摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-15页 |
第一部分 抗稻瘟病基因pi-d2导入水稻提高稻瘟病抗性的研究 | 第15-85页 |
第一章 文献综述 | 第15-43页 |
1 稻瘟病菌的研究概况 | 第15-23页 |
·稻瘟病病原生物学 | 第15-16页 |
·稻瘟病的侵染循环与危害机理 | 第16-17页 |
·稻瘟病菌生理小种研究 | 第17-20页 |
·生理小种的鉴别与命名 | 第17-19页 |
·稻瘟病致病分化和致病性变异研究 | 第19-20页 |
·稻瘟病菌基因组的研究 | 第20-21页 |
·稻瘟病菌致病的分子机制 | 第21-23页 |
2 水稻对稻瘟病抗性的研究 | 第23-32页 |
·植物抗病性 | 第23-24页 |
·植物抗病基因(R)的特点 | 第24-26页 |
·R基因结构与植物抗病性 | 第25-26页 |
·R基因信号传导 | 第26页 |
·植物抗病性分子机制 | 第26-27页 |
·与病原物亲和因子有关的植物抗病性机制 | 第26-27页 |
·与病原物非亲和因子有关的植物抗病性机制 | 第27页 |
·水稻抗稻瘟病基因 | 第27-32页 |
·Pi-b | 第27-29页 |
·Pi-ta | 第29页 |
·Pi-9 | 第29-30页 |
·Pi2/Piz-t | 第30页 |
·Pi-d2研究情况 | 第30-32页 |
3 水稻抗稻瘟病育种研究 | 第32-36页 |
·常规抗病育种 | 第32-33页 |
·抗性基因的来源 | 第32-33页 |
·育种途径 | 第33页 |
·生物技术育种 | 第33-36页 |
·组织培养应用于抗稻瘟病育种 | 第33-34页 |
·基因工程育种 | 第34-35页 |
·分子标记辅助育种 | 第35-36页 |
4 植物抗真菌基因工程研究 | 第36-42页 |
·基于寄主一病原菌互作体系的基因工程策略 | 第37-38页 |
·R基因的利用 | 第37页 |
·无毒基因的利用 | 第37-38页 |
·信号传导因子的利用 | 第38页 |
·基于广谱抗真菌蛋白基因工程的策略 | 第38-40页 |
·几丁质酶基因和和β-1,3葡聚糖酶基因 | 第38-39页 |
·核糖体失活蛋白(ribosomal inactivation protein,RIP)基因 | 第39页 |
·葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,GO)基因 | 第39页 |
·植保素 | 第39-40页 |
·基于杀菌肽基因工程策略 | 第40页 |
·利用人工控制细胞死亡策略培育抗稻瘟病水稻 | 第40-41页 |
·植物基因工程抗病育种存在的主要问题及发展 | 第41-42页 |
·对植物抗病机制了解不够 | 第41页 |
·抗病基因的分离克隆 | 第41页 |
·基因的导人与整合 | 第41页 |
·转基因外植体的再生 | 第41页 |
·基因表达的调控与稳定性遗传 | 第41-42页 |
·转基因抗病植物的安全性 | 第42页 |
5 本研究的目的意义 | 第42-43页 |
第二章 材料与方法 | 第43-55页 |
1 材料 | 第43-45页 |
·植物材料 | 第43页 |
·菌株和质粒 | 第43-44页 |
·培养基成分 | 第44页 |
·适用于水稻的培养基 | 第44页 |
·细菌培养基的配制 | 第44页 |
·重要试剂及溶液 | 第44-45页 |
·重要试剂 | 第44-45页 |
·重要溶液 | 第45页 |
·重要仪器设备 | 第45页 |
2 试验方法 | 第45-55页 |
·培养基试验 | 第45-46页 |
·水稻幼穗培养 | 第46页 |
·水稻幼胚培养 | 第46页 |
·水稻成熟胚培养 | 第46页 |
·愈伤组织对潮霉素(Hyg)的敏感性实验 | 第46页 |
·植物硫激素(Phytosulfokine,PSK)在农杆菌转化过程中作用实验 | 第46页 |
·水稻愈伤组织转化 | 第46-47页 |
·菌液准备 | 第46页 |
·转化 | 第46-47页 |
·洗菌与选择 | 第47页 |
·分化与生根 | 第47页 |
·转基因植株的分子生物学检测 | 第47-51页 |
·转基因植株的PCR检测 | 第47-48页 |
·转基因植株的Southern Blot鉴定 | 第48-50页 |
·转基因植株的RT-PCR检验 | 第50-51页 |
·GUS组织化学染色 | 第51-52页 |
·转基因子代潮霉素抗性遗传分析 | 第52页 |
·转基因后代稻瘟病抗性鉴定 | 第52-54页 |
·稻瘟病菌系的培养 | 第52页 |
·稻瘟病接种及鉴定 | 第52-53页 |
·转基因材料接后抗感材料的PCR鉴定 | 第53页 |
·转基因材料的田间抗性鉴定 | 第53页 |
·转基因材料的对稻瘟病菌的抗谱测定 | 第53-54页 |
·稻瘟病粗毒素的对转基因材料筛选 | 第54页 |
·转基因水稻与亲本的稻米理化特性和氨基酸含量的测定 | 第54页 |
·转基因材料的农艺性状调查 | 第54-55页 |
第三章 结果与分析 | 第55-72页 |
1 转基因外植体的选择 | 第55-56页 |
·不同外植体的愈伤诱导率 | 第55页 |
·潮霉素筛选压临界浓度的确定 | 第55-56页 |
·继代时间影响转化效率 | 第56页 |
2 水稻愈伤农杆菌转化和植株再生 | 第56-59页 |
·水稻愈伤农杆菌转化 | 第56-58页 |
·农杆菌的转化和筛选 | 第56页 |
