| 前言 | 第1-17页 |
| 实验一 不同能量摄入水平对围产期奶牛肝LDLR mRNA丰度的影响 | 第17-30页 |
| 1 材料与方法 | 第17-25页 |
| ·供试奶牛的选择、分组和饲养管理 | 第17-19页 |
| ·奶牛活体肝脏组织样品的采集 | 第19页 |
| ·载体及宿主菌 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·主要仪器设备 | 第19页 |
| ·肝LDLR mRNA和β-actin mRNA的RT-PCR扩增及序列测定 | 第19-25页 |
| ·肝LDLRmRNA丰度的测定 | 第25页 |
| ·数据处理 | 第25页 |
| 2 结果 | 第25-28页 |
| ·肝LDLR和β-actin基因的克隆及测序 | 第25-27页 |
| ·不同能量摄入水平围产期奶牛肝LDLRmRNA的定量结果 | 第27-28页 |
| 3 讨论 | 第28-29页 |
| 4 小结 | 第29-30页 |
| 实验二 神经内分泌因子对牛肝细胞LDLR mRNA丰度的影响 | 第30-38页 |
| 1 材料与方法 | 第30-34页 |
| ·材料 | 第30-32页 |
| ·主菌 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30页 |
| ·主要仪器设备 | 第30-31页 |
| ·培养基及主要试剂的配制 | 第31-32页 |
| ·方法 | 第32-34页 |
| ·细胞培养板的包被 | 第32页 |
| ·肝细胞单层原代培养 | 第32页 |
| ·培养液中添加不同浓度神经内分泌因子的单层原代培养肝细胞中LDLRmRNA丰度测定 | 第32-33页 |
| ·数据处理 | 第33-34页 |
| 2 结果 | 第34-35页 |
| ·单层原代培养肝细胞总RNA电泳结果 | 第34页 |
| ·培养液中添加不同浓度神经内分泌因子对单层原代培养肝细胞中LDLRmRNA丰度半定量PCR结果的影响 | 第34-35页 |
| 3 讨论 | 第35-36页 |
| ·胰岛素对体外培养新生牛肝细胞LDLRmRNA丰度的影响 | 第35-36页 |
| ·胰高血糖素对体外培养新生牛肝细胞LDLRmRNA丰度的影响 | 第36页 |
| ·瘦蛋白对体外培养新生牛肝细胞LDLRmRNA丰度的影响 | 第36页 |
| 4 小结 | 第36-38页 |
| 实验三 代谢产物对体外培养肝细胞LDLRmRNA表达的影响 | 第38-44页 |
| 1 材料与方法 | 第38-40页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·主要试剂 | 第38-39页 |
| ·主要仪器设备 | 第39页 |
| ·培养基及主要试剂的配制 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-40页 |
| ·肝细胞单层原代培养 | 第39页 |
| ·培养液中添加不同浓度代谢产物的单层原代培养肝细胞中LDLRmRNA丰度测定 | 第39-40页 |
| 2 结果 | 第40-41页 |
| ·单层原代培养肝细胞总RNA电泳结果 | 第40-41页 |
| ·培养液中添加不同浓度代谢产物的单层原代培养肝细胞中LDLRmRNA丰度半定量PCR结果 | 第41页 |
| 3 讨论 | 第41-43页 |
| ·NEFA对体外培养肝细胞LDLRmRNA丰度的影响 | 第42页 |
| ·BHBA对体外培养肝细胞LDLRmRNA丰度的影响 | 第42页 |
| ·葡萄糖对体外培养肝细胞LDLRmRNA丰度的影响 | 第42-43页 |
| 4 小结 | 第43-44页 |
| 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 附录 | 第49-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 作者简介 | 第53页 |
