摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 前言 | 第9-22页 |
1 土壤缺磷现象的普遍存在对水稻育种提出了新要求 | 第9-10页 |
2 植物对低磷营养胁迫的适应机制 | 第10-12页 |
·与活化土壤难溶性磷有关的生物学机制 | 第10-11页 |
·根系对低浓度可溶性磷有效吸收的生物学机制 | 第11-12页 |
·菌根与土壤磷的活化 | 第12页 |
3 磷酸盐转运蛋白的作用与结构 | 第12-17页 |
·磷酸盐的获得与转运 | 第13-14页 |
·磷酸盐转运蛋白的结构 | 第14-15页 |
·磷酸盐转运蛋白的表达调控 | 第15-16页 |
·磷酸盐转运蛋白的功能 | 第16-17页 |
4 原位杂交 | 第17-20页 |
·RNA 原位杂交的基本原理 | 第17-18页 |
·RNA 原位杂交的操作流程 | 第18-19页 |
·RNA 原位杂交在植物基因表达研究中的应用 | 第19-20页 |
·RNA 原位杂交的应用前景 | 第20页 |
5 研究意义及目的 | 第20-22页 |
第二章 编码水稻磷酸盐转运蛋白全长基因的克隆 | 第22-40页 |
1 材料 | 第22页 |
·水稻材料 | 第22页 |
·菌株、质粒 | 第22页 |
·生物试剂 | 第22页 |
2 方法 | 第22-32页 |
·试验处理与取样 | 第22-23页 |
·RNA 提取与RT-PCR | 第23-25页 |
·PCR 产物回收纯化 | 第25-26页 |
·PCR 产物的T-A 克隆 | 第26页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备和热击转化 | 第26-27页 |
·转化子的验证 | 第27-29页 |
·测序和序列分析 | 第29页 |
·水稻基因组DNA 提取与Southern blot 分析 | 第29-32页 |
3 结果与讨论 | 第32-40页 |
·目的基因的获得与同源性分析 | 第32-37页 |
·磷酸盐转运蛋白编码基因OrLPT1 的Southern blot 分析 | 第37页 |
·OrLPT1 的系统进化分析 | 第37-40页 |
第三章 OrLPT1 的原核表达及抗GFP 抗体的Western blot 检测 | 第40-46页 |
1 材料与方法 | 第40-43页 |
·菌株、质粒 | 第40页 |
·方法 | 第40-43页 |
2 结果与讨论 | 第43-46页 |
·表达载体的构建 | 第43-44页 |
·融合蛋白的Western Blot 检测 | 第44-46页 |
第四章 OrLPT1 的表达调控和特异性研究 | 第46-59页 |
1 材料 | 第46页 |
·水稻材料 | 第46页 |
·生物试剂 | 第46页 |
2 方法 | 第46-54页 |
·试验处理与取样 | 第46页 |
·RNA 提取与RT-PCR | 第46-47页 |
·Northern blot | 第47-48页 |
·原位杂交 | 第48-54页 |
3 结果与讨论 | 第54-59页 |
·OrLPT1 表达的器官特异性 | 第54页 |
·OrLPT1 表达的组织细胞特异性 | 第54-57页 |
·根际营养与OrLPT1 的表达调控 | 第57-59页 |
第五章 论文小结 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
附录 | 第67-73页 |
附录1 本论文所用溶液和缓冲液配方 | 第67-68页 |
附录2 本论文所用的缩写及中文对照 | 第68-69页 |
附录3 本论文所用质粒载体图谱及多克隆位点(MCS) | 第69-73页 |
硕士期间发表的文章 | 第73-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
论文独创性声明 | 第75页 |
论文使用授权声明 | 第75-76页 |