·PSK-α在抗性愈伤筛选中的作用 | 第56-58页 |
·植株的获得 | 第58-59页 |
3 转基因植株的鉴定 | 第59-63页 |
·PCR鉴定 | 第59页 |
·Southern Blot检测 | 第59-60页 |
·RT-PCR分析 | 第60-61页 |
·GUS组织染色 | 第61页 |
·转基因植株潮霉素抗性及遗传 | 第61-63页 |
·转基因植株T_1代潮霉素抗性分离比测定 | 第62页 |
·转基因植株T_2代潮霉素抗性分离比测定 | 第62-63页 |
4 转基因植株后代抗病性测定 | 第63-69页 |
·T_1代植株的稻瘟病抗性 | 第63-64页 |
·T_2代植株的稻瘟病抗性 | 第64-65页 |
·转基因植株的田间抗性测定 | 第65-66页 |
·转基因材料的抗谱测定 | 第66-69页 |
·转基因植株的稻瘟病初毒素筛选 | 第69页 |
5 转基因水稻农艺性状考察 | 第69-71页 |
6 转基因水稻的米质测定 | 第71-72页 |
第四章 讨论 | 第72-77页 |
1 农杆菌介导水稻转化体系的完善 | 第72页 |
2 基因工程改良水稻稻瘟病抗性 | 第72-73页 |
3 Pi-d2在转基因植株中的遗传学行为 | 第73-74页 |
·启动子对外源基因表达活性的影响 | 第73页 |
·Pi-d2在转基因植株中的遗传行为 | 第73-74页 |
4 Pi-d2在转基因植株表型变异 | 第74页 |
5 转Pi-d2基因植株的稻瘟病抗性 | 第74-75页 |
6 转基因植株在育种中的运用 | 第75页 |
7 Pi-d2基因在基因工程中的应用前景 | 第75页 |
8 转基因的安全性 | 第75-77页 |
·转基因植物中35S启动子的生物安全性 | 第75-76页 |
·抗生素抗性标记基因的生物安全性 | 第76页 |
·目的基因的生物安全性 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-85页 |
第二部分 一份条斑和颖花异常水稻突变体研究 | 第85-124页 |
第一章 文献综述 | 第85-101页 |
1 植物叶色突变体 | 第85-93页 |
·突变体的来源 | 第85-86页 |
·物理和化学诱变 | 第85-86页 |
·插入诱变 | 第86页 |
·植物叶色突变 | 第86-89页 |
·叶色突变体的类型 | 第86-87页 |
·叶绿素缺失的生理生化 | 第87-89页 |
·叶绿素突变体的突变机制 | 第89-92页 |
·叶绿体基因组控制的叶绿素突变 | 第89-90页 |
·核基因控制的叶绿体突变 | 第90-91页 |
·线粒体基因直接影响的叶绿体突变 | 第91-92页 |
·水稻叶色突变体的研究 | 第92-93页 |
2 水稻花发育研究进展 | 第93-100页 |
·双子叶植物的ABC模型及其发展模式 | 第93-96页 |
·ABC模型的提出 | 第93-94页 |
·ABCD模型的提出 | 第94页 |
·ABCE和ABCDE模型 | 第94-96页 |
·水稻花序和花器官的发育 | 第96-100页 |
·水稻花序形成的分子生物学 | 第96-97页 |
·水稻花器官发育 | 第97-100页 |
3 本文研究的目的与意义 | 第100-101页 |
第二章 材料与方法 | 第101-104页 |
1 实验材料 | 第101页 |
2 实验方法 | 第101-104页 |
·突变体形态鉴定和解剖结构观察 | 第101页 |
·叶绿素含量以及光合速率的测定 | 第101页 |
·花粉育性观察 | 第101页 |
·遗传分析 | 第101页 |
·突变体叶片酶含量的测定 | 第101页 |
·叶片中丙二醛和可溶性糖的测定 | 第101-102页 |
·石蜡切片 | 第102页 |
·农艺性状调查 | 第102页 |
·米质测定 | 第102页 |
·叶绿体差异片段的筛选 | 第102-104页 |
·叶绿体DNA的提取 | 第102-103页 |
·RAPD分析 | 第103-104页 |
第三章 结果与分析 | 第104-114页 |
1 形态观察 | 第104页 |
2 电子显微镜下比较野生型和突变体叶片细胞结构 | 第104-105页 |
3 突变体颖花的早期发育 | 第105-106页 |
4 突变体叶和颖花的组织学分析 | 第106-108页 |
5 开花前后叶绿素和光合速率的变化 | 第108-109页 |
6 花药育性分析 | 第109页 |
7 突变体遗传分析 | 第109-110页 |
8 酶活力测定 | 第110-111页 |
·超氧化物岐化酶(SOD)的活性变化 | 第110页 |
·过氧化物酶(POD)活性变化 | 第110页 |
·过氧化氢酶(CAT)的活性变化 | 第110-111页 |
9 丙二醛(MAD)的含量 | 第111页 |
10 可溶性糖(Soluble Sugar,SS)的含量 | 第111-112页 |
11 农艺性状调查 | 第112页 |
12 米质测定 | 第112-113页 |
13 片段筛选 | 第113-114页 |
第四章 讨论 | 第114-124页 |
1 质体发育受阻的阶段和原因 | 第114-115页 |
2 突变体叶片弯曲生长机制 | 第115页 |
3 突变基因影响花器官发育 | 第115页 |
4 突变影响植株的生理生化 | 第115-116页 |
5 水稻细胞质突变体 | 第116-124页 |
参考文献 | 第124-129页 |
致谢 | 第129-130页 |
在读期间发表和整理的论文情况 | 第130页 |