 第56页 |
| ·临床送检样品 | 第56页 |
| ·人工感染试验动物的组织样品 | 第56-57页 |
| ·病料的处理 | 第57页 |
| ·病料组织总RNA 的提取 | 第57页 |
| ·引物设计 | 第57-58页 |
| ·RT-PCR 反应 | 第58页 |
| ·RT-PCR 方法的特异性试验 | 第58页 |
| ·RT-PCR 方法的敏感性试验 | 第58页 |
| ·RT-PCR 方法的符合性试验 | 第58页 |
| ·RT-PCR 方法的重复性试验 | 第58页 |
| ·结果 | 第58-61页 |
| ·RT-PCR 方法的建立及特异性试验 | 第58-59页 |
| ·RT-PCR 方法检测PRRSV 的敏感性试验 | 第59页 |
| ·RT-PCR 对临床送检样品的鉴定结果 | 第59-61页 |
| ·RT-PCR 对人工感染样品的鉴定结果 | 第61页 |
| ·RT-PCR 对样品检测的重复性试验 | 第61页 |
| ·讨论 | 第61-64页 |
| 第五章 全文结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 附录 | 第73-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 作者简历 | 第82页 |