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植物广谱抗病基因克隆及载体构建的研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 引言第11-31页
   ·研究的目的和意义第11-12页
   ·植物抗病基因工程研究进展第12-20页
     ·植物抗病机理第12-15页
     ·植物抗病基因工程策略第15-17页
     ·植物广谱抗病基因策略和研究第17-20页
   ·广谱抗病基因NPR1 的研究进展第20-22页
   ·广谱抗病TGA2 转录因子的研究进展第22-23页
   ·园林植物育种的研究进展第23-29页
     ·园林植物传统育种的现状第23-24页
     ·园林植物基因工程育种研究进展第24-27页
     ·基因工程在园林植物育种应用中存在的问题第27-28页
     ·园林植物基因工程育种展望第28-29页
   ·PMX810 蛋白表达纯化载体简介第29-31页
2 材料与方法第31-44页
   ·实验材料第31-33页
     ·植物材料第31页
     ·菌种和质粒第31页
     ·分子生物学及生化试剂第31页
     ·寡聚核苷酸引物第31-32页
     ·培养基第32页
     ·常用的试剂第32-33页
   ·实验方法第33-44页
     ·植物材料拟南芥的获得第33页
     ·拟南芥NPR1 基因的克隆第33-38页
     ·拟南芥TGA2 转录因子基因的克隆第38-43页
     ·植物表达载体的构建与鉴定第43页
     ·蛋白表达载体的构建与鉴定第43-44页
3 结果分析第44-52页
   ·拟南芥抗病基因NPR1 的克隆及载体构建第44-47页
     ·拟南芥总RNA 的提取第44页
     ·RT-PCR 扩增NPR1 基因第44-45页
     ·拟南芥NPR1 基因的测序比对分析第45页
     ·植物表达载体p355T-NPR1 的酶切验证第45-46页
     ·蛋白表达载体PMX810-NPR1 的酶切验证第46-47页
   ·拟南芥TGA2 转录因子的克隆及载体构建第47-52页
     ·TRizol 法提取拟南芥总RNA第47-48页
     ·RT-PCR 扩增TGA2 转录因子第48-49页
     ·拟南芥TGA2 转录因子的测序结果分析第49-50页
     ·植物表达载体p355T-TGA2 的酶切验证第50-51页
     ·蛋白表达载体PMX810-TGA2 的酶切验证第51-52页
4 讨论第52-56页
   ·植物广谱抗病基因和园林植物抗病育种第52-53页
   ·实验过程中应该注意的问题第53-56页
     ·核糖核酸(RNA)提取中应注意的问题第53-54页
     ·引物设计第54页
     ·PCR 中应该注意的事项第54-55页
     ·载体构建第55页
     ·实验中意外的人为因素第55-56页
5 结论第56-57页
致谢第57-58页
参考文献第58-66页
附录第66-74页
攻读学位期间发表的学术论文第74页

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