| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第11-21页 |
| ·鸭病毒性肠炎概述 | 第11-15页 |
| ·临床特点 | 第11页 |
| ·病理变化 | 第11-12页 |
| ·流行病学 | 第12页 |
| ·鸭肠炎病毒生物学特性 | 第12-15页 |
| ·鸭病毒性肠炎诊断方法的研究进展 | 第15-19页 |
| ·病毒的分离和鉴定 | 第15-16页 |
| ·血清学方法 | 第16-17页 |
| ·鸭病毒性肠炎的防制 | 第17-18页 |
| ·治疗 | 第18页 |
| ·鸭病毒性肠炎存在的问题与展望 | 第18-19页 |
| ·疱疹病毒UL45 与UL47 的研究进展 | 第19-20页 |
| ·研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 2 材料和方法 | 第21-31页 |
| ·实验材料 | 第21-24页 |
| ·菌株和实验动物 | 第21页 |
| ·主要生化试剂 | 第21页 |
| ·主要培养基及试剂配制 | 第21-23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·DEV u145_((68aa))和u147 基因的克隆及表达引物 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-31页 |
| ·病毒的增殖 | 第24页 |
| ·病毒基因组的提取 | 第24页 |
| ·目的基因的PCR 扩增 | 第24页 |
| ·pMD18-T- u145_((68aa))和pMD18-T- u147 载体的构建 | 第24-26页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第26-27页 |
| ·目的蛋白的原核表达与鉴定 | 第27-28页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第28页 |
| ·兔抗UL45_((68aa))和UL47 蛋白多克隆抗体的制备 | 第28-29页 |
| ·兔抗UL45_((68aa))和UL47 蛋白多克隆抗体的鉴定 | 第29页 |
| ·鸡胚成纤维细胞的制备 | 第29页 |
| ·间接免疫荧光即细胞定位试验 | 第29页 |
| ·噬斑减数中和实验 | 第29-31页 |
| 3 结果 | 第31-43页 |
| ·UL45_((68aa))和UL47 片段基因的PCR 扩增 | 第31-32页 |
| ·PMD18-T-UL45_((68aa))和PMD18-T-UL47 的鉴定 | 第32-33页 |
| ·UL45 和UL47 基因的序列测定与分析 | 第33-37页 |
| ·u145 基因分析 | 第33-35页 |
| ·u147 基因分析 | 第35-37页 |
| ·DEV UL45_((68aa))和UL47 基因片段重组表达载体的鉴定 | 第37-39页 |
| ·重组质粒pGEX-6P-u145_((68aa))的鉴定 | 第37-38页 |
| ·重组质粒pET30a-u147 的鉴定 | 第38-39页 |
| ·重组质粒在E.COLI 内的表达 | 第39-40页 |
| ·重组质粒pGEX-6P-u145_((68aa))在E.coli 内的表达 | 第39页 |
| ·重组质粒pET30a-u147 在E.coli 内的表达 | 第39-40页 |
| ·兔抗UL45_((68aa))和UL47 蛋白多克隆抗体的鉴定 | 第40页 |
| ·间接免疫荧光即细胞定位试验 | 第40-41页 |
| ·兔抗UL45_((68aa))和UL47 蛋白多克隆抗体中和活性的鉴定 | 第41-43页 |
| ·家兔阴性血清中和实验结果 | 第41页 |
| ·兔抗UL45_((68aa))蛋白多克隆抗体中和实验结果 | 第41页 |
| ·兔抗UL47 蛋白多克隆抗体中和实验结果 | 第41-43页 |
| 4 讨论 | 第43-45页 |
| ·UL45 表达区域的选择 | 第43页 |
| ·蛋白纯化方式的选择 | 第43页 |
| ·有关细胞密度的讨论 | 第43-44页 |
| ·关于UL45 的讨论 | 第44页 |
| ·关于UL47 的讨论 | 第44-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 附录 | 第51-57页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第57页 |
