第一部分 文献综述 | 第1-47页 |
第一章 水稻基因组学研究 | 第12-27页 |
1.水稻基因组测序 | 第12-13页 |
2.水稻功能基因组研究 | 第13-27页 |
·水稻突变体 | 第14-19页 |
·物理和化学诱变 | 第14-15页 |
·插入诱变 | 第15-19页 |
·克隆和研究功能基因的方法 | 第19-27页 |
·正向遗传学 | 第19-22页 |
·反向遗传学 | 第22-27页 |
第二章 叶绿素生物合成和降解研究进展 | 第27-45页 |
1.叶色突变体 | 第27-37页 |
·叶色突变体的种类 | 第27-28页 |
·叶色突变体的遗传 | 第28页 |
·叶色突变的分子机理 | 第28-31页 |
·叶绿素生物合成和降解途径中的基因突变 | 第29页 |
·叶绿体发育相关基因突变 | 第29-30页 |
·血红素代谢途径的基因突变 | 第30页 |
·编码其它叶绿体蛋白的基因突变 | 第30-31页 |
·叶色突变的应用 | 第31-34页 |
·叶色变异作为形态标记 | 第31页 |
·叶色突变用于园林绿化 | 第31页 |
·叶色突变用于品种改良 | 第31-32页 |
·叶色突变体用于研究光合作用 | 第32页 |
·叶色突变体在功能基因组学研究中的应用 | 第32-34页 |
·水稻叶色突变体 | 第34-37页 |
2.叶绿素生物合成 | 第37-41页 |
·δ-氨基酮戊酸的生物合成 | 第37-38页 |
·从δ-氨基酮戊酸到原卟啉Ⅸ的合成 | 第38页 |
·从原卟啉Ⅸ到叶绿素的形成 | 第38-41页 |
3.叶绿素降解途径 | 第41-44页 |
·参与叶绿素降解的几个酶及其产物 | 第41-43页 |
·叶绿素酶 | 第41-42页 |
·脱镁螯合酶 | 第42页 |
·脱镁叶绿素甲酯酸a单加氧酶 | 第42页 |
·红色叶绿素降解物还原酶 | 第42-43页 |
·非荧光叶绿素降解物丙二酸单酰转移酶 | 第43页 |
·叶绿素降解产物的去向 | 第43页 |
·叶绿素b降解问题 | 第43-44页 |
4.叶绿素代谢中的信号分子和调控因子 | 第44-45页 |
结语 | 第45-46页 |
本研究的目的意义 | 第46-47页 |
第二部分 研究报告 | 第47-95页 |
第一章 低温敏感叶色突变体的鉴定和克隆 | 第47-68页 |
1.材料和方法 | 第48-55页 |
·材料 | 第48-50页 |
·植物材料 | 第48页 |
·载体 | 第48页 |
·菌株 | 第48页 |
·主要分子生物学试剂、化学试剂和仪器 | 第48-50页 |
·方法 | 第50-55页 |
·突变体的发现 | 第50页 |
·突变体的遗传分析 | 第50页 |
·突变体的温敏实验 | 第50页 |
·叶绿素和类胡萝卜素含量的测定 | 第50-51页 |
·水稻总DNA的提取 | 第51页 |
·转基因水稻的PCR检测 | 第51-52页 |
·转基因水稻的潮霉素抗性分析 | 第52页 |
·旁邻序列的扩增 | 第52-54页 |
·共分离的PCR验证 | 第54页 |
·水稻总RNA的提取 | 第54-55页 |
·目的基因cDNA的扩增 | 第55页 |
2.结果与分析 | 第55-66页 |
·寻找突变体 | 第55-56页 |
·对突变体进行转基因阳性检测 | 第56页 |
·TAIL-PCR获得旁邻序列 | 第56-57页 |
·一个共分离叶色突变体的表型 | 第57-59页 |
·叶色突变体对低温敏感 | 第59-60页 |
·叶绿素和类胡萝卜素含量的测定 | 第60页 |
·突变体的遗传分析 | 第60-61页 |
·突变体和T-DNA插入共分离 | 第61-65页 |
·PCR验证 | 第61-63页 |
·潮霉素抗性检测 | 第63-65页 |
·插入位点分析 | 第65页 |
·RNA干涉载体构建 | 第65-66页 |
·RNA干涉验证基因功能 | 第66页 |
3 讨论 | 第66-68页 |
第二章 缺叶绿素b突变体的鉴定和克隆 | 第68-83页 |
1.材料和方法 | 第68-73页 |
·材料 | 第68-69页 |
·植物材料 | 第68页 |
·菌株 | 第68-69页 |
·原始质粒 | 第69页 |
·主要分子生物学试剂、化学试剂和仪器 | 第69页 |
·方法 | 第69-73页 |
·InDels和CAPS分子标记引物的设计 | 第69-70页 |
·质粒DNA的酶切 | 第70页 |
·DNA片断的回收 | 第70-71页 |
·连接反应 | 第71页 |
·连接产物的转化 | 第71-72页 |
·碱裂解法提取质粒 | 第72页 |
·植物表达载体的农杆菌转化 | 第72-73页 |
·农杆菌转化子的鉴定 | 第73页 |
·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第73页 |
2.结果与分析 | 第73-81页 |
·突变体的表型 | 第73-74页 |
·突变体的遗传分析 | 第74-75页 |
·突变体和T-DNA插入的共分离分析 | 第75页 |
·cbl基因的染色体定位 | 第75-76页 |
·cbl基因的精细定位 | 第76-79页 |
·23kb区域的基因预测 | 第79页 |
·RNA干涉验证基因功能 | 第79-81页 |
3.讨论 | 第81-83页 |
第三章 一个高温敏感叶色突变体的鉴定和克隆 | 第83-95页 |
1.材料和方法 | 第83-84页 |
·材料 | 第83-84页 |
·方法 | 第84页 |
2.结果与分析 | 第84-93页 |
·突变体的表型 | 第84-86页 |
·突变体的遗传分析 | 第86页 |
·突变体和T-DNA插入的共分离分析 | 第86-87页 |
·cdel(t)基因的连锁分析 | 第87-90页 |
·cdel(t)基因的精细定位 | 第90-93页 |
·OsgluRS基因是cdel(t)基因的候选基因 | 第93页 |
3.讨论 | 第93-95页 |
参考文献 | 第95-112页 |
附录 | 第112-117页 |
致谢 | 第117页 |