| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩写 | 第8-14页 |
| 引言 | 第14-16页 |
| 第一章 植酸酶的研究进展 | 第16-37页 |
| ·植酸 | 第16-18页 |
| ·植酸的发现 | 第16页 |
| ·植酸的理化性质 | 第16-17页 |
| ·植酸的分布 | 第17页 |
| ·植酸所引发的问题 | 第17-18页 |
| ·植物性饲料植酸所引发的问题 | 第17-18页 |
| ·土壤植酸所引发的问题 | 第18页 |
| ·植酸酶 | 第18-35页 |
| ·植酸酶的来源 | 第18-19页 |
| ·植酸酶的分类 | 第19页 |
| ·植酸酶的理化性质 | 第19-22页 |
| ·分子量 | 第19页 |
| ·最适作用温度及最适pH | 第19页 |
| ·热稳定性 | 第19-21页 |
| ·动力学 | 第21页 |
| ·抑制与激活 | 第21-22页 |
| ·作用机理 | 第22页 |
| ·植酸酶酶源菌株的筛选方法 | 第22-23页 |
| ·植酸酶的分子生物学 | 第23-26页 |
| ·植酸酶的基因工程 | 第26-33页 |
| ·植酸酶基因在微生物中的表达 | 第27-31页 |
| ·植酸酶基因在植物中的表达 | 第31-33页 |
| ·植酸酶的应用 | 第33-35页 |
| ·植酸酶研究的相关专利情况 | 第35页 |
| ·本论文研究内容及意义 | 第35-37页 |
| 第二章 植酸酶产生菌的筛选 | 第37-46页 |
| ·实验材料 | 第37-38页 |
| ·主要药品 | 第37页 |
| ·培养基 | 第37页 |
| ·主要配制试剂 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-39页 |
| ·植酸酶产生菌的筛选 | 第38页 |
| ·植酸酶活力的测定 | 第38-39页 |
| ·植酸酶pH适性和温度适性的测定 | 第39页 |
| ·菌种鉴定 | 第39页 |
| ·结果与分析 | 第39-44页 |
| ·植酸酶产生菌的获得 | 第39-40页 |
| ·最适pH和最适温度 | 第40-42页 |
| ·菌株WY-6的鉴定 | 第42-43页 |
| ·菌株WY-2的鉴定 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 第三章 植酸酶基因的克隆 | 第46-58页 |
| ·实验材料 | 第46-47页 |
| ·菌种与载体 | 第46页 |
| ·主要药品 | 第46页 |
| ·培养基 | 第46页 |
| ·主要配制试剂 | 第46-47页 |
| ·实验方法 | 第47-49页 |
| ·霉菌基因组DNA的提取 | 第47页 |
| ·植酸酶基因的克隆 | 第47-49页 |
| ·植酸酶基因序列的测序及测序分析 | 第49页 |
| ·结果与分析 | 第49-56页 |
| ·植酸酶基因的克隆 | 第49-51页 |
| ·黑曲霉WY-6植酸酶基因序列及序列分析 | 第51-53页 |
| ·烟曲霉WY-2植酸酶基因序列及序列分析 | 第53-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| 第四章 黑曲霉WY-6植酸酶基因在毕赤酵母中的表达 | 第58-72页 |
| ·实验材料 | 第58-59页 |
| ·菌种与质粒 | 第58页 |
| ·主要药品 | 第58页 |
| ·培养基 | 第58-59页 |
| ·主要配制试剂 | 第59页 |
| ·实验方法 | 第59-65页 |
| ·成熟植酸酶基因编码区的扩增 | 第59-60页 |
| ·植酸酶基因与表达载体pPIC9K的酶切、连接、转化 | 第60-61页 |
| ·重组载体的鉴定 | 第61页 |
| ·重组载体的线性化 | 第61-62页 |
| ·酵母转化及筛选 | 第62-63页 |
| ·基因工程植酸酶的诱导表达 | 第63页 |
