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高山离子芥MAP激酶基因CbMAPK3的克隆及功能分析

致谢第1-7页
缩写词表第7-9页
摘要第9-12页
Abstract第12-16页
第一章 前言第16-34页
 植物MAPKs级联途径成分第17-20页
 MPAKs级联在植物逆境反应中的作用第20-23页
 MAPKs与病原体响应第23-26页
 MAPKs与植物激素信号调节第26-29页
 MAPKs级联在决定细胞周期和发育中的作用第29-30页
 未来的研究方向第30-31页
 本论文的研究意义第31-34页
第二章 高山离子芥MAP激酶基因CbMAPK3的克隆第34-55页
 1.实验材料第34页
 2.实验方法第34-36页
   ·高山离子芥总RNA的提取及反转录第34页
   ·MAP激酶基因CbMAPK3片段的克隆(530bp)第34-35页
   ·MAP激酶基因CbMAPK3片段的克隆(1030bp)第35页
   ·RACE第35页
   ·高山离子芥MAP激酶基因CbMAPK3全长基因的扩增第35页
   ·分子生物学软件分析第35-36页
 3.实验结果与讨论第36-54页
   ·高山离子芥愈伤组织总RNA的提取第36页
   ·MAP激酶基因CbMAPK3的克隆(530bp)第36-37页
   ·MAP激酶基因CbMAPK3的克隆(1030bp)第37-38页
   ·3`RACE第38-39页
   ·5`RACE第39-40页
   ·全长高山离子芥MAP激酶基因CbMAPK3的克隆第40-41页
   ·登录Genbank的结果第41-44页
   ·构建植物MAP激酶基因序列的系统发生树第44页
   ·CbMAPK3与部分植物MAP激酶基因氨基酸序列比对第44-47页
   ·等电点及分子量计算第47-48页
   ·二级结构预测第48-52页
   ·CbMAPK3蛋白中磷酸化位点的预测第52-54页
 4.小结第54-55页
第三章 高山离子芥CbMAPK3激酶在抗逆境胁迫中的功能研究第55-68页
 1 材料与方法第55-58页
   ·逆境胁迫下CbMAPK3基因在转录水平的变化第55-56页
   ·CbMAPK3基因组织特异性表达检测第56页
   ·逆境胁迫下CbMAPK3基因在蛋白水平的变化第56-57页
   ·CbMAPK3基因功能互补分析第57-58页
 2.实验结果第58-65页
   ·逆境胁迫下CbMAPK3基因在转录水平的变化第58-59页
   ·CbMAPK3基因组织特异性表达检测第59-60页
   ·逆境胁迫下CbMAPK3基因在蛋白水平的变化第60-62页
   ·CbMAPK3基因功能互补分析第62-65页
 3.讨论第65-68页
第四章 高山离子芥CbMAPK3基因在E.coli BL21中的表达第68-75页
 1.实验方法第68-69页
   ·目的基因的扩增第68页
   ·目的基因与表达载体pET30a的连接第68页
   ·大肠杆菌JM109感受态细胞的制备第68页
   ·连接产物的转化第68页
   ·碱裂解法小量提取质粒第68页
   ·重组质粒的鉴定第68页
   ·重组表达质粒的诱导表达第68-69页
   ·表达产物的SDS—PAGE电泳检测第69页
   ·表达产物的Western blotting分析第69页
 2.实验结果与讨论第69-73页
   ·重组表达载体的构建第69-71页
   ·重组表达质粒的电泳鉴定第71页
   ·重组表达质粒酶切及PCR鉴定第71-72页
   ·表达产物检测第72-73页
 3.讨论第73-75页
参考文献第75-89页
博士期间发表的文章第89页

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