摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
前言 | 第10-20页 |
1.杆状病毒简介 | 第10-14页 |
·杆状病毒的分类和命名 | 第10页 |
·杆状病毒的复制周期 | 第10-11页 |
·杆状病毒侵入细胞的过程 | 第11-13页 |
·杆状病毒的膜融合蛋白 | 第13-14页 |
·膜融合蛋白在基因治疗中的应用 | 第14页 |
2.杆状病毒表面展示 | 第14-16页 |
·在病毒粒子表面上的展示 | 第14-15页 |
·在被感染昆虫细胞表面的展示 | 第15-16页 |
·在杆状病毒的衣壳上展示 | 第16页 |
·在杆状病毒膜融合蛋白C末端的展示 | 第16页 |
3.杆状病毒展示的应用前景 | 第16-18页 |
·抗原表位分析 | 第17页 |
·杆状病毒展示用于生产免疫原 | 第17页 |
·用于基因治疗 | 第17页 |
·其它用途 | 第17-18页 |
·应用展望 | 第18页 |
4.本实验的研究背景及目的 | 第18-20页 |
材料与方法 | 第20-28页 |
1.材料 | 第20-23页 |
·大肠杆菌菌株 | 第20页 |
·昆虫细胞系 | 第20页 |
·病毒和Bacmid | 第20-21页 |
·质粒 | 第21页 |
·引物 | 第21-22页 |
·培养基 | 第22页 |
·细菌培养基 | 第22页 |
·SOC培养基 | 第22页 |
·Grace培养基和含10%胎牛血清的Grace培养基 | 第22页 |
·酶,化学试剂和试剂盒 | 第22-23页 |
·酶和Marker | 第22页 |
·化学试剂 | 第22页 |
·试剂盒 | 第22-23页 |
·抗生素 | 第23页 |
2.方法 | 第23-28页 |
·大肠杆菌中质粒的提取方法 | 第23页 |
·大肠杆菌中Bacmid的提取法 | 第23-24页 |
·DNA限制性酶切片段和PCR产物的回收 | 第24页 |
·PCR(聚合酶链式反应) | 第24页 |
·电转化用感受细胞的制备 | 第24-25页 |
·普通电转化用感受态细胞的制备 | 第24-25页 |
·电转化 | 第25页 |
·重组病毒的构建 | 第25-26页 |
·转移载体的构建 | 第25-26页 |
·重组Bamid的构建 | 第26页 |
·重组病毒的获得及PCR鉴定 | 第26页 |
·SDS-PAGE和Western-Blot | 第26页 |
·免疫荧光染色 | 第26-27页 |
·终点稀释法测定病毒滴度 | 第27-28页 |
结果 | 第28-36页 |
1.对Ha133的结构分析 | 第28页 |
2.重组病毒的构建,鉴定和分析 | 第28-36页 |
·GST基因与Ha133中四个片段的克隆与测序 | 第28-30页 |
·转移载体的构建 | 第30页 |
·重组Bacmid的构建 | 第30-32页 |
·重组病毒的获得和PCR鉴定 | 第32页 |
·感染实验 | 第32-33页 |
·SDS-PAGE和Western-blot | 第33-34页 |
·GST-Ha133膜融合蛋白在被感染HzAM1细胞上的定位 | 第34-36页 |
讨论 | 第36-39页 |
参考文献 | 第39-45页 |
已发表和撰写的文章 | 第45-46页 |
致谢 | 第46-47页 |