| ·基因工程植酸酶的分布 | 第63页 |
| ·基因工程植酸酶的分离纯化 | 第63-64页 |
| ·基因工程植酸酶的性质测定 | 第64-65页 |
| ·结果与讨论 | 第65-71页 |
| ·酵母表达载体的构建 | 第65-66页 |
| ·转化与筛选 | 第66页 |
| ·基因工程植酸酶的诱导表达及分布 | 第66-67页 |
| ·基因工程植酸酶的纯化 | 第67-68页 |
| ·基因工程植酸酶的性质分析 | 第68-71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| 第五章 烟曲霉WY-2植酸酶基因在毕赤酵母中的表达 | 第72-83页 |
| ·实验材料 | 第72页 |
| ·实验方法 | 第72-74页 |
| ·植酸酶基因工程酵母转化载体的构建 | 第72页 |
| ·植酸酶基因与表达载体pPIC9K的酶切、连接、转化 | 第72-73页 |
| ·酵母转化及筛选 | 第73页 |
| ·基因工程植酸酶的诱导表达 | 第73页 |
| ·基因工程植酸酶的分离纯化 | 第73页 |
| ·基因工程植酸酶的性质测定 | 第73-74页 |
| ·结果与讨论 | 第74-82页 |
| ·酵母表达载体的构建 | 第74页 |
| ·基因工程植酸酶的诱导表达 | 第74-75页 |
| ·基因工程植酸酶的纯化 | 第75-76页 |
| ·基因工程植酸酶的性质分析 | 第76-80页 |
| ·生物信息学分析 | 第80-82页 |
| ·小结 | 第82-83页 |
| 第六章 烟曲霉WY-2植酸酶基因在烟草中的表达研究 | 第83-102页 |
| ·烟曲霉WY-2植酸酶基因在烟草中的表达及重组酶性质 | 第83-97页 |
| ·实验材料 | 第83-84页 |
| ·质粒、菌种与宿主 | 第83页 |
| ·主要药品 | 第83页 |
| ·培养基 | 第83-84页 |
| ·主要配制试剂 | 第84页 |
| ·实验方法 | 第84-90页 |
| ·植物转化载体的构建 | 第84-85页 |
| ·烟草的转化与培养 | 第85页 |
| ·转基因烟草后代的筛选 | 第85页 |
| ·植酸酶活力的测定 | 第85-86页 |
| ·转基因烟草的鉴定 | 第86-89页 |
| ·烟草重组植酸酶表达水平的检测 | 第89页 |
| ·烟草重组植酸酶的性质测定 | 第89-90页 |
| ·结果与分析 | 第90-96页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第90-91页 |
| ·转基因烟草的获得 | 第91-93页 |
| ·烟草重组植酸酶表达水平分析 | 第93-94页 |
| ·烟草重组植酸酶的酶学性质分析 | 第94-96页 |
| ·讨论 | 第96-97页 |
| ·转基因烟草的磷营养研究 | 第97-100页 |
| ·实验材料 | 第97页 |
| ·实验方法 | 第97-98页 |
| ·烟草重组植酸酶分泌水平的测定 | 第97页 |
| ·转基因烟草在磷胁迫条件下的生长状况 | 第97-98页 |
| ·结果与分析 | 第98-99页 |
| ·烟草重组植酸酶的分泌表达 | 第98页 |
| ·转基因烟草的生长与磷营养 | 第98-99页 |
| ·讨论 | 第99-100页 |
| ·小结 | 第100-102页 |
| 第七章 结论与展望 | 第102-105页 |
| ·结论 | 第102-103页 |
| ·创新点摘要 | 第103页 |
| ·有待进一步开展的工作 | 第103-104页 |
| ·展望 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-113页 |
| 附录Ⅰ | 第113-123页 |
| 攻读博士学位期间发表及完成的学术论文情况 | 第123-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
