摘要 | 第1-5页 |
SUMMARY | 第5-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-33页 |
一 猪带绦虫/囊尾蚴病研究进展 | 第10-21页 |
·猪带绦虫/囊尾蚴病概述 | 第10页 |
·猪带绦虫病和囊尾蚴病的流行现状及危害 | 第10-13页 |
·流行现状 | 第11-12页 |
·囊尾蚴病所导致的经济损失 | 第12-13页 |
·国内外研究进展 | 第13-17页 |
·传统的疫苗研究 | 第13-14页 |
·猪囊尾蚴组织细胞疫苗 | 第14-15页 |
·基因工程重组抗原疫苗 | 第15-16页 |
·核酸疫苗 | 第16-17页 |
·多肽疫苗 | 第17页 |
·其他新型疫苗的研究 | 第17页 |
·猪囊尾蚴病免疫诊断技术研究进展 | 第17-21页 |
·囊尾蚴病常用辅助检查 | 第18页 |
·囊尾蚴病免疫诊断技术 | 第18-21页 |
二 减毒沙门氏菌作为口服疫苗载体的研究进展 | 第21-28页 |
·沙门氏菌进入机体免疫系统的可能机制 | 第21-28页 |
·沙门氏菌通过粘膜上皮M 细胞进入机体 | 第21-23页 |
·沙门氏菌被树突细胞直接从肠腔摄取进入机体 | 第23-25页 |
·减毒的胞内菌作为DNA 疫苗载体具有很多的优势 | 第25-26页 |
·减毒沙门氏菌作为口服疫苗载体潜在的危险性 | 第26-28页 |
参考文献 | 第28-33页 |
第二章 Tsol18 基因的克隆、优化表达及高免血清的制备 | 第33-57页 |
·实验材料 | 第34-37页 |
·菌种和试剂 | 第34页 |
·仪器与设备 | 第34-35页 |
·培养基 | 第35页 |
·溶液的配制 | 第35-36页 |
·实验动物 | 第36-37页 |
·实验方法 | 第37-48页 |
·猪带绦虫虫卵的活化 | 第37页 |
·六钩蚴总RNA 的提取 | 第37-38页 |
·Tsol18 基因的RT-PCR 扩增 | 第38-40页 |
·pGEX-4T-Tsol18 表达载体的构建 | 第40-43页 |
·重组质粒的诱导表达 | 第43页 |
·表达产物的检测 | 第43-44页 |
·表达产物的表达形式分析 | 第44-45页 |
·表达蛋白纯化和稳定性分析 | 第45-47页 |
·Tsol18 高免血清的制备 | 第47-48页 |
·结果 | 第48-52页 |
·Tsol18 的 RT-PCR 扩增 | 第48-49页 |
·表达载体的鉴定与序列分析 | 第49-51页 |
·表达产物的检测 | 第51-52页 |
·表达蛋白纯化和稳定性分析 | 第52页 |
·免疫兔血清的效价 | 第52页 |
·讨论 | 第52-57页 |
·选择Tsol18 作为免疫保护基因的原因 | 第52-54页 |
·Tsol18 的表达形式和稳定性 | 第54-57页 |
第三章 表达猪带绦虫六钩蚴 Tsol18 抗原的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗株的构建 | 第57-78页 |
·实验材料 | 第58-61页 |
·菌种和质粒 | 第58-59页 |
·实验动物 | 第59页 |
·主要试剂和耗材 | 第59页 |
·培养基 | 第59-60页 |
·溶液的配制 | 第60-61页 |
·实验方法 | 第61-71页 |
·TsoL18 目的基因的制备 | 第61-63页 |
·pYA3341-Tsol18 重组质粒的构建和筛选 | 第63-66页 |
·pYA3341-Tsol18 重组质粒转化减毒鼠伤寒沙门氏菌X3730 和X4550 | 第66-68页 |
·X4550(pYA3341-Tsol18)重组菌表达蛋白的测定 | 第68页 |
·重组菌的体外稳定性试验 | 第68-69页 |
·重组菌生长曲线的测定 | 第69页 |
·重组菌的安全性试验 | 第69页 |
·重组疫苗免疫效果评价 | 第69-71页 |
·结果 | 第71-75页 |
·Tsol18 目的基因的制备 | 第71页 |
·pYA3341-Tsol18 重组质粒的鉴定 | 第71页 |
·Tsol18 重组蛋白的表达及 Westren blot 分析 | 第71-72页 |
·重组菌X4550(pYA3341-Tsol18)的体外稳定性 | 第72页 |
·重组菌生长曲线的测定 | 第72-73页 |
·重组菌的安全性实验 | 第73-74页 |
·免疫小鼠血清抗Tsol18 抗体的检测 | 第74-75页 |
·讨论 | 第75-78页 |
参考文献 | 第78-82页 |
附录 | 第82-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
作者简介 | 第84-85页 |
导师简介 | 第85-86页 |