| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-19页 |
| 1 植物转基因技术 | 第10页 |
| 2 转基因技术 | 第10-11页 |
| ·基因工程在油菜中的应用 | 第10页 |
| ·油菜转基因存在的问题 | 第10-11页 |
| 3 农杆菌介导floral-dip转基因技术 | 第11-12页 |
| ·农杆菌介导floral-dip法的提出及发展 | 第11页 |
| ·农杆菌介导floral-dip法的优点 | 第11-12页 |
| 4 转基因后代的遗传、表达与沉默 | 第12-15页 |
| ·转基因后代的遗传 | 第12-14页 |
| ·转基因后代的表达 | 第14-15页 |
| ·转基因的沉默 | 第15页 |
| 5 基因后代的检测 | 第15-18页 |
| ·选择标记基因与报告基因检测 | 第15-16页 |
| ·PCR检测 | 第16-17页 |
| ·Southern杂交与电子杂交 | 第17-18页 |
| 6 拟南芥CRY1基因的结构及功能 | 第18页 |
| ·拟南芥CRY1基因的结构 | 第18页 |
| ·拟南芥CRY1基因的功能 | 第18页 |
| 7 本研究的目的与意义 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的 | 第18-19页 |
| ·本研究的意义 | 第19页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第19-28页 |
| 1 材料 | 第19-21页 |
| ·油菜材料 | 第19页 |
| ·菌株及目的基因 | 第19页 |
| ·主要生化试剂 | 第19-20页 |
| ·培养基配方 | 第20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20-21页 |
| 2 方法 | 第21-28页 |
| ·转基因甘蓝型油菜T_2代的Km抗性鉴定 | 第21页 |
| ·Km最佳致死浓度的确定 | 第21页 |
| ·甘蓝型油菜T_2代Km抗性鉴定 | 第21页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第21-24页 |
| ·油菜总DNA的提取及DNA纯度检测与浓度估算 | 第21-22页 |
| ·引物设计与合成 | 第22-23页 |
| ·PCR反应体系及条件的优化 | 第23页 |
| ·转基因植株的PCR检测及琼脂糖电泳 | 第23-24页 |
| ·目的片段的回收、克隆测序和序列比对 | 第24-26页 |
| ·大肠杆菌(DH_(5A))感受态细胞的制备 | 第24页 |
| ·目的片段的纯化回收及连接 | 第24-25页 |
| ·转化 | 第25页 |
| ·克隆测序与序列比对 | 第25-26页 |
| ·GUS报告基因的组织化学活性检测 | 第26页 |
| ·转化植株的花色素苷提取 | 第26页 |
| ·转基因油菜品质变异检测 | 第26页 |
| ·Km抗性筛选方法的比较 | 第26-28页 |
| ·叶片涂抹法 | 第26-27页 |
| ·Km最佳致死浓度的确定 | 第26-27页 |
| ·抗Km植株的筛选 | 第27页 |
| ·种子浸泡法 | 第27页 |
| ·Km最佳致死浓度的确定 | 第27页 |
| ·抗Km植株的筛选 | 第27页 |
| ·MS培养基筛选法 | 第27-28页 |
| ·Km最佳致死浓度的确定 | 第27页 |
| ·抗Km植株的筛选 | 第27-28页 |
| ·抗性植株的PCR检测 | 第28页 |
| 第三部分 结果分析 | 第28-37页 |
| 1 Km最佳致死浓度的确定 | 第28页 |
| 2 转基因T_2代Km抗性分离结果 | 第28-29页 |
| 3 转基因植株的PCR检测及序列比对 | 第29-32页 |
| ·引物设计与合成结果 | 第30页 |
| ·PCR反应体系及条件优化 | 第30-31页 |
| ·目的条带回收、克隆测序及序列比对 | 第31-32页 |
| 4 GUS组织化学检测 | 第32-33页 |
| 5 花色素苷积累量的比较 | 第33-34页 |
| 6 转基因油菜T_3代与非转基因品质比较 | 第34页 |
| 7 Km筛选方法的比较 | 第34-37页 |
| ·叶片涂抹法 | 第34-35页 |
| ·Km最佳致死浓度的确定 | 第34-35页 |
| ·雅黄T_0代种子的Km筛选结果 | 第35页 |
| ·种子浸泡法 | 第35页 |
| ·Km最佳致死浓度的确定 | 第35页 |
| ·雅黄T_0代种子的Km筛选结果 | 第35页 |
| ·MS培养基筛选法 | 第35-37页 |
| ·Km最佳致死浓度的确定 | 第36页 |
| ·雅黄T_0代种子的Km筛选结果 | 第36-37页 |
| 第四部分 讨论 | 第37-41页 |
| 1 拟南芥CRY1基因导入甘蓝型油菜后的遗传方式及表达 | 第37-38页 |
| ·拟南芥CRY1基因导入甘蓝型油菜的遗传方式 | 第37-38页 |
| ·拟南芥CRY1导入甘蓝型油菜的表达 | 第38页 |
| 2 转基因油菜的分子检测 | 第38-39页 |
| 3 转基因油菜T_3代与非转基因油菜品质的比较 | 第39页 |
| 4 Km抗性筛选方法的比较 | 第39-41页 |
| ·叶片涂抹法 | 第39-40页 |
| ·种子浸泡法 | 第40页 |
| ·MS培养基法 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 研究生期间发表的文章 | 第48页 |