致谢 | 第1-7页 |
缩写词表 | 第7-9页 |
摘要 | 第9-12页 |
Abstract | 第12-16页 |
第一章 前言 | 第16-34页 |
植物MAPKs级联途径成分 | 第17-20页 |
MPAKs级联在植物逆境反应中的作用 | 第20-23页 |
MAPKs与病原体响应 | 第23-26页 |
MAPKs与植物激素信号调节 | 第26-29页 |
MAPKs级联在决定细胞周期和发育中的作用 | 第29-30页 |
未来的研究方向 | 第30-31页 |
本论文的研究意义 | 第31-34页 |
第二章 高山离子芥MAP激酶基因CbMAPK3的克隆 | 第34-55页 |
1.实验材料 | 第34页 |
2.实验方法 | 第34-36页 |
·高山离子芥总RNA的提取及反转录 | 第34页 |
·MAP激酶基因CbMAPK3片段的克隆(530bp) | 第34-35页 |
·MAP激酶基因CbMAPK3片段的克隆(1030bp) | 第35页 |
·RACE | 第35页 |
·高山离子芥MAP激酶基因CbMAPK3全长基因的扩增 | 第35页 |
·分子生物学软件分析 | 第35-36页 |
3.实验结果与讨论 | 第36-54页 |
·高山离子芥愈伤组织总RNA的提取 | 第36页 |
·MAP激酶基因CbMAPK3的克隆(530bp) | 第36-37页 |
·MAP激酶基因CbMAPK3的克隆(1030bp) | 第37-38页 |
·3`RACE | 第38-39页 |
·5`RACE | 第39-40页 |
·全长高山离子芥MAP激酶基因CbMAPK3的克隆 | 第40-41页 |
·登录Genbank的结果 | 第41-44页 |
·构建植物MAP激酶基因序列的系统发生树 | 第44页 |
·CbMAPK3与部分植物MAP激酶基因氨基酸序列比对 | 第44-47页 |
·等电点及分子量计算 | 第47-48页 |
·二级结构预测 | 第48-52页 |
·CbMAPK3蛋白中磷酸化位点的预测 | 第52-54页 |
4.小结 | 第54-55页 |
第三章 高山离子芥CbMAPK3激酶在抗逆境胁迫中的功能研究 | 第55-68页 |
1 材料与方法 | 第55-58页 |
·逆境胁迫下CbMAPK3基因在转录水平的变化 | 第55-56页 |
·CbMAPK3基因组织特异性表达检测 | 第56页 |
·逆境胁迫下CbMAPK3基因在蛋白水平的变化 | 第56-57页 |
·CbMAPK3基因功能互补分析 | 第57-58页 |
2.实验结果 | 第58-65页 |
·逆境胁迫下CbMAPK3基因在转录水平的变化 | 第58-59页 |
·CbMAPK3基因组织特异性表达检测 | 第59-60页 |
·逆境胁迫下CbMAPK3基因在蛋白水平的变化 | 第60-62页 |
·CbMAPK3基因功能互补分析 | 第62-65页 |
3.讨论 | 第65-68页 |
第四章 高山离子芥CbMAPK3基因在E.coli BL21中的表达 | 第68-75页 |
1.实验方法 | 第68-69页 |
·目的基因的扩增 | 第68页 |
·目的基因与表达载体pET30a的连接 | 第68页 |
·大肠杆菌JM109感受态细胞的制备 | 第68页 |
·连接产物的转化 | 第68页 |
·碱裂解法小量提取质粒 | 第68页 |
·重组质粒的鉴定 | 第68页 |
·重组表达质粒的诱导表达 | 第68-69页 |
·表达产物的SDS—PAGE电泳检测 | 第69页 |
·表达产物的Western blotting分析 | 第69页 |
2.实验结果与讨论 | 第69-73页 |
·重组表达载体的构建 | 第69-71页 |
·重组表达质粒的电泳鉴定 | 第71页 |
·重组表达质粒酶切及PCR鉴定 | 第71-72页 |
·表达产物检测 | 第72-73页 |
3.讨论 | 第73-75页 |
参考文献 | 第75-89页 |
博士期间发表的文章 | 第89页 |