中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略词 | 第11-12页 |
第一部分 文献综述 | 第12-23页 |
1. 人乳头瘤病毒概述 | 第12-13页 |
2. 人乳头瘤病毒的致癌机制 | 第13-14页 |
·E6 与 E7 基因的调控表达 | 第13页 |
·HPV 致癌机制研究 | 第13-14页 |
3. HPV 与头颈部鳞癌的研究进展 | 第14-16页 |
4. HPV 与宫颈癌的研究进展 | 第16-17页 |
5. HPV 与食管癌的研究进展 | 第17-20页 |
6. HPV 整合与 HPV 疫苗的研究 | 第20-21页 |
7. 结语 | 第21-23页 |
第二部分 材料与方法 | 第23-40页 |
1 实验材料 | 第23页 |
·标本来源 | 第23页 |
·细菌菌株和所用质粒 | 第23页 |
2. 实验仪器与方法 | 第23-40页 |
·实验仪器 | 第23-24页 |
·实验药品 | 第24-25页 |
·溶液的配制 | 第25-27页 |
·DNA 裂解液的配制(母液 1 M Tris-HCl,pH 8.0) | 第25页 |
·DNA 裂解液的配制(母液 0.5 M EDTA·2Na,pH 8.0) | 第25页 |
·50×TAE 的配制 | 第25页 |
·LB 液体培养基的配制 | 第25-26页 |
·LB 固体培养基 | 第26页 |
·SDS-PAGE 配制所需试剂 | 第26页 |
·SDS-PAGE 凝胶电泳 12%分离胶所用溶液(8mL 量) | 第26页 |
·SDS-PAGE 凝胶电泳 5%积层胶所用溶液(3 mL 量) | 第26页 |
·5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液(1 L 量) | 第26页 |
·3×SDS 凝胶加样缓冲液 | 第26-27页 |
·考马斯亮蓝染色液(100 mL 量) | 第27页 |
·蛋白电泳脱色液(100 mL 量) | 第27页 |
·实验方法 | 第27-38页 |
·食管癌石蜡包埋组织标本中 DNA 的提取 | 第27-28页 |
·HPV L1 区通用引物 GP5+/6+ PCR 扩增系统 | 第28-29页 |
·HPV 型特异性引物 PCR 扩增系统 | 第29-30页 |
·HPV 型特异型产物的鉴定 | 第30-32页 |
·HPV-18 E6 表达载体的构建和鉴定 | 第32-34页 |
·HPV-18 E6 蛋白在 293T 细胞中的诱导表达和鉴定 | 第34-38页 |
·统计学分析处理 | 第38页 |
·HPV 与食管癌相关性的研究的 HPV 检测的实验流程 | 第38-40页 |
第三部分 结果与分析 | 第40-53页 |
Ⅰ HPV 与食管癌相关性的研究 | 第40-48页 |
1 DNA 的提取 | 第40-41页 |
2 HPV L1 区通用引物 GP5+/6+ PCR 扩增系统 | 第41-42页 |
3 HPV 型特异性引物 PCR 扩增系统 | 第42-44页 |
4 HPV 型特异性产物的鉴定 | 第44-46页 |
·HPV 分型鉴定 | 第44页 |
·HPV16 型基因突变位点分析 | 第44-46页 |
5 统计学处理分析 | 第46-48页 |
Ⅱ pcDNA3.1-E6 表达载体的构建与鉴定的结果与分析 | 第48-53页 |
1 HPV-1 8 E6 基因的扩增 | 第48-49页 |
2 pcDNA3.1-E6 表达载体双酶切 | 第49-50页 |
3 E6 基因的表达 | 第50-52页 |
4 反转录 PCR 的鉴定 | 第52-53页 |
第四部分 讨论与结论 | 第53-55页 |
1 讨论 | 第53-54页 |
2 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
攻读硕士期间发表文章 | 第60-62页 |
致谢 | 第62页 |