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简单节杆菌生物转化17α-甲基睾丸素C1,2-脱氢制备美雄酮

1 前言第1-19页
   ·甾体化合物概述第8-9页
     ·甾体化合物的结构第8页
     ·甾体化合物的分类第8-9页
     ·甾体化合物的临床应用第9页
   ·甾体化合物的微生物转化第9-13页
     ·甾体化合物的微生物转化第9-10页
     ·甾体化合物微生物转化反应的特点第10-11页
     ·甾体化合物微生物转化反应的共性难题第11-13页
       ·甾体底物的溶解性第11-12页
       ·甾体底物与转化酶的有效接触第12-13页
   ·甾体化合物C_(1,2)-位微生物脱氢的研究进展第13-15页
     ·用于甾体化合物C_(1,2)位脱氢的微生物第13页
     ·甾体化合物C_(1,2)位脱氢的机理第13-14页
     ·甾体化合物C_(1,2)位脱氢的酶学性质第14-15页
   ·本论文研究的对象和主要内容第15-19页
     ·美雄酮的用途第15页
     ·微生物法制备美雄酮的开发前景第15-17页
     ·本论文的研究内容第17-19页
2 材料与方法第19-25页
   ·实验材料第19-21页
     ·试剂第19页
     ·实验仪器第19-20页
     ·实验菌种第20页
     ·培养基第20页
       ·斜面培养基第20页
       ·种子培养基第20页
       ·发酵培养基第20页
     ·发酵条件及转化条件第20-21页
       ·斜面培养第20页
       ·种子培养第20页
       ·发酵培养第20页
       ·转化条件第20-21页
   ·实验方法第21-25页
     ·菌种生长曲线的确定第21页
     ·底物17α-甲基睾丸素投料方法第21页
       ·干粉投料第21页
       ·溶解投料第21页
     ·提取、分离方法第21页
     ·生物量的测定第21-22页
       ·比浊法第21页
       ·细胞干重的测定第21页
       ·发酵液浊度与细胞干重的关系第21-22页
     ·C_(1,2)-位脱氢酶活力的测定第22页
       ·2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)显色法第22页
     ·17α-甲基睾丸素转化率的测定第22-23页
       ·薄层层析法(TLC)第22-23页
       ·高效液相色谱法(HPLC)第23页
     ·催化细胞的制备第23-24页
     ·底物的溶解度试验第24-25页
3 结果与讨论第25-50页
   ·优良菌株的选育第25-28页
     ·保藏菌株的17α-甲基睾丸素脱氢性能研究第25页
     ·菌株的分离与纯化第25-27页
     ·菌株31—2—50的形态特征第27-28页
   ·摇瓶发酵条件的优化第28-41页
     ·摇瓶发酵条件的优化第28-36页
       ·适宜斜面培养时间的确定第28页
       ·斜面冻藏时间对转化率的影响第28页
       ·接种量对转化的影响第28-29页
       ·pH值对转化的影响第29-30页
       ·摇瓶发酵培养基组成及配比的单因素试验第30-34页
       ·最佳培养基组成和配比的确定第34-35页
       ·最佳培养基的验证实验第35-36页
     ·摇瓶转化条件的研究第36-40页
       ·摇床转速对去氢甲基睾丸素转化的影响第36-37页
       ·投料方法与去氢甲基睾丸素转化率的关系第37-39页
       ·底物投料浓度对转化的影响第39-40页
     ·回收底物再转化实验第40-41页
       ·回收底物再转化第40页
       ·产物浓度对转化的影响第40-41页
   ·7L发酵罐放大实验第41-43页
     ·正批底物7L发酵罐发酵过程第41-42页
     ·回收底物7L发酵罐放大发酵过程第42-43页
   ·发酵液后处理工序的研究第43-45页
     ·去氢甲基睾丸素的提取、分离方法第43-44页
     ·去氢甲基睾丸素生产工艺流程第44页
     ·产物去氢甲基睾丸素结构与质量测定第44-45页
   ·两相系统中生物催化17α-甲基睾丸素Δ~(1,2)-脱氢的初步研究第45-50页
     ·有机溶剂及催化细胞的选择第45-47页
     ·表面活性剂浓度的影响第47-48页
     ·甲萘醌浓度的影响第48页
     ·细胞浓度的影响第48-49页
     ·两相系统中动力学的初步探索第49-50页
4 结论第50-52页
5 展望第52-53页
参考文献第53-57页
致谢第57-58页
论文发表情况第58-59页
附录Ⅰ 美雄酮的核磁共振谱图(氢谱)第59-60页
附录Ⅱ 