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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定及分子流行病学分析

摘要第1-8页
Abstract第8-13页
第一章 绪论第13-22页
   ·PRRS 及PRRSV第13-17页
     ·PRRS 概述第13页
     ·PRRSV 的基因组结构及编码蛋白第13-16页
     ·PRRSV 的遗传变异第16-17页
   ·高致病性PRRS第17-21页
     ·高致病性PRRS 的由来第17-18页
     ·疫病流行情况第18页
     ·流行特点第18-19页
     ·临床症状第19-20页
     ·剖检变化第20页
     ·病理组织学变化第20-21页
   ·本研究的目的和意义第21-22页
第二章 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离与鉴定第22-36页
   ·材料与方法第22-27页
     ·毒株、单抗、细胞与菌种第22页
     ·主要试剂与药品第22-23页
     ·实验动物第23页
     ·仪器设备第23页
     ·临床送检样品第23页
     ·引物设计第23-24页
     ·样品的RT-PCR 检测第24-25页
     ·病毒的分离第25页
     ·分离病毒的RT-PCR 鉴定第25页
     ·分离病毒的间接免疫荧光鉴定第25页
     ·外源病毒的排查第25页
     ·全长基因序列的测定第25-26页
     ·全长基因序列的分析第26-27页
     ·动物试验第27页
   ·结果第27-33页
     ·样品的检测第27-28页
     ·病毒的分离第28页
     ·外源病毒的检测第28-29页
     ·分离病毒的IFA 检测第29页
     ·PRRSV HUN4 株的8 个基因片段的获得第29-30页
     ·HUN4 株全基因序列分析第30-31页
     ·HUN4 株致病性试验第31-33页
   ·讨论第33-36页
第三章 高致病性PRRSV 变异毒株的分子流行病学研究第36-55页
   ·材料和方法第36-38页
     ·临床检测样品来源第37页
     ·载体和菌株第37页
     ·试剂第37页
     ·主要仪器第37页
     ·引物设计与合成第37页
     ·样品总RNA 的提取第37-38页
     ·样品的RT-PCR 检测第38页
     ·PCR 产物的克隆第38页
     ·序列的测定与分析第38页
   ·结果第38-51页
     ·不同省市临床发病猪样品中PRRSV 检出率比较第38-39页
     ·PRRSV 分离株NSP2 蛋白部分氨基酸序列的比较分析第39-42页
     ·PRRSV 分离株NSP2 蛋白部分氨基酸序列的同源性分析第42-43页
     ·PRRSV 分离株NSP2 蛋白部分氨基酸序列的系统进化分析第43-45页
     ·PRRSV 分离株GP5 蛋白氨基酸序列的系统进化分析第45-47页
     ·PRRSV 分离株GP5 蛋白氨基酸序列的同源性分析第47页
     ·PRRSV 分离株GP5 蛋白氨基酸序列的比较分析第47-51页
   ·讨论第51-55页
第四章 高致病性PRRSV RT-PCR 鉴别诊断方法的建立第55-64页
   ·材料和方法第55-58页
     ·主要试剂、菌种、载体第55-56页
     ·仪器设备第56页
     ·对照毒株第56页
     ·临床送检样品第56页
     ·人工感染试验动物的组织样品第56-57页
     ·病料的处理第57页
     ·病料组织总RNA 的提取第57页
     ·引物设计第57-58页
     ·RT-PCR 反应第58页
     ·RT-PCR 方法的特异性试验第58页
     ·RT-PCR 方法的敏感性试验第58页
     ·RT-PCR 方法的符合性试验第58页
     ·RT-PCR 方法的重复性试验第58页
   ·结果第58-61页
     ·RT-PCR 方法的建立及特异性试验第58-59页
     ·RT-PCR 方法检测PRRSV 的敏感性试验第59页
     ·RT-PCR 对临床送检样品的鉴定结果第59-61页
     ·RT-PCR 对人工感染样品的鉴定结果第61页
     ·RT-PCR 对样品检测的重复性试验第61页
   ·讨论第61-64页
第五章 全文结论第64-65页
参考文献第65-73页
附录第73-81页
致谢第81-82页
作者简历第82页

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