| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-20页 |
| ·野油菜黄单胞菌野油菜致病变种(Xcc)概述 | 第9页 |
| ·野油菜黄单胞菌简介 | 第9页 |
| ·Xcc基因组的分析 | 第9页 |
| ·胞外多糖(EPS)研究进展 | 第9-15页 |
| ·胞外多糖的结构 | 第10页 |
| ·胞外多糖的理化性能 | 第10-11页 |
| ·胞外多糖与致病性 | 第11页 |
| ·胞外多糖的应用 | 第11-12页 |
| ·胞外多糖生物合成机理 | 第12-15页 |
| ·细菌中ED途径相关基因的研究进展 | 第15-19页 |
| ·大肠杆菌中ED途径研究 | 第16-18页 |
| ·其它菌株中ED途径研究 | 第18页 |
| ·黄单胞菌中ED途径研究 | 第18-19页 |
| ·本工作的目的及意义 | 第19-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-35页 |
| ·材料 | 第20-25页 |
| ·菌株和质粒 | 第20-21页 |
| ·细菌培养基 | 第21-22页 |
| ·菌株培养条件及保存 | 第22页 |
| ·抗生素及其贮存、使用浓度 | 第22-23页 |
| ·溶液与缓冲液 | 第23-25页 |
| ·方法 | 第25-35页 |
| ·生物信息学分析方法 | 第25页 |
| ·常规PCR反应 | 第25-27页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第27页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第27-28页 |
| ·质粒的提取 | 第28页 |
| ·总DNA的提取 | 第28页 |
| ·限制性内切酶酶切 | 第28页 |
| ·DNA连接 | 第28-29页 |
| ·电脉冲感受态细胞的制备 | 第29页 |
| ·转化 | 第29页 |
| ·三亲本接合 | 第29-30页 |
| ·Xcc 8004基因组上目标基因的整合突变体的构建 | 第30页 |
| ·胞外多糖的检测 | 第30-31页 |
| ·植株的致病性试验 | 第31页 |
| ·GUS(β-葡糖苷酸酶)活性检测 | 第31-32页 |
| ·粗酶液的提取及蛋白含量测定 | 第32页 |
| ·KDPG醛缩酶,6-磷酸葡萄糖酸脱水酶活性检测 | 第32页 |
| ·葡萄糖激酶活性检测 | 第32-33页 |
| ·葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性检测 | 第33-35页 |
| 第三章 结果与分析 | 第35-55页 |
| ·XC1973-XC1977的生物信息学分析 | 第35-38页 |
| ·XC1973-XC1977基因的基本特征 | 第35-36页 |
| ·XC1973～XC1977的生物信息学分析 | 第36-38页 |
| ·XC1973-XC1977的突变 | 第38-42页 |
| ·XC1073-XC1977内部片段的PCR扩增 | 第38-39页 |
| ·将内部片段克隆剑载体pK18mob上 | 第39-42页 |
| ·突变体的筛选及验证 | 第42页 |
| ·XC1973、XC1974、XC1976和XC1977突变体的功能互补 | 第42-46页 |
| ·XC1973、XC1974、XC1976和XC1977全基因的扩增 | 第42-44页 |
| ·将XC1973、XC1974、XC1976和XC1977全基因克隆到载体pLAFR3上 | 第44页 |
| ·三亲本接合子的获得 | 第44-46页 |
| ·突变体表型分析 | 第46-55页 |
| ·突变体的生长特性 | 第46-48页 |
| ·突变体的酶活性检测 | 第48-49页 |
| ·突变体的EPS产量分析 | 第49-53页 |
| ·突变体的致病性实验 | 第53-54页 |
| ·ED途径相关基因与gum基因的关系 | 第54-55页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第55-58页 |
| ·Xcc ED途径相关基因突变体分析 | 第55-57页 |
| ·Xcc ED途径可能参与的EPS生物合成途径 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 附录 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第65页 |
