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编码水稻磷酸盐转运蛋白基因OrLPT1的克隆和表达研究

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
第一章 前言第9-22页
 1 土壤缺磷现象的普遍存在对水稻育种提出了新要求第9-10页
 2 植物对低磷营养胁迫的适应机制第10-12页
   ·与活化土壤难溶性磷有关的生物学机制第10-11页
   ·根系对低浓度可溶性磷有效吸收的生物学机制第11-12页
   ·菌根与土壤磷的活化第12页
 3 磷酸盐转运蛋白的作用与结构第12-17页
   ·磷酸盐的获得与转运第13-14页
   ·磷酸盐转运蛋白的结构第14-15页
   ·磷酸盐转运蛋白的表达调控第15-16页
   ·磷酸盐转运蛋白的功能第16-17页
 4 原位杂交第17-20页
   ·RNA 原位杂交的基本原理第17-18页
   ·RNA 原位杂交的操作流程第18-19页
   ·RNA 原位杂交在植物基因表达研究中的应用第19-20页
   ·RNA 原位杂交的应用前景第20页
 5 研究意义及目的第20-22页
第二章 编码水稻磷酸盐转运蛋白全长基因的克隆第22-40页
 1 材料第22页
   ·水稻材料第22页
   ·菌株、质粒第22页
   ·生物试剂第22页
 2 方法第22-32页
   ·试验处理与取样第22-23页
   ·RNA 提取与RT-PCR第23-25页
   ·PCR 产物回收纯化第25-26页
   ·PCR 产物的T-A 克隆第26页
   ·大肠杆菌感受态细胞的制备和热击转化第26-27页
   ·转化子的验证第27-29页
   ·测序和序列分析第29页
   ·水稻基因组DNA 提取与Southern blot 分析第29-32页
 3 结果与讨论第32-40页
   ·目的基因的获得与同源性分析第32-37页
   ·磷酸盐转运蛋白编码基因OrLPT1 的Southern blot 分析第37页
   ·OrLPT1 的系统进化分析第37-40页
第三章 OrLPT1 的原核表达及抗GFP 抗体的Western blot 检测第40-46页
 1 材料与方法第40-43页
   ·菌株、质粒第40页
   ·方法第40-43页
 2 结果与讨论第43-46页
   ·表达载体的构建第43-44页
   ·融合蛋白的Western Blot 检测第44-46页
第四章 OrLPT1 的表达调控和特异性研究第46-59页
 1 材料第46页
   ·水稻材料第46页
   ·生物试剂第46页
 2 方法第46-54页
   ·试验处理与取样第46页
   ·RNA 提取与RT-PCR第46-47页
   ·Northern blot第47-48页
   ·原位杂交第48-54页
 3 结果与讨论第54-59页
   ·OrLPT1 表达的器官特异性第54页
   ·OrLPT1 表达的组织细胞特异性第54-57页
   ·根际营养与OrLPT1 的表达调控第57-59页
第五章 论文小结第59-61页
参考文献第61-67页
附录第67-73页
 附录1 本论文所用溶液和缓冲液配方第67-68页
 附录2 本论文所用的缩写及中文对照第68-69页
 附录3 本论文所用质粒载体图谱及多克隆位点(MCS)第69-73页
硕士期间发表的文章第73-74页
致谢第74-75页
论文独创性声明第75页
论文使用授权声明第75-76页

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