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超级稻细胞凋亡机制的初步研究

摘要第1-5页
Abstract第5-12页
第一章 前言第12-32页
   ·植物细胞凋亡的分子生物学研究现状第12-28页
     ·植物细胞凋亡的类型和特征第12-16页
       ·植物细胞凋亡的类型第12-13页
       ·植物细胞凋亡的特征第13-16页
     ·植物细胞凋亡信号传导及其信号分子的研究进展第16-23页
       ·类caspase水解蛋白酶参与植物细胞程序性死亡的调控第16-17页
       ·线粒体、细胞色素C和BLPs在植物细胞程序性死亡中的作用第17-18页
       ·R基因、热激蛋白和凋亡体与植物细胞死亡第18-19页
       ·活性氧与植物细胞凋亡的信号传导第19-20页
       ·Ca~(2+)与植物细胞凋亡的信号传导第20-22页
       ·VK3与植物细胞凋亡的信号传导第22页
       ·过氧化物酶在植物细胞凋亡中的作用第22-23页
     ·植物细胞凋亡相关基因的研究进展第23-27页
       ·DAD1基因的研究进展第23-24页
       ·其它植物细胞凋亡相关基因第24-27页
     ·植物细胞凋亡相关蛋白质的研究进展第27-28页
   ·细胞凋亡的重要意义第28-31页
     ·细胞凋亡与疾病第29页
     ·细胞凋亡与免疫学的关系第29页
     ·细胞凋亡与临床医学的关系第29-30页
     ·细胞凋亡在农业中的应用第30-31页
   ·研究课题的来源、意义与目标第31-32页
第二章 外源化学信号分子诱导超级稻悬浮细胞凋亡机制的研究第32-41页
   ·材料与方法第32-34页
     ·试验仪器第32页
     ·试验材料第32页
     ·试验方法第32-34页
       ·超级稻愈伤组织的诱导第32页
       ·超级稻愈伤组织的增殖培养第32页
       ·超级稻悬浮细胞的培养第32页
       ·超级稻悬浮细胞的处理第32-33页
       ·胞死亡率的统计第33页
       ·超级稻悬浮细胞外POD活性的测定第33页
       ·DNA提取及琼脂糖凝胶电泳检测第33-34页
   ·结果与分析第34-38页
     ·不同的继代次数对愈伤组织的褐化程度和分散性的影响第34页
     ·不同继代次数的超级稻愈伤组织对其悬浮细胞增殖的影响第34-35页
     ·不同悬浮细胞系的细胞悬浮度(A_(600)和胞外POD活性变化第35-36页
     ·VK3、CaCl_2和H_2O_2对超级稻悬浮细胞胞外POD活性第36页
     ·不同浓度VK3、CaCl_2和H_2O_2,处理悬浮细胞对其胞外POD活性的影响第36-37页
     ·VK3、CaCl_2和H_2O_2处理对超级稻悬浮细胞死亡率的影响第37-38页
     ·不同化学试剂处理对超级稻悬浮细胞DNA的影响第38页
   ·讨论第38-41页
第三章 超级稻DAD1基因克隆及其大肠杆菌的表达第41-62页
   ·试验材料与仪器第41-44页
     ·主要仪器设备第41页
     ·材料第41-44页
       ·植物材料第41-42页
       ·质粒和菌株第42页
       ·引物和测序第42页
       ·主要试剂和试剂盒第42-43页
       ·培养基的配制第43页
       ·其他常用试剂的配置第43-44页
   ·试验方法第44-52页
     ·DAD1基因的克隆与序列分析第44-51页
       ·总RNA提取第44-45页
       ·逆转录第45页
       ·PCR扩增反应第45-46页
       ·回收纯化PCR或酶切产物第46-47页
       ·DNA连接第47-48页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化第48页
       ·重组菌落质粒DNA的抽提第48-49页
       ·DNA的酶切第49页
       ·重组子的快速鉴定第49页
       ·重组菌落质粒DNA PCR扩增鉴定第49-50页
       ·测序第50页
       ·超级稻DAD1基因mRNA的3-UTR的研究第50-51页
     ·DAD1基因在大肠杆菌中的表达第51-52页
       ·目的基因的酶切第51页
       ·表达载体pET22b的酶切第51页
       ·目的片断与载体的连接与转化第51页
       ·阳性克隆的筛选第51页
       ·重组质粒的转化第51页
       ·诱导表达第51-52页
   ·结果与分析第52-58页
     ·超级稻DAD1基因cDNA的克隆与序列分析第52-55页
       ·总RNA的提取第53页
       ·RT-PCR扩增DAD1基因cDNA第53页
       ·重组菌落的筛选第53-54页
       ·测序结果及分析第54-55页
     ·超级稻DAD1基因mRNA的3-UTR的研究第55-56页
     ·目的基因和表达载体pET22b的酶切第56-57页
     ·阳性克隆的筛选第57-58页
     ·表达产物的SDS-PAGE分析第58页
   ·讨论第58-62页
第四章 总结第62-64页
参考文献第64-74页
附录第74-80页
致谢第80-81页
作者简介第81页

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