| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 引言 | 第9-16页 |
| 第一章 二球悬铃木花粉主要变应原编码基因的克隆与表达 | 第16-42页 |
| 第一节 二球悬铃木花粉主要变应原基因cDNA的PCR扩增 | 第16-22页 |
| 1 材料与方法： | 第16-20页 |
| ·主要实验材料、仪器和试剂 | 第16-17页 |
| ·二球悬铃木花粉主要变应原编码基因cDNA的获得 | 第17-18页 |
| ·引物的设计和合成 | 第18页 |
| ·二球悬铃木花粉主要变应原编码基因的PCR扩增 | 第18-19页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第19-20页 |
| 2 结果 | 第20页 |
| 3 讨论 | 第20-22页 |
| 第二节 重组二球悬铃木花粉主要变应原基因的克隆 | 第22-32页 |
| 1 材料与方法： | 第22-27页 |
| ·主要实验材料、仪器和试剂 | 第22-23页 |
| ·目的片段与载体质粒的双酶切 | 第23-24页 |
| ·DNA凝胶回收 | 第24-25页 |
| ·目的片段与载体质粒的连接 | 第25页 |
| ·连接反应液转化感受态大肠杆菌DH5α | 第25-26页 |
| ·提取重组质粒DNA | 第26-27页 |
| ·鉴定阳性重组菌 | 第27页 |
| 2 结果 | 第27-30页 |
| 3 讨论 | 第30-32页 |
| 第三节 重组二球悬铃木花粉主要变应原的原核表达 | 第32-42页 |
| 1 材料与方法： | 第32-36页 |
| ·主要实验材料、仪器和试剂 | 第32-33页 |
| ·重组二球悬铃木花粉主要变应原表达系统的构建 | 第33页 |
| ·重组二球悬铃木花粉主要变应原在大肠杆菌中的表达 | 第33-34页 |
| ·诱导蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第34-36页 |
| ·不同时间诱导重组二球悬铃木花粉主要变应原的表达 | 第36页 |
| ·不同浓度IPTG诱导重组二球悬铃木花粉主要变应原的表达 | 第36页 |
| ·不同温度诱导重组二球悬铃木花粉主要变应原的表达 | 第36页 |
| 2 结果 | 第36-41页 |
| 3 讨论 | 第41-42页 |
| 第二章 免疫印迹对重组二球悬铃木花粉主要变应原蛋白进行鉴定 | 第42-46页 |
| 1 材料与方法： | 第42-44页 |
| ·主要实验材料、仪器和试剂 | 第42页 |
| ·蛋白质样品的制备 | 第42-43页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第43页 |
| ·蛋白质的电转移 | 第43页 |
| ·靶蛋白的免疫学检测 | 第43-44页 |
| 2 结果 | 第44页 |
| 3 讨论 | 第44-46页 |
| 结语 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 综述：花粉变应原分子生物学研究现状 | 第52-61页 |
| 论文独创性声明 | 第61页 |
| 论文使用授权声明 | 第61页 |
