| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 前言 | 第8-18页 |
| ·海洋抗肿瘤药物的发展与现状 | 第8-10页 |
| ·海洋微生物产生的抗肿瘤天然产物 | 第10-17页 |
| ·源于海洋细菌的抗肿瘤天然产物 | 第11-12页 |
| ·源于海洋放线菌的抗肿瘤天然产物 | 第12-14页 |
| ·源于海洋真菌的抗肿瘤天然产物 | 第14-15页 |
| ·源于海洋微藻的抗肿瘤活性物质 | 第15-16页 |
| ·存在的问题与展望 | 第16-17页 |
| ·本论文研究的目的、意义与主要内容 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-29页 |
| ·实验技术路线示意图 | 第18页 |
| ·实验材料 | 第18-20页 |
| ·肿瘤细胞株与菌株 | 第18页 |
| ·试剂 | 第18-19页 |
| ·仪器 | 第19-20页 |
| ·培养基 | 第20页 |
| ·常用溶液 | 第20页 |
| ·肿瘤细胞培养 | 第20-22页 |
| ·肿瘤细胞计数的方法 | 第20-21页 |
| ·肿瘤细胞的传代培养 | 第21-22页 |
| ·肿瘤细胞的冻存 | 第22页 |
| ·肿瘤细胞的复苏 | 第22页 |
| ·细胞毒模型 | 第22-23页 |
| ·MTT 模型 | 第22-23页 |
| ·ID_(50)的计算方法 | 第23页 |
| ·菌株次级代谢产物对肿瘤细胞形态的影响 | 第23页 |
| ·菌株的分类鉴定 | 第23-25页 |
| ·形态观察 | 第23-24页 |
| ·生理生化特征检测 | 第24页 |
| ·药敏检测 | 第24页 |
| ·细菌基因组DNA 的提取 | 第24页 |
| ·菌株16S rDNA 序列分析及其系统发育分析 | 第24-25页 |
| ·菌株合成抗肿瘤活性物质发酵工艺的优化 | 第25-29页 |
| ·培养条件 | 第25页 |
| ·检测方法 | 第25-26页 |
| ·培养基组成对菌株合成抗肿瘤活性物质的影响 | 第26-27页 |
| ·发酵条件对菌株HB01078、HB01085 合成抗肿瘤活性物质的影响 | 第27-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-58页 |
| ·抗肿瘤活性菌株的复筛 | 第29-31页 |
| ·MTT 法检测菌株的抗肿瘤活性 | 第29-30页 |
| ·菌株次级代谢产物对肿瘤细胞形态的影响 | 第30-31页 |
| ·菌株发酵液的抗肿瘤活性对海水的依赖性 | 第31页 |
| ·12 株抗肿瘤活性细菌的形态观察、药敏性检测和生理生化测定 | 第31-36页 |
| ·形态观察 | 第31-32页 |
| ·生理生化特征检测 | 第32-36页 |
| ·药敏检测 | 第36页 |
| ·菌株HB02037 的分类鉴定 | 第36-37页 |
| ·菌株HB01078 的分类鉴定 | 第37-39页 |
| ·16S rDNA 序列测定及其系统发育分析 | 第38页 |
| ·鉴定结果 | 第38-39页 |
| ·菌株HB01085 的分类鉴定 | 第39-42页 |
| ·16S rDNA 序列测定及其系统发育分析 | 第40页 |
| ·菌株HB01085 和Aurantimonas coralicida 的比较 | 第40-41页 |
| ·鉴定结果 | 第41-42页 |
| ·菌株HB01078、HB01085 合成抗肿瘤活性物质的发酵工艺优化 | 第42-54页 |
| ·培养基组成对菌株合成抗肿瘤活性物质的影响 | 第42-45页 |
| ·发酵培养基的盐度对菌株合成抗肿瘤活性物质的影响 | 第45-46页 |
| ·采用均匀设计法优化发酵培养基 | 第46-49页 |
| ·培养基初始pH 值的影响 | 第49-50页 |
| ·温度的影响 | 第50-51页 |
| ·装液量的影响 | 第51页 |
| ·种龄的影响 | 第51-52页 |
| ·接种量的影响 | 第52-53页 |
| ·转速的影响 | 第53页 |
| ·发酵时间的影响 | 第53-54页 |
| ·小结 | 第54页 |
| ·菌株 HB01078 和 HB01085 的抗肿瘤活性特征 | 第54-56页 |
| ·菌株 HB01078 和 HB01085 活性物质的热稳定性和 pH 稳定性 | 第56-58页 |
| ·热稳定性 | 第56页 |
| ·pH 稳定性 | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-62页 |
| ·肿瘤细胞培养事项 | 第58页 |
| ·抗肿瘤活性菌株的复筛 | 第58-59页 |
| ·菌株的分类鉴定 | 第59-60页 |
| ·菌株发酵工艺的优化 | 第60-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 缩略语 | 第68-75页 |
| 致 谢 | 第75页 |