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猪流行性腹泻病毒重组M蛋白的原核表达、纯化及鉴定

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-10页
1 引言第10-20页
   ·猪流行性腹泻病毒的生物学特性研究进展第10-19页
     ·病毒形态特征及理化特性第10-11页
     ·病毒培养特性第11页
     ·主要结构基因及其编码蛋白功能特性第11-15页
     ·与其它冠状病毒的抗原相关性第15-16页
     ·PED 诊断方法的研究进展第16-17页
     ·PED 诊断试剂的研究进展第17-19页
   ·本研究的目的及意义第19-20页
2 材料与方法第20-32页
   ·实验材料第20-23页
     ·菌种、质粒及抗体第20页
     ·引物第20-21页
     ·试剂第21-22页
     ·主要仪器设备第22-23页
   ·实验方法第23-32页
     ·表达载体pJLA605-M 的构建与鉴定第23-26页
     ·表达载体pGEX-6p-M’的构建与鉴定第26页
     ·表达载体pGEX-6p-M 和pGEX-6p-M-GST 的构建与鉴定第26页
     ·重组质粒的测序第26页
     ·目的基因在大肠杆菌中的表达第26-29页
     ·目的基因 M’表达产物的纯化第29-30页
     ·免疫学检测第30-32页
3 结果与分析第32-40页
   ·重组质粒的双酶切及 PCR 鉴定第32-33页
     ·表达载体pJLA605-M 构建的鉴定结果第32页
     ·表达载体pGEX-6p-M’构建的鉴定结果第32-33页
     ·表达载体pGEX-6p-M-GST 的构建的鉴定结果第33页
   ·测序结果第33页
   ·重组蛋白的表达结果第33-37页
     ·重组质粒pJLA605-M 表达的 SDS-PAGE 分析结果第33-34页
     ·重组质粒 pGEX-6p-M’在不同诱导条件下表达的 SDS-PAGE 分析结果第34-37页
     ·重组质粒 pGEX-6p-M-GST 表达的 SDS-PAGE 分析结果第37页
   ·目的基因 M’表达产物的纯化结果第37-38页
   ·免疫学检测结果第38-40页
     ·免疫印迹检测结果第38页
     ·ELISA 检测结果第38-40页
4 讨论第40-44页
   ·实现 PEDV M 蛋白的表达的实验设计第40-41页
   ·有关 M 蛋白的纯化方法及纯化效果分析第41-42页
   ·有关重组 M’蛋白免疫原性的鉴定及其作为诊断试剂的潜在应用价值第42-44页
5 结论第44-45页
致谢第45-46页
参考文献第46-51页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第51页

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