| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一部分 文献综述 | 第8-22页 |
| ·冠状病毒概述 | 第8-10页 |
| ·SARS相关冠状病毒研究进展 | 第10-21页 |
| ·SARS-CoV的病原学研究 | 第11页 |
| ·SARS-CoV基因组结构及其预测编码蛋白 | 第11-12页 |
| ·SARS-CoV基因组的变异性比较 | 第12-13页 |
| ·SARS-CoV的系统发生学分析 | 第13-14页 |
| ·SARS-CoV的来源 | 第14-15页 |
| ·SARS的病理特征及其引起的机体免疫反应 | 第15-16页 |
| ·SARS-CoV基因组编码蛋白研究进展 | 第16-21页 |
| ·SARS-CoV S蛋白研究进展 | 第16-17页 |
| ·SARS-CoV E蛋白研究进展 | 第17-18页 |
| ·SARS-CoV的M蛋白研究进展 | 第18页 |
| ·SARS-CoV N蛋白研究进展 | 第18-19页 |
| ·SARS-CoV非结构蛋白研究进展 | 第19-20页 |
| ·SARS-CoV未知蛋白研究进展 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第22-33页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·菌种与细胞 | 第22页 |
| ·载体与cDNA | 第22页 |
| ·生化试剂 | 第22页 |
| ·培养基和缓冲液 | 第22-23页 |
| ·仪器设备 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-33页 |
| ·SARS-CoV X2基因的克隆 | 第23-26页 |
| ·引物设计 | 第23-24页 |
| ·PCR扩增 | 第24页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第24页 |
| ·PCR产物回收 | 第24页 |
| ·酶切消化 | 第24页 |
| ·载体连接 | 第24-25页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第25页 |
| ·热激法转化大肠杆菌感受态细胞 | 第25-26页 |
| ·阳性克隆的筛选与鉴定 | 第26页 |
| ·SARS-CoV X2基因真核表达载体的构建 | 第26-28页 |
| ·pEGFP-N1-X2载体的构建 | 第26-27页 |
| ·pEGFP-C1-X2和pCMV-myc-X2载体的构建 | 第27-28页 |
| ·X2基因系列缺失突变体的构建 | 第28页 |
| ·重组X2蛋白在转染细胞中的表达 | 第28-31页 |
| ·质粒纯化 | 第28-29页 |
| ·细胞的复苏和培养 | 第29页 |
| ·细胞转染 | 第29页 |
| ·全细胞蛋白的提取 | 第29-30页 |
| ·Western blotting | 第30-31页 |
| ·重组x2蛋白在转染细胞中的定位 | 第31-32页 |
| ·X2蛋白系列缺失突变体与核仁蛋白C23的共定位 | 第32页 |
| ·PI染色流式细胞仪检测SARS-CoV X2蛋白对293细胞周期的影响 | 第32页 |
| ·SARS-CoV X2蛋白的表达诱导COS-7细胞发生凋亡 | 第32-33页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第33-45页 |
| ·SARS-CoV X2蛋白的结构分析 | 第33页 |
| ·SARS-CoV X2基因的克隆及其真核表达载体的构建 | 第33-34页 |
| ·X2基因系列缺失突变体的构建 | 第34-35页 |
| ·SARS-CoV X2蛋白在转染细胞中的表达 | 第35页 |
| ·SARS-CoV X2蛋白在转染细胞中的定位 | 第35-36页 |
| ·SARS-CoV X2蛋白在转染细胞中不同时间点的定位情况 | 第36-37页 |
| ·SARS-CoV X2蛋白与核仁蛋白C23的共定位 | 第37-38页 |
| ·X2基因核仁定位信号的检测 | 第38-40页 |
| ·X2蛋白的表达引起细胞周期阻滞和凋亡的发生 | 第40-45页 |
| 第四部分 讨论 | 第45-48页 |
| ·蛋白质的核仁定位 | 第45页 |
| ·核仁定位蛋白的功能 | 第45-48页 |
| ·细胞周期调控 | 第46-47页 |
| ·细胞凋亡 | 第47-48页 |
| 第五部分 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
