| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-17页 |
| ·分子标记的产生、发展及分类 | 第8页 |
| ·常用分子标记技术在园艺作物上的应用进展 | 第8-12页 |
| ·RFLP标记 | 第8-9页 |
| ·RAPD标记与SCAR标记 | 第9-10页 |
| ·AFLP标记 | 第10页 |
| ·SSR标记 | 第10-11页 |
| ·ISSR标记 | 第11-12页 |
| ·SSR标记技术的研究进展 | 第12-16页 |
| ·SSR的发现及分类 | 第12页 |
| ·SSR及各重复单元在植物中的发生频率 | 第12-13页 |
| ·传统的SSR标记开发策略 | 第13-14页 |
| ·基因组文库构建 | 第13页 |
| ·阳性克隆筛选 | 第13页 |
| ·测序及引物设计 | 第13页 |
| ·SSR—PCR扩增检测 | 第13-14页 |
| ·采取富集步骤的SSR标记开发策略 | 第14-16页 |
| ·基于RAPD的开发策略 | 第14页 |
| ·基于ISSR-PCR的SSR分离策略 | 第14-15页 |
| ·基于引物延伸的SSR分离策略 | 第15页 |
| ·利用选择杂交进行SSR分离 | 第15-16页 |
| ·公共数据库搜索进行引物设计 | 第16页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第16-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-29页 |
| ·材料 | 第17页 |
| ·植物材料 | 第17页 |
| ·Vector和菌株 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17页 |
| ·主要仪器设备 | 第17页 |
| ·方法 | 第17-29页 |
| ·基因组DNA的提取与纯化──改良的CTAB法 | 第17-20页 |
| ·DNA样品浓度、纯度的测定 | 第20页 |
| ·基因组DNA样品限制性内切酶的消化和检测 | 第20-21页 |
| ·基因组DNA样品的限制性酶切、DNA片段与接头的连接及预扩增 | 第21-22页 |
| ·DNA片段(2000-1000bp)从脂琼糖凝胶的分离、纯化 | 第22页 |
| ·微卫星DNA片段的杂交筛选(Hybridization)及目标片段的克隆 | 第22-24页 |
| ·富集的、假定为微卫星(SSR)AFLP片段的PCR克隆 | 第24页 |
| ·AFLP目标DNA片段与Vector的连接(T-A克隆) | 第24-25页 |
| ·转化 | 第25页 |
| ·建库及筛库 | 第25-27页 |
| ·重组质粒DNA提取、纯化 | 第27页 |
| ·重组质粒DNA的酶切鉴定 | 第27-28页 |
| ·克隆产物的测序 | 第28页 |
| ·测序结果分析 | 第28-29页 |
| 第三章 结果与分析 | 第29-33页 |
| ·柿基因组总DNA的提取与质量检测 | 第29页 |
| ·基因组DNA的酶切检测 | 第29-30页 |
| ·基因组总DNA的酶切、接头连接、AFLP的扩增结果 | 第30页 |
| ·DNA片段扩增产物的回收与克隆 | 第30页 |
| ·SSR探针与DNA片段杂交、磁珠回收杂交复合物的结果分析 | 第30页 |
| ·SSR富集DNA片段与Vector的连接、重组子向大肠杆菌细胞的转化结果分析 | 第30-31页 |
| ·SSR富集DNA文库的构建及筛选 | 第31-32页 |
| ·阳性克隆质粒DNA提取及酶切检测 | 第32-33页 |
| 第四章 讨论 | 第33-35页 |
| ·影响柿基因组DNA提取质量的因素 | 第33页 |
| ·影响微卫星探针(Oligo Probe)杂交效率的因素 | 第33页 |
| ·方法的可靠性 | 第33-35页 |
| 致谢 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-42页 |
| 作者简介 | 第42-43页 |
| 附录 | 第43-49页 |
