| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略词 | 第6-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-32页 |
| 1.免疫球蛋白的生物学特性 | 第9-17页 |
| ·免疫球蛋白的基本结构 | 第9-11页 |
| ·免疫球蛋白基因的结构 | 第11-13页 |
| ·免疫球蛋白基因的重排 | 第13-14页 |
| ·V(D)J与C基因片段的重排和免疫球蛋白类别转换 | 第14页 |
| ·免疫球蛋白基因的表达调控 | 第14-16页 |
| ·免疫球蛋白多样性的产生 | 第16-17页 |
| 2.牛免疫球蛋白基因研究进展 | 第17-20页 |
| ·牛免疫球蛋白轻链基因 | 第17-18页 |
| ·牛免疫球蛋白重链基因 | 第18页 |
| ·牛抗体多样性产生的机制 | 第18-20页 |
| 3.基因工程抗体及利用转基因动物生产人源化抗体 | 第20-26页 |
| ·小分子抗体 | 第20-22页 |
| ·抗体融合蛋白 | 第22-23页 |
| ·鼠单抗的人源化 | 第23页 |
| ·利用转基因小鼠与牛生产人源化抗体 | 第23-24页 |
| ·抗体药物的临床应用 | 第24-26页 |
| 4.基因组DNA文库及常用载体 | 第26-31页 |
| ·噬菌体载体 | 第27-28页 |
| ·BAC载体 | 第28-30页 |
| ·BAC文库筛选系统 | 第30-31页 |
| 5.本实验研究的目的和意义 | 第31-32页 |
| 第二章 材料与方法 | 第32-45页 |
| 1.主要试剂与仪器 | 第32页 |
| ·主要药品和酶 | 第32页 |
| ·主要仪器 | 第32页 |
| 2.分析软件 | 第32-33页 |
| 3.常用缓冲液与试剂的配制 | 第33-34页 |
| 4.分子生物学常用技术 | 第34-38页 |
| 5.λ噬菌体文库的筛选 | 第38-41页 |
| ·λ噬菌体文库筛选的技术路线 | 第38页 |
| ·λ噬菌体培养常用方法 | 第38-41页 |
| 6.BAC文库的筛选 | 第41-42页 |
| ·菌株、载体和文库 | 第41页 |
| ·PCR法从BAC文库中筛选阳性克隆技术方案 | 第41页 |
| ·BAC DNA的小量提取、酶切和脉冲电泳 | 第41-42页 |
| 7.SOUTHERN BLOT | 第42-45页 |
| ·Southern Blot所需试剂 | 第42-43页 |
| ·探针的标记 | 第43页 |
| ·Southern blot步骤 | 第43-45页 |
| 第三章 结果与分析 | 第45-64页 |
| 1.牛λ噬菌体基因组文库的筛选与鉴定 | 第45-51页 |
| ·牛基因组的提取 | 第45页 |
| ·PCR扩增牛免疫球蛋白lambda轻链C_λ区保守序列 | 第45-47页 |
| ·牛λ噬菌体基因组文库的筛选 | 第47-51页 |
| 2.牛BAC基因组文库的筛选及结果 | 第51-58页 |
| ·牛BAC基因组文库筛选和阳性克隆的获得 | 第51页 |
| ·BAC阳性克隆的脉冲电泳和和Southern Blot杂交 | 第51-52页 |
| ·阳性片段的克隆回收、连接转化及重组子的鉴定 | 第52-53页 |
| ·阳性重组克隆的序列测定 | 第53-58页 |
| 3.获得的牛IGλ序列之间的PCR扩增及序列分析 | 第58-64页 |
| ·获得的牛Igλ序列 | 第58-59页 |
| ·PCR扩增及已知序列间相对位置分析 | 第59-60页 |
| ·牛免疫球蛋白lambda轻链C_λ序列同源性分析 | 第60-62页 |
| ·牛免疫球蛋白lambda轻链C_λ区序列的进化研究 | 第62-64页 |
| 第四章 讨论 | 第64-66页 |
| 1.关于基因组文库的筛选 | 第64页 |
| 2.牛免疫球蛋白LAMBDA轻链C区的结构、大小 | 第64-65页 |
| 3.牛免疫球蛋白LAMBDA轻链的构成及其多样性的产生 | 第65-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 附录 | 第73-77页 |
