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土壤中苏云金杆菌HBF-1菌株毒蛋白ELISA检测方法的建立及应用

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
1 引言第10-20页
   ·Bt的分类第10-11页
   ·Bt的杀虫范围第11页
   ·Bt杀虫晶体蛋白及其基因第11-12页
   ·Bt的生态学分布第12页
   ·土壤中Bt毒蛋白的残留与降解第12-14页
     ·农田土壤中Bt毒蛋白的来源和累积第12-13页
     ·Bt毒素的微生物利用与降解第13页
     ·Bt毒素与土壤微粒的吸附结合第13-14页
     ·Bt毒蛋白在土壤中的降解及持续时间第14页
   ·Bt毒蛋白的测定方法第14-18页
     ·协同凝集反应第15页
     ·免疫印迹分析法第15页
     ·免疫PCR技术第15-16页
     ·免疫试纸条法第16页
     ·流式细胞仪法第16页
     ·ELISA检测法第16-17页
     ·ELISA在苏云金杆菌晶体蛋白检测中的应用第17-18页
   ·苏云金芽胞杆菌HBF-1菌株的生物学特性第18页
   ·本研究的目的与意义第18-20页
2 材料与方法第20-29页
   ·材料第20-23页
     ·供试材料第20页
     ·主要仪器设备第20页
     ·主要试剂第20-21页
     ·实验中所需主要溶液的配制第21-23页
   ·方法第23-29页
     ·Bt菌株HBF-1杀虫蛋白的提取与纯化第23页
     ·Bt杀虫蛋白抗体的制备第23-24页
     ·抗血清中免疫球蛋白(IgG)的提取第24-25页
     ·免疫球蛋白(IgG)的含量和纯度测定第25页
     ·免疫球蛋白(IgG)的酶标记第25页
     ·土壤中Bt杀虫蛋白测定方法的建立第25-29页
3 结果与分析第29-44页
   ·Bt毒蛋白抗原的分离纯化第29页
   ·第三次免疫后抗血清效价的测定第29-30页
   ·末次免疫后抗血清效价的测定第30页
   ·免疫球蛋白(IgG)的提取与浓度的测定第30-31页
   ·酶标抗体的制备结果第31页
   ·土壤中Bt杀虫蛋白的测定方法的建立第31-44页
     ·三种提取液对土壤中Bt蛋白提取效果的比较第31-33页
     ·三种ELISA方法的研究第33-37页
     ·双抗夹心ELISA法试验条件的选择第37-40页
     ·应用双抗夹心ELISA法检测花生田中Bt菌株HBF-1毒蛋白的消长动态第40-44页
4 讨论第44-47页
   ·抗原的制备第44页
   ·抗体的制备第44页
   ·抗体的纯化和酶标抗体的制备第44-45页
   ·三种ELISA方法的比较第45页
   ·双抗夹心ELISA法的建立第45-46页
   ·土壤中Bt蛋白的消长动态第46-47页
5 结论第47-48页
参考文献第48-55页
发表论文第55-56页
参研项目第56-57页
作者简介第57-58页
致谢第58页

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