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人溶菌酶/乳铁蛋白双基因表达载体的构建与转基因牛克隆胚的体外发育

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-13页
第一章 抗菌蛋白的研究进展第13-17页
   ·人溶菌酶第13-14页
     ·溶菌酶的种类和特点第13页
     ·溶菌酶的应用第13-14页
     ·重组人溶菌酶研究进展第14页
   ·人乳铁蛋白研究进展第14-17页
     ·乳铁蛋白的分布及特性第15页
     ·乳铁蛋白的生物学功能第15页
     ·重组人乳铁蛋白研究进展第15-17页
第二章 哺乳动物核移植技术进展第17-26页
   ·哺乳动物核移植技术研究概况第17-20页
     ·哺乳动物胚胎细胞核移植研究进展第18-19页
     ·胚胎干细胞核移植研究进展第19页
     ·哺乳动物体细胞核移植研究进展第19-20页
     ·哺乳类转基因克隆动物研究进展第20页
     ·种间细胞核移植研究进展第20页
   ·核移植的相关理论基础与机理第20-21页
   ·核移植的程序第21-23页
     ·核移植受体细胞的去核第21页
     ·核移植供体细胞的分离第21-22页
     ·克隆胚胎的重建第22页
     ·克隆胚的激活第22-23页
   ·影响哺乳动物核移植的因素第23-24页
     ·卵母细胞核受体胞质对核移植结果的影响第23-24页
     ·核供体对核移植结果的影响第24页
     ·融合-激活方案对核移植结果的影响第24页
   ·哺乳动物核移植的应用前景第24-25页
     ·畜牧业第24-25页
     ·医疗卫生第25页
     ·物种保护第25页
   ·哺乳动物核移植存在的问题第25-26页
第三章 转基因动物研究进展第26-36页
   ·转基因动物研究发展史第26-28页
   ·转基因技术与方法第28-32页
     ·显微注射法第28页
     ·逆转录病毒载体法第28-29页
     ·精子载体法第29-30页
     ·体细胞克隆法第30-31页
     ·胚胎干细胞介导法第31页
     ·其他技术和方法第31-32页
   ·转基因动物技术的现状及存在的问题第32-33页
     ·生产转基因动物需要高水平的 DNA 操作第32页
     ·转基因动物方法效率低、成本高第32-33页
     ·转基因表达水平低,表达效率不高第33页
     ·转基因在宿主基因组中的行为难以控制,且不容易遗传第33页
     ·外源基因的整合机制尚不清楚第33页
   ·生产转基因动物问题的对策第33-34页
   ·转基因克隆动物技术在生物领域的应用前景第34-36页
     ·动物遗传育种第34页
     ·生物制药及基因治疗第34-35页
     ·组织器官移植第35页
     ·建立诊断和治疗人类疾病的动物模型第35-36页
第四章 hLYZ/hLTF 双基因乳腺特异性表达载体的构建第36-46页
   ·材料和方法第38-42页
     ·材料第38页
     ·方法第38-42页
   ·结果第42-44页
     ·IRES 及 hLTF 的 PCR 扩增结果第42页
     ·phLTF 及 pIRES 的酶切鉴定结果第42-44页
     ·对重组质粒 pIL 进行酶切鉴定,结果如下:第44页
     ·对重组质粒 pEBHIL 进行酶切鉴定,结果如下:第44页
   ·讨论第44-45页
   ·结论第45-46页
第五章 pEBH-IL 在奶牛乳腺上皮细胞中的表达及乳腺上皮细胞染色体分析第46-55页
   ·材料与方法第46-50页
     ·材料第46-47页
     ·方法第47-50页
   ·结果第50-52页
     ·抗性筛选的结果第50页
     ·GFP 检测第50-51页
     ·阳性克隆 PCR 鉴定结果第51页
     ·SDS-PAGE 凝胶电泳结果第51-52页
     ·Western Blot 结果第52页
     ·牛乳腺上皮细胞染色体分析结果第52页
   ·讨论第52-54页
   ·结论第54-55页
第六章 转基因奶牛克隆胚的体外发育第55-65页
   ·材料和方法第56-58页
     ·试剂和仪器第56页
     ·方法第56-58页
   ·结果第58-62页
     ·不同去核方法对克隆胚构建效率的影响第58页
     ·供体细胞的同步化处理对克隆胚体外发育的影响第58-59页
     ·转基因与未转基因乳腺上皮细胞克隆胚发育的比较第59-60页
     ·转基因乳腺上皮细胞的冻-融对克隆胚发育的影响第60页
     ·转基因乳腺上皮细胞传代次数对构建克隆胚体外发育的影响第60-61页
     ·EGFP 在克隆胚中的表达第61页
     ·克隆胚外源基因的 PCR 检测结果第61-62页
   ·讨论第62-64页
   ·结论第64-65页
参考文献第65-74页
附录第74-78页
缩略词第78-80页
致谢第80-81页
个人简介第81页

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