| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-13页 |
| 1 绪论 | 第13-15页 |
| 2 文献综述 | 第15-25页 |
| ·绿盲蝽的危害 | 第15-16页 |
| ·昆虫嗅觉机制的研究 | 第16-18页 |
| ·气味结合蛋白的研究 | 第18页 |
| ·化学感受蛋白的研究 | 第18页 |
| ·气味受体的研究 | 第18页 |
| ·气味降解酶的研究 | 第18-21页 |
| ·酯酶的研究进展 | 第19-20页 |
| ·醛氧化酶的研究进展 | 第20页 |
| ·谷胱甘肽-S-转移酶的研究进展 | 第20页 |
| ·P450 细胞色素还原酶的研究进展 | 第20-21页 |
| ·cDNA 文库的研究进展 | 第21页 |
| ·RACE 技术的原理及应用 | 第21-25页 |
| 3 绿盲蝽触角 cDNA 文库中气味降解酶类基因的分析 | 第25-27页 |
| ·材料 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-26页 |
| ·绿盲蝽触角 cDNA 文库的构建 | 第25页 |
| ·绿盲蝽 cDNA 文库气味降解酶的分析 | 第25-26页 |
| ·实验结果 | 第26页 |
| ·讨论 | 第26-27页 |
| 4 绿盲蝽酯酶基因 Aluc EST1 的克隆 | 第27-39页 |
| · | 第27-28页 |
| ·供试昆虫 | 第27-28页 |
| ·主要试剂 | 第28页 |
| ·试验方法 | 第28-32页 |
| ·绿盲蝽总 RNA 的提取 | 第28页 |
| ·反转录合成 3’和 5’ cDNA 第一链的合成 | 第28-29页 |
| ·基因特异性引物的设计 | 第29页 |
| ·3’RACE 和 5’RACE PCR 扩增 | 第29-30页 |
| ·目的 DNA 片段切胶回收 | 第30-31页 |
| ·PGEM-T easy 载体---DNA 连接体系 | 第31页 |
| ·转化 | 第31页 |
| ·菌液 PCR | 第31-32页 |
| ·结果与分析 | 第32-37页 |
| ·基因序列的克隆与分析 | 第32-36页 |
| ·绿盲蝽酯酶基因与其他物种酯酶基因序列比对和进化树构建 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| 5 绿盲蝽酯酶基因 RT-PCR | 第39-46页 |
| ·材料 | 第39页 |
| ·试供昆虫 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·试验方法 | 第39-42页 |
| ·绿盲蝽总 RNA 的提取 | 第39页 |
| ·第一链 cDNA 的合成 | 第39-40页 |
| ·内参基因的克隆 | 第40-41页 |
| ·半定量 PCR(RT-PCR)引物设计 | 第41页 |
| ·半定量RT-PCR检测绿盲蝽酯酶基因在昆虫各部分的表达 | 第41-42页 |
| ·结果与分析 | 第42-44页 |
| ·内参基因克隆结果 | 第42-44页 |
| ·RT-PCR 结果 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| 6 绿盲蝽酯酶基因的实时荧光定量 PCR 表达谱验证34 | 第46-51页 |
| ·材料 | 第46页 |
| ·试供昆虫 | 第46页 |
| ·主要试剂 | 第46页 |
| ·试验方法 | 第46-48页 |
| ·绿盲蝽总 RNA 的提取 | 第46-47页 |
| ·DNase I 消化 | 第47页 |
| ·第一链 cDNA 的合成 | 第47页 |
| ·实时荧光定量 PCR 引物的设计与合成 | 第47-48页 |
| ·实时荧光定量 PCR 引物扩增效率检测 | 第48页 |
| ·利用实时荧光定量 PCR 构建基因表达谱 | 第48页 |
| ·结果与分析 | 第48-49页 |
| ·实时荧光定量 PCR 引物扩增效率检测结果 | 第48-49页 |
| ·实时荧光定量 PCR 检测表达谱结果与分析 | 第49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 7 绿盲蝽酯酶酶活力测定 | 第51-53页 |
| ·材料 | 第51页 |
| ·试供昆虫 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51页 |
| ·试验方法 | 第51页 |
| ·酯酶的提取 | 第51页 |
| ·酯酶的测定 | 第51页 |
| ·结果与分析 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| 8 绿盲蝽酯酶基因的酶谱分析 | 第53-57页 |
| ·材料 | 第53页 |
| ·供试昆虫 | 第53页 |
| ·主要试剂 | 第53页 |
| ·试验方法 | 第53-54页 |
| ·酯酶的提取 | 第53页 |
| ·酶谱电泳检测 | 第53-54页 |
| ·实验结果 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 9 全文总结 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 攻读硕士期间论文发表情况 | 第67页 |
