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中国主要食管癌高发区河南省食管鳞癌发生与HPV感染关系的相关性研究

中文摘要第1-9页
Abstract第9-11页
缩略词第11-12页
第一部分 文献综述第12-23页
 1. 人乳头瘤病毒概述第12-13页
 2. 人乳头瘤病毒的致癌机制第13-14页
   ·E6 与 E7 基因的调控表达第13页
   ·HPV 致癌机制研究第13-14页
 3. HPV 与头颈部鳞癌的研究进展第14-16页
 4. HPV 与宫颈癌的研究进展第16-17页
 5. HPV 与食管癌的研究进展第17-20页
 6. HPV 整合与 HPV 疫苗的研究第20-21页
 7. 结语第21-23页
第二部分 材料与方法第23-40页
 1 实验材料第23页
   ·标本来源第23页
   ·细菌菌株和所用质粒第23页
 2. 实验仪器与方法第23-40页
   ·实验仪器第23-24页
   ·实验药品第24-25页
   ·溶液的配制第25-27页
     ·DNA 裂解液的配制(母液 1 M Tris-HCl,pH 8.0)第25页
     ·DNA 裂解液的配制(母液 0.5 M EDTA·2Na,pH 8.0)第25页
     ·50×TAE 的配制第25页
     ·LB 液体培养基的配制第25-26页
     ·LB 固体培养基第26页
     ·SDS-PAGE 配制所需试剂第26页
     ·SDS-PAGE 凝胶电泳 12%分离胶所用溶液(8mL 量)第26页
     ·SDS-PAGE 凝胶电泳 5%积层胶所用溶液(3 mL 量)第26页
     ·5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液(1 L 量)第26页
     ·3×SDS 凝胶加样缓冲液第26-27页
     ·考马斯亮蓝染色液(100 mL 量)第27页
     ·蛋白电泳脱色液(100 mL 量)第27页
     ·实验方法第27-38页
     ·食管癌石蜡包埋组织标本中 DNA 的提取第27-28页
     ·HPV L1 区通用引物 GP5+/6+ PCR 扩增系统第28-29页
     ·HPV 型特异性引物 PCR 扩增系统第29-30页
     ·HPV 型特异型产物的鉴定第30-32页
     ·HPV-18 E6 表达载体的构建和鉴定第32-34页
     ·HPV-18 E6 蛋白在 293T 细胞中的诱导表达和鉴定第34-38页
     ·统计学分析处理第38页
   ·HPV 与食管癌相关性的研究的 HPV 检测的实验流程第38-40页
第三部分 结果与分析第40-53页
 Ⅰ HPV 与食管癌相关性的研究第40-48页
  1 DNA 的提取第40-41页
  2 HPV L1 区通用引物 GP5+/6+ PCR 扩增系统第41-42页
  3 HPV 型特异性引物 PCR 扩增系统第42-44页
  4 HPV 型特异性产物的鉴定第44-46页
   ·HPV 分型鉴定第44页
   ·HPV16 型基因突变位点分析第44-46页
  5 统计学处理分析第46-48页
 Ⅱ pcDNA3.1-E6 表达载体的构建与鉴定的结果与分析第48-53页
  1 HPV-1 8 E6 基因的扩增第48-49页
  2 pcDNA3.1-E6 表达载体双酶切第49-50页
  3 E6 基因的表达第50-52页
  4 反转录 PCR 的鉴定第52-53页
第四部分 讨论与结论第53-55页
 1 讨论第53-54页
 2 结论第54-55页
参考文献第55-60页
攻读硕士期间发表文章第60-62页
致谢第62页

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