农杆菌介导下的Bt基因和Bar基因在陆地棉(Gossypium hirsutum L.)上的遗传转化
摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
缩略词表 | 第8-9页 |
1. 文献综述 | 第9-21页 |
·棉花的组织培养 | 第9-10页 |
·棉花组织培养技术的发展 | 第9页 |
·棉花体细胞胚胎发生和植株再生 | 第9-10页 |
·棉花的遗传转化方法 | 第10-12页 |
·基因枪法 | 第10页 |
·花粉管通道法 | 第10-11页 |
·农杆菌介导法 | 第11-12页 |
·农杆菌介导的转化机理 | 第11-12页 |
·农杆菌介导法的运用和发展 | 第12页 |
·棉花的基因工程 | 第12-18页 |
·抗虫基因工程 | 第13-14页 |
·Bt基因 | 第13-14页 |
·其它抗虫基因 | 第14页 |
·抗除草剂基因工程 | 第14-16页 |
·抗草丁膦转基因棉花 | 第15-16页 |
·其它抗除草剂转基因棉花 | 第16页 |
·抗病基因工程 | 第16-17页 |
·纤维改良基因工程和抗逆境基因工程 | 第17页 |
·基因工程的发展方向 | 第17-18页 |
·谷氨酰胺合成酶与外源物质的互作 | 第18页 |
·转基因抗虫棉的发展和安全性研究 | 第18-20页 |
·转基因抗虫棉在我国的发展趋势 | 第18-19页 |
·转基因抗虫棉的安全性研究 | 第19-20页 |
·本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
2. 方法和材料 | 第21-28页 |
·供试材料 | 第21-23页 |
·植物材料 | 第21页 |
·根癌农杆菌和转化载体 | 第21-22页 |
·部分试剂来源 | 第22页 |
·培养条件及其不同培养基配方 | 第22-23页 |
·实验方法 | 第23-28页 |
·转化方法 | 第23页 |
·无菌苗的制备 | 第23页 |
·根癌农杆菌感染和共培养 | 第23页 |
·抑菌培养和选择培养 | 第23页 |
·再生苗的嫁接和移栽 | 第23-24页 |
·普通嫁接 | 第23-24页 |
·无菌嫁接 | 第24页 |
·移栽 | 第24页 |
·转化材料的分子鉴定 | 第24-27页 |
·质粒DNA的提取: | 第24页 |
·棉花基因组DNA的提取: | 第24-25页 |
·小量法提取DNA(用于PCR扩增) | 第24-25页 |
·大量法提取DNA(用于Southern杂交) | 第25页 |
·PCR反应 | 第25-26页 |
·Southern杂交 | 第26-27页 |
·转化和共培养体系中的参数调节 | 第27页 |
·乙酰丁香酮对转化效率的影响 | 第27页 |
·农杆菌浓度对转化效率的影响 | 第27页 |
·不同共培养温度对转化效率的影响 | 第27页 |
·数据处理 | 第27-28页 |
3 结果和分析 | 第28-44页 |
·各品种筛选压的测定 | 第28页 |
·转化体系的参数调节 | 第28-31页 |
·乙酰丁香酮对转化效率的影响 | 第28-29页 |
·农杆菌液浓度对转化效率的影响 | 第29页 |
·不同共培养温度对转化效率的影响 | 第29-30页 |
·各品种抗性愈伤组织的PCR阳性率 | 第30-31页 |
·含酰胺氨基酸对筛选效率的影响 | 第31-34页 |
·长期继代对胚性愈伤组织胚胎发生能力的影响 | 第34-35页 |
·转基因棉花的分子检测 | 第35-36页 |
·PCR检测 | 第35-36页 |
·Southern验证 | 第36页 |
·转基因棉花的表型检测 | 第36-38页 |
·抗除草剂表型的鉴定 | 第36-37页 |
·抗虫性的鉴定 | 第37-38页 |
·筛选再生程序和移栽 | 第38-44页 |
·筛选再生程序的优化 | 第38-41页 |
·移栽和嫁接的探索 | 第41-44页 |
·普通嫁接法和无菌嫁接法的比较 | 第41-43页 |
·炼苗对移栽成活率的影响 | 第43-44页 |
4. 讨论 | 第44-49页 |
·体细胞变异和畸形苗的纠正 | 第44-45页 |
·转化方法的选用 | 第45-46页 |
·棉花的嫁接和移栽 | 第46-48页 |
·Bar基因和Bt基因的应用前景 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-59页 |
致谢 | 第59页 |