| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 1 前言 | 第13-37页 |
| ·转基因植物疫苗的研究进展 | 第13-27页 |
| ·转基因植物疫苗的可行性 | 第13-14页 |
| ·转基因植物疫苗的发展现状 | 第14-23页 |
| ·植物口服疫苗存在的问题和研究策略 | 第23-27页 |
| ·大肠杆菌热敏性肠毒素研究进展 | 第27-34页 |
| ·LT 特性与分类 | 第27-28页 |
| ·LT 分子生物学功能 | 第28-29页 |
| ·LT 免疫原性研究 | 第29-31页 |
| ·LT 的佐剂作用 | 第31-33页 |
| ·LT 免疫原性应用 | 第33页 |
| ·LT 佐剂作用的应用 | 第33-34页 |
| ·本研究的目的意义、内容和技术路线 | 第34-37页 |
| ·本项目研究的目的意义 | 第34-35页 |
| ·本项目研究的主要内容 | 第35-36页 |
| ·本项目研究的技术路线 | 第36-37页 |
| 2 实验材料和方法 | 第37-94页 |
| ·实验材料 | 第37-39页 |
| ·植物材料 | 第37页 |
| ·实验动物 | 第37页 |
| ·菌株和质粒 | 第37-38页 |
| ·工具酶及化学试剂 | 第38页 |
| ·主要仪器设备 | 第38-39页 |
| ·实验方法 | 第39-94页 |
| ·多价保护性抗原基因的克隆 | 第39-67页 |
| ·杂花苜蓿转基因再生体系的建立及遗传转化 | 第67-83页 |
| ·类全毒素 LT 植物表达载体的构建 | 第83-94页 |
| 3 结果与分析 | 第94-160页 |
| ·多价保护性抗原基因的克隆 | 第94-115页 |
| ·融合基因 STI-STII 的克隆和序列分析 | 第94-95页 |
| ·K88ac-STII 嵌合基因 | 第95-98页 |
| ·K88ac-STII 原核表达 | 第98-101页 |
| ·融合蛋白的免疫原性测定 | 第101-103页 |
| ·免疫各组小鼠抗体水平的检测 | 第103-106页 |
| ·攻毒实验 | 第106-107页 |
| ·轮状病毒多表位基因的重组 | 第107-112页 |
| ·重组轮状病毒多表位基因（RE）的原核表达及免疫原性检测. | 第112页 |
| ·植物表达载体的构建及重组子的鉴定 | 第112-113页 |
| ·部分转基因烟草的 ELISA 快速检测及表达效率的测定 | 第113-115页 |
| ·杂花苜蓿转基因再生体系的建立及遗传转化 | 第115-139页 |
| ·杂花苜蓿再生体系的建立 | 第115-119页 |
| ·农杆菌侵染条件优化 | 第119-122页 |
| ·杂花苜蓿对农杆菌的敏感性试验 | 第122-124页 |
| ·抗氧化剂抑制农杆菌浸染外植体褐化的研究 | 第124-126页 |
| ·农杆菌介导的杂花苜蓿的遗传转化 | 第126-139页 |
| ·类全毒素 LT 植物表达载体的构建 | 第139-160页 |
| ·LTA、LTB 基因的克隆 | 第139-143页 |
| ·LTA、LTB 基因的原核表达 | 第143-144页 |
| ·LTA-LTB/pCAMBIA2300 双价植物表达载体的构建 | 第144-145页 |
| ·pBLG-UP 植物表达载体的构建 | 第145-151页 |
| ·农杆菌 EH105 介导法转化烟草结果 | 第151-152页 |
| ·LTA/LTB 全毒素装配定性检测结果 | 第152-153页 |
| ·PR1a-STI-STII-LATA2/UP-LTB 植物表达载体的构建结果 | 第153-156页 |
| ·PR1a-k88-STII-LATA2/UP-LTB 植物表达载体的构建 | 第156-160页 |
| 4. 讨论 | 第160-177页 |
| ·杂花苜蓿转基因再生 | 第160-163页 |
| ·植物生长调节剂在杂花苜蓿胚胎发生中作用 | 第160页 |
| ·不同苗龄的杂花苜蓿下胚轴对胚性愈伤形成的影响 | 第160-161页 |
| ·不同培养基成分对杂花苜蓿胚胎发生的影响 | 第161页 |
| ·不同碳源对杂花苜蓿胚胎发生的影响 | 第161-162页 |
| ·苜蓿转基因过程中的褐化问题 | 第162-163页 |
| ·进一步研究设想 | 第163页 |
| ·K88AC菌毛蛋白表面呈现半抗原热稳定肠毒素 STⅡ | 第163-169页 |
| ·K88ac 插入位点的选择 | 第163-164页 |
| ·STII 抗原片段的选择 | 第164-167页 |
| ·K88ac 呈现STII 抗原片段免疫效果 | 第167-169页 |
| ·提高外源基因的表达策略 | 第169-173页 |
| ·MAR 序列影响转基因表达的机制 | 第169-171页 |
| ·提高植物表达重组蛋白的方法 | 第171-173页 |
| ·LT 作为植物疫苗的载体 | 第173-177页 |
| ·ST 与LTB 融合基因表达效果 | 第173-174页 |
| ·LT 作为植物疫苗的载体优势 | 第174-175页 |
| ·类全毒素嵌合载体的构建 | 第175-177页 |
| 5. 主要的结论与创新点 | 第177-180页 |
| 6. 参考文献 | 第180-190页 |
| 附录 | 第190-192页 |
| 英文缩写词表 | 第192-194页 |
| 致谢 | 第194页 |
