| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-47页 |
| 1 养殖蟹类病原菌 | 第13-18页 |
| ·细菌 | 第13-15页 |
| ·弧菌 | 第13-14页 |
| ·其它细菌 | 第14-15页 |
| ·真菌 | 第15-16页 |
| ·蟹类原核样微生物病原 | 第16-17页 |
| ·病毒 | 第17-18页 |
| 2 梭子蟹养殖现状以及病害发生概况 | 第18-20页 |
| ·梭子蟹养殖现状 | 第18页 |
| ·梭子蟹养殖病害发生概况 | 第18-19页 |
| ·梭子蟹“乳化病”的概况 | 第19-20页 |
| 3 酵母在海洋环境中的分布与多样性 | 第20-26页 |
| ·酵母菌细胞密度 | 第20页 |
| ·酵母菌在河口和红树林区域的分布 | 第20-23页 |
| ·远海与深海环境中的酵母菌 | 第23-26页 |
| 4 海洋酵母菌资源 | 第26-32页 |
| ·产纤维素的海洋酵母 | 第27页 |
| ·产菊糖酶的海洋酵母 | 第27-28页 |
| ·产碱性蛋白酶的海洋酵母 | 第28-29页 |
| ·产淀粉酶的海洋酵母 | 第29页 |
| ·产脂酶的海洋酵母 | 第29-30页 |
| ·产嗜杀因子的海洋酵母 | 第30-31页 |
| ·产植酸酶的海洋酵母 | 第31-32页 |
| 5 嗜杀酵母和嗜杀因子的作用机理 | 第32-46页 |
| ·酿酒酵母嗜杀系统 | 第32-36页 |
| ·Ustilago maydis 嗜杀系统 | 第36-38页 |
| ·Kluyveromyces lactis 嗜杀系统 | 第38-39页 |
| ·Pichia 和Williopsis 嗜杀系统 | 第39-42页 |
| ·其它酵母嗜杀系统 | 第42-44页 |
| ·嗜杀因子的应用 | 第44-46页 |
| ·嗜杀酵母在发酵工业中的应用 | 第44页 |
| ·嗜杀因子作为潜在抗真菌药物 | 第44-45页 |
| ·在抗水果蔬菜腐烂中的应用 | 第45页 |
| ·在转基因植物中的应用 | 第45页 |
| ·在酵母菌基因工程中的应用 | 第45-46页 |
| 6 论文的研究内容、意义与技术路线 | 第46-47页 |
| 第二章 梭子蟹病原酵母菌 WCY 的鉴定及致病性研究 | 第47-59页 |
| 前言 | 第47页 |
| 1 材料与方法 | 第47-51页 |
| ·病原酵母菌株 | 第47页 |
| ·健康梭子蟹及暂养 | 第47-48页 |
| ·培养基 | 第48页 |
| ·病原酵母菌的培养 | 第48页 |
| ·梭子蟹的病原菌感染实验 | 第48页 |
| ·病原酵母的菌种鉴定 | 第48-51页 |
| ·常规形态特征和生理生化鉴定 | 第48-50页 |
| ·酵母菌分子生物学鉴定 | 第50-51页 |
| 2 结果 | 第51-56页 |
| ·梭子蟹人工感染实验结果 | 第51-53页 |
| ·酵母菌常规形态特征和生理生化反应实验结果 | 第53-56页 |
| ·酵母菌WCY 形态特征 | 第53-54页 |
| ·酵母菌WCY 生理生化反应实验结果 | 第54页 |
| ·酵母菌WCY 分子生物学鉴定实验结果 | 第54-56页 |
| 3 讨论 | 第56-58页 |
| 4 小结 | 第58-59页 |
| 第三章 海洋嗜杀酵母的筛选与鉴定 | 第59-70页 |
| 前言 | 第59-60页 |
| 1 材料与方法 | 第60-61页 |
| ·样品来源 | 第60页 |
| ·海洋酵母的分离 | 第60页 |
| ·嗜杀酵母筛选培养基 | 第60页 |
| ·嗜杀酵母的筛选 | 第60-61页 |
| ·嗜杀酵母的菌种鉴定 | 第61页 |
| 2 结果 | 第61-67页 |
| ·海洋嗜杀酵母筛选结果 | 第61-63页 |
| ·海洋嗜杀酵母菌种鉴定结果 | 第63-67页 |
| 3 讨论 | 第67-69页 |
| 4 小结 | 第69-70页 |
| 第四章 菌株YF076产嗜杀因子的发酵条件与嗜杀因子最佳抑菌条件研究 | 第70-80页 |
| 前言 | 第70-71页 |
| 1 材料和方法 | 第71-72页 |
| ·嗜杀酵母菌种 | 第71页 |
| ·嗜杀酵母活性检测培养基 | 第71页 |
| ·盐度检测培养基 | 第71页 |
| ·温度检测培养基 | 第71页 |
| ·pH 检测培养基 | 第71页 |
| ·嗜杀酵母发酵培养基 | 第71页 |
| ·嗜杀因子发酵基本培养基 | 第71页 |
| ·盐度实验培养基 | 第71页 |
| ·温度实验培养基 | 第71页 |
| ·pH 实验培养基 | 第71页 |
| ·嗜杀酵母的发酵培养 | 第71-72页 |
| ·嗜杀因子的浓缩 | 第72页 |
| ·嗜杀因子抑菌活性的检测 | 第72页 |
| 2 结果 | 第72-78页 |
| ·盐度、温度和pH 值对嗜杀因子抑菌作用的影响 | 第72-75页 |
| ·盐度、温度和pH 值对菌株YF076 发酵产生嗜杀因子的影响 | 第75-78页 |
| 3 讨论 | 第78-79页 |
| 4 小结 | 第79-80页 |
