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三个水稻叶色突变体的鉴定与基因克隆

第一部分 文献综述第1-47页
 第一章 水稻基因组学研究第12-27页
  1.水稻基因组测序第12-13页
  2.水稻功能基因组研究第13-27页
   ·水稻突变体第14-19页
     ·物理和化学诱变第14-15页
     ·插入诱变第15-19页
   ·克隆和研究功能基因的方法第19-27页
     ·正向遗传学第19-22页
     ·反向遗传学第22-27页
 第二章 叶绿素生物合成和降解研究进展第27-45页
  1.叶色突变体第27-37页
   ·叶色突变体的种类第27-28页
   ·叶色突变体的遗传第28页
   ·叶色突变的分子机理第28-31页
     ·叶绿素生物合成和降解途径中的基因突变第29页
     ·叶绿体发育相关基因突变第29-30页
     ·血红素代谢途径的基因突变第30页
     ·编码其它叶绿体蛋白的基因突变第30-31页
   ·叶色突变的应用第31-34页
     ·叶色变异作为形态标记第31页
     ·叶色突变用于园林绿化第31页
     ·叶色突变用于品种改良第31-32页
     ·叶色突变体用于研究光合作用第32页
     ·叶色突变体在功能基因组学研究中的应用第32-34页
   ·水稻叶色突变体第34-37页
  2.叶绿素生物合成第37-41页
   ·δ-氨基酮戊酸的生物合成第37-38页
   ·从δ-氨基酮戊酸到原卟啉Ⅸ的合成第38页
   ·从原卟啉Ⅸ到叶绿素的形成第38-41页
  3.叶绿素降解途径第41-44页
   ·参与叶绿素降解的几个酶及其产物第41-43页
     ·叶绿素酶第41-42页
     ·脱镁螯合酶第42页
     ·脱镁叶绿素甲酯酸a单加氧酶第42页
     ·红色叶绿素降解物还原酶第42-43页
     ·非荧光叶绿素降解物丙二酸单酰转移酶第43页
   ·叶绿素降解产物的去向第43页
   ·叶绿素b降解问题第43-44页
  4.叶绿素代谢中的信号分子和调控因子第44-45页
 结语第45-46页
 本研究的目的意义第46-47页
第二部分 研究报告第47-95页
 第一章 低温敏感叶色突变体的鉴定和克隆第47-68页
  1.材料和方法第48-55页
   ·材料第48-50页
     ·植物材料第48页
     ·载体第48页
     ·菌株第48页
     ·主要分子生物学试剂、化学试剂和仪器第48-50页
   ·方法第50-55页
     ·突变体的发现第50页
     ·突变体的遗传分析第50页
     ·突变体的温敏实验第50页
     ·叶绿素和类胡萝卜素含量的测定第50-51页
     ·水稻总DNA的提取第51页
     ·转基因水稻的PCR检测第51-52页
     ·转基因水稻的潮霉素抗性分析第52页
     ·旁邻序列的扩增第52-54页
     ·共分离的PCR验证第54页
     ·水稻总RNA的提取第54-55页
     ·目的基因cDNA的扩增第55页
  2.结果与分析第55-66页
   ·寻找突变体第55-56页
   ·对突变体进行转基因阳性检测第56页
   ·TAIL-PCR获得旁邻序列第56-57页
   ·一个共分离叶色突变体的表型第57-59页
   ·叶色突变体对低温敏感第59-60页
   ·叶绿素和类胡萝卜素含量的测定第60页
   ·突变体的遗传分析第60-61页
   ·突变体和T-DNA插入共分离第61-65页
     ·PCR验证第61-63页
     ·潮霉素抗性检测第63-65页
   ·插入位点分析第65页
   ·RNA干涉载体构建第65-66页
   ·RNA干涉验证基因功能第66页
  3 讨论第66-68页
 第二章 缺叶绿素b突变体的鉴定和克隆第68-83页
  1.材料和方法第68-73页
   ·材料第68-69页
     ·植物材料第68页
     ·菌株第68-69页
     ·原始质粒第69页
     ·主要分子生物学试剂、化学试剂和仪器第69页
   ·方法第69-73页
     ·InDels和CAPS分子标记引物的设计第69-70页
     ·质粒DNA的酶切第70页
     ·DNA片断的回收第70-71页
     ·连接反应第71页
     ·连接产物的转化第71-72页
     ·碱裂解法提取质粒第72页
     ·植物表达载体的农杆菌转化第72-73页
     ·农杆菌转化子的鉴定第73页
     ·农杆菌介导的水稻遗传转化第73页
  2.结果与分析第73-81页
   ·突变体的表型第73-74页
   ·突变体的遗传分析第74-75页
   ·突变体和T-DNA插入的共分离分析第75页
   ·cbl基因的染色体定位第75-76页
   ·cbl基因的精细定位第76-79页
   ·23kb区域的基因预测第79页
   ·RNA干涉验证基因功能第79-81页
  3.讨论第81-83页
 第三章 一个高温敏感叶色突变体的鉴定和克隆第83-95页
  1.材料和方法第83-84页
   ·材料第83-84页
   ·方法第84页
  2.结果与分析第84-93页
   ·突变体的表型第84-86页
   ·突变体的遗传分析第86页
   ·突变体和T-DNA插入的共分离分析第86-87页
   ·cdel(t)基因的连锁分析第87-90页
   ·cdel(t)基因的精细定位第90-93页
   ·OsgluRS基因是cdel(t)基因的候选基因第93页
  3.讨论第93-95页
参考文献第95-112页
附录第112-117页
致谢第117页

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