| 1 引言 | 第1-16页 |
| ·病原学 | 第8-9页 |
| ·分子生物学特征 | 第9-13页 |
| ·基因组结构 | 第9-10页 |
| ·编码的蛋白 | 第10-13页 |
| ·BVDV生物型转化的分子机制 | 第13-15页 |
| ·外源细胞序列的插入 | 第13-14页 |
| ·病毒自身基因的拷贝和重排 | 第14页 |
| ·病毒基因重复复制和插入序列共同存在 | 第14页 |
| ·缺陷干扰粒子 | 第14页 |
| ·点突变 | 第14-15页 |
| ·研究的目的意义 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-26页 |
| ·材料 | 第16-19页 |
| ·标准毒及标准阳性血清 | 第16页 |
| ·MDBK细胞 | 第16页 |
| ·实验动物 | 第16页 |
| ·病料来源 | 第16页 |
| ·细胞培养所需主要试剂 | 第16页 |
| ·双抗体夹心ELISA所需的主要试剂 | 第16页 |
| ·RT-PCR所需的主要化学试剂 | 第16-17页 |
| ·RT-PCR所需的主要生物学试剂 | 第17页 |
| ·克隆所需主要试剂 | 第17页 |
| ·所需主要仪器 | 第17-18页 |
| ·分析软件 | 第18页 |
| ·主要溶液的配制 | 第18-19页 |
| ·病毒培养及细胞毒浓缩 | 第19-20页 |
| ·细胞培养 | 第19页 |
| ·病料的处理 | 第19-20页 |
| ·病毒的接种 | 第20页 |
| ·病毒的浓缩 | 第20页 |
| ·双抗体夹心ELISA检测BVDV抗原 | 第20-21页 |
| ·RT-PCR方法检测BVDV抗原 | 第21-22页 |
| ·引物的设计合成 | 第21页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第21页 |
| ·反转录合成cDNA | 第21页 |
| ·PCR扩增 | 第21-22页 |
| ·扩增产物的检测 | 第22页 |
| ·动物回归试验 | 第22页 |
| ·扩增片段的克隆及序列分析 | 第22-26页 |
| ·扩增产物的纯化 | 第22-23页 |
| ·重组质粒pMD18-T／NS2-3的构建 | 第23页 |
| ·重组子的筛选及质粒的提取 | 第23-24页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第24页 |
| ·克隆片段的测序及同源性分析 | 第24-26页 |
| 3 结果 | 第26-36页 |
| ·细胞培养及病毒增殖结果 | 第26-27页 |
| ·双抗体夹心ELISA检测结果 | 第27页 |
| ·RT-PCR检测结果 | 第27-28页 |
| ·动物回归试验结果 | 第28-31页 |
| ·试验犊牛症状及病理变化 | 第28-29页 |
| ·试验犊牛病料细胞培养结果 | 第29-30页 |
| ·试验犊牛病料细胞培养浓缩毒RT-PCR结果 | 第30-31页 |
| ·重组质粒pMD18-T／NS2-3的酶切鉴定及PCR鉴定 | 第31页 |
| ·扩增片段的序列测定及同源性分析结果 | 第31-36页 |
| ·核苷酸序列测定结果 | 第31-33页 |
| ·氨基酸序列测定结果 | 第33-34页 |
| ·系统发生分析 | 第34-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| ·病料的来源 | 第36页 |
| ·CP型BVDV的致病类型 | 第36页 |
| ·病毒的分离培养 | 第36-37页 |
| ·RT-PCR扩增NS2-3基因重要区 | 第37页 |
| ·引物的设计 | 第37页 |
| ·RNA的提取 | 第37页 |
| ·NS2-3基因重要区序列分析 | 第37-38页 |
| 5 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-44页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第44-45页 |
| 作者简历 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-60页 |