植物广谱抗病基因克隆及载体构建的研究
| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-31页 |
| ·研究的目的和意义 | 第11-12页 |
| ·植物抗病基因工程研究进展 | 第12-20页 |
| ·植物抗病机理 | 第12-15页 |
| ·植物抗病基因工程策略 | 第15-17页 |
| ·植物广谱抗病基因策略和研究 | 第17-20页 |
| ·广谱抗病基因NPR1 的研究进展 | 第20-22页 |
| ·广谱抗病TGA2 转录因子的研究进展 | 第22-23页 |
| ·园林植物育种的研究进展 | 第23-29页 |
| ·园林植物传统育种的现状 | 第23-24页 |
| ·园林植物基因工程育种研究进展 | 第24-27页 |
| ·基因工程在园林植物育种应用中存在的问题 | 第27-28页 |
| ·园林植物基因工程育种展望 | 第28-29页 |
| ·PMX810 蛋白表达纯化载体简介 | 第29-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-44页 |
| ·实验材料 | 第31-33页 |
| ·植物材料 | 第31页 |
| ·菌种和质粒 | 第31页 |
| ·分子生物学及生化试剂 | 第31页 |
| ·寡聚核苷酸引物 | 第31-32页 |
| ·培养基 | 第32页 |
| ·常用的试剂 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-44页 |
| ·植物材料拟南芥的获得 | 第33页 |
| ·拟南芥NPR1 基因的克隆 | 第33-38页 |
| ·拟南芥TGA2 转录因子基因的克隆 | 第38-43页 |
| ·植物表达载体的构建与鉴定 | 第43页 |
| ·蛋白表达载体的构建与鉴定 | 第43-44页 |
| 3 结果分析 | 第44-52页 |
| ·拟南芥抗病基因NPR1 的克隆及载体构建 | 第44-47页 |
| ·拟南芥总RNA 的提取 | 第44页 |
| ·RT-PCR 扩增NPR1 基因 | 第44-45页 |
| ·拟南芥NPR1 基因的测序比对分析 | 第45页 |
| ·植物表达载体p355T-NPR1 的酶切验证 | 第45-46页 |
| ·蛋白表达载体PMX810-NPR1 的酶切验证 | 第46-47页 |
| ·拟南芥TGA2 转录因子的克隆及载体构建 | 第47-52页 |
| ·TRizol 法提取拟南芥总RNA | 第47-48页 |
| ·RT-PCR 扩增TGA2 转录因子 | 第48-49页 |
| ·拟南芥TGA2 转录因子的测序结果分析 | 第49-50页 |
| ·植物表达载体p355T-TGA2 的酶切验证 | 第50-51页 |
| ·蛋白表达载体PMX810-TGA2 的酶切验证 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-56页 |
| ·植物广谱抗病基因和园林植物抗病育种 | 第52-53页 |
| ·实验过程中应该注意的问题 | 第53-56页 |
| ·核糖核酸(RNA)提取中应注意的问题 | 第53-54页 |
| ·引物设计 | 第54页 |
| ·PCR 中应该注意的事项 | 第54-55页 |
| ·载体构建 | 第55页 |
| ·实验中意外的人为因素 | 第55-56页 |
| 5 结论 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 附录 | 第66-74页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第74页 |