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农杆菌介导下的Bt基因和Bar基因在陆地棉(Gossypium hirsutum L.)上的遗传转化

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
缩略词表第8-9页
1. 文献综述第9-21页
   ·棉花的组织培养第9-10页
     ·棉花组织培养技术的发展第9页
     ·棉花体细胞胚胎发生和植株再生第9-10页
   ·棉花的遗传转化方法第10-12页
       ·基因枪法第10页
     ·花粉管通道法第10-11页
     ·农杆菌介导法第11-12页
       ·农杆菌介导的转化机理第11-12页
       ·农杆菌介导法的运用和发展第12页
   ·棉花的基因工程第12-18页
     ·抗虫基因工程第13-14页
       ·Bt基因第13-14页
       ·其它抗虫基因第14页
     ·抗除草剂基因工程第14-16页
       ·抗草丁膦转基因棉花第15-16页
       ·其它抗除草剂转基因棉花第16页
     ·抗病基因工程第16-17页
     ·纤维改良基因工程和抗逆境基因工程第17页
     ·基因工程的发展方向第17-18页
   ·谷氨酰胺合成酶与外源物质的互作第18页
   ·转基因抗虫棉的发展和安全性研究第18-20页
     ·转基因抗虫棉在我国的发展趋势第18-19页
     ·转基因抗虫棉的安全性研究第19-20页
   ·本研究的目的和意义第20-21页
2. 方法和材料第21-28页
   ·供试材料第21-23页
     ·植物材料第21页
     ·根癌农杆菌和转化载体第21-22页
     ·部分试剂来源第22页
     ·培养条件及其不同培养基配方第22-23页
   ·实验方法第23-28页
     ·转化方法第23页
       ·无菌苗的制备第23页
       ·根癌农杆菌感染和共培养第23页
       ·抑菌培养和选择培养第23页
     ·再生苗的嫁接和移栽第23-24页
       ·普通嫁接第23-24页
       ·无菌嫁接第24页
       ·移栽第24页
     ·转化材料的分子鉴定第24-27页
       ·质粒DNA的提取:第24页
       ·棉花基因组DNA的提取:第24-25页
         ·小量法提取DNA(用于PCR扩增)第24-25页
         ·大量法提取DNA(用于Southern杂交)第25页
       ·PCR反应第25-26页
       ·Southern杂交第26-27页
     ·转化和共培养体系中的参数调节第27页
       ·乙酰丁香酮对转化效率的影响第27页
       ·农杆菌浓度对转化效率的影响第27页
       ·不同共培养温度对转化效率的影响第27页
     ·数据处理第27-28页
3 结果和分析第28-44页
   ·各品种筛选压的测定第28页
   ·转化体系的参数调节第28-31页
     ·乙酰丁香酮对转化效率的影响第28-29页
     ·农杆菌液浓度对转化效率的影响第29页
     ·不同共培养温度对转化效率的影响第29-30页
     ·各品种抗性愈伤组织的PCR阳性率第30-31页
   ·含酰胺氨基酸对筛选效率的影响第31-34页
   ·长期继代对胚性愈伤组织胚胎发生能力的影响第34-35页
   ·转基因棉花的分子检测第35-36页
     ·PCR检测第35-36页
     ·Southern验证第36页
   ·转基因棉花的表型检测第36-38页
     ·抗除草剂表型的鉴定第36-37页
     ·抗虫性的鉴定第37-38页
   ·筛选再生程序和移栽第38-44页
     ·筛选再生程序的优化第38-41页
     ·移栽和嫁接的探索第41-44页
       ·普通嫁接法和无菌嫁接法的比较第41-43页
       ·炼苗对移栽成活率的影响第43-44页
4. 讨论第44-49页
   ·体细胞变异和畸形苗的纠正第44-45页
   ·转化方法的选用第45-46页
   ·棉花的嫁接和移栽第46-48页
   ·Bar基因和Bt基因的应用前景第48-49页
参考文献第49-59页
致谢第59页

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