| 第五章 海洋嗜杀酵母YF076 嗜杀因子基因的克隆及推导蛋白序列分析 | 第80-94页 |
| 前言 | 第80页 |
| 1 材料与方法 | 第80-85页 |
| ·嗜杀酵母菌株 | 第80页 |
| ·培养基和试剂配制 | 第80-81页 |
| ·酵母菌基因组总DNA 的提取 | 第81页 |
| ·引物设计 | 第81页 |
| ·嗜杀因子基因的PCR 扩增 | 第81-82页 |
| ·PCR 产物的回收 | 第82页 |
| ·PCR 产物的克隆 | 第82-85页 |
| ·连接反应 | 第82页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第82-83页 |
| ·转化大肠杆菌 | 第83页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第83页 |
| ·质粒的提取 | 第83-85页 |
| ·阳性质粒的PCR 及双酶切验证 | 第85页 |
| ·琼脂糖电泳检测 PCR 结果及测序 | 第85页 |
| ·推导蛋白的序列分析 | 第85页 |
| 2 结果 | 第85-91页 |
| ·嗜杀因子基因扩增、PCR 产物回收及转化质粒连接的鉴定 | 第85-87页 |
| ·嗜杀因子基因测序结果及分析 | 第87-89页 |
| ·嗜杀因子基因编码推导蛋白的分析 | 第89-91页 |
| 3 讨论 | 第91-93页 |
| ·嗜杀因子的基因克隆 | 第91-92页 |
| ·嗜杀因子推导蛋白的分析 | 第92-93页 |
| 4 小结 | 第93-94页 |
| 第六章 海洋酵母菌YF076嗜杀因子的纯化及特性研究 | 第94-113页 |
| 前言 | 第94-95页 |
| 1 材料与方法 | 第95-100页 |
| ·嗜杀酵母菌种 | 第95页 |
| ·嗜杀因子发酵培养基 | 第95页 |
| ·嗜杀酵母YF076 的培养 | 第95页 |
| ·嗜杀因子的粗酶浓缩液的制备 | 第95页 |
| ·总蛋白含量的测定 | 第95页 |
| ·嗜杀因子β-1,3-D-葡聚糖酶活力的测定 | 第95页 |
| ·嗜杀因子样品的平衡 | 第95页 |
| ·Sephadex G75 凝胶过滤 | 第95-96页 |
| ·凝胶的处理和装柱 | 第95-96页 |
| ·平衡 | 第96页 |
| ·上样和洗脱 | 第96页 |
| ·DEAE-Sephorose Fast Flow 阴离子交换 | 第96页 |
| ·超滤浓缩收集液 | 第96-97页 |
| ·不连续SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE ) | 第97-98页 |
| ·电泳试剂 | 第97页 |
| ·考马斯亮蓝染色试剂和方法 | 第97页 |
| ·SDS-PAGE 流程 | 第97-98页 |
| ·培养时间对嗜杀因子β-1,3-D-葡聚糖酶活力的影响 | 第98页 |
| ·嗜杀因子（β-1,3-D-葡聚糖酶）的最适反应温度和温度稳定性 | 第98页 |
| ·嗜杀因子（β-1,3-D-葡聚糖酶）的最适反应pH 和pH 稳定性 | 第98-99页 |
| ·金属离子对嗜杀因子酶活力的影响 | 第99页 |
| ·蛋白抑制剂对嗜杀因子酶活力的影响 | 第99页 |
| ·嗜杀因子酶的动力学常数（Km 值和Vmax）的测定 | 第99页 |
| ·嗜杀因子水解海带多糖的产物分析 | 第99-100页 |
| 2 结果 | 第100-109页 |
| ·嗜杀因子的纯化 | 第100-103页 |
| ·培养时间对嗜杀酵母β-1,3-D-葡聚糖酶活力的影响 | 第103-104页 |
| ·纯化嗜杀因子作用的最适温度和温度稳定性 | 第104页 |
| ·纯化嗜杀因子作用的最适pH 和pH 稳定性 | 第104页 |
| ·不同金属离子对纯化嗜杀因子的作用 | 第104-105页 |
| ·不同蛋白抑制剂对纯化嗜杀因子酶活力的影响 | 第105页 |
| ·嗜杀因子的β-1,3-D-葡聚糖酶反应动力学常数（Km 值和Vmax） | 第105页 |
| ·嗜杀因子海带多糖水解产物的分析 | 第105-109页 |
| 3 讨论 | 第109-112页 |
| ·嗜杀因子的纯化 | 第109页 |
| ·嗜杀因子作用的最适温度和温度稳定性 | 第109页 |
| ·嗜杀因子作用的最适pH 和pH 稳定性 | 第109-110页 |
| ·不同金属离子对纯化嗜杀因子的作用 | 第110页 |
| ·不同蛋白抑制剂对嗜杀因子酶活力的影响 | 第110-111页 |
| ·嗜杀因子的β-1,3-D-葡聚糖酶反应动力学常数（Km 值和Vmax） | 第111-112页 |
| 4 小结 | 第112-113页 |
| 论文总结 | 第113-115页 |
| 论文的创新点与展望 | 第115-117页 |
| 1 论文的创新之处 | 第115-116页 |
| 2 展望 | 第116-117页 |
| 参考文献 | 第117-125页 |
| 攻读博士期间已完成与发表的论文与成果 | 第125-126页 |
| 致谢 | 第126页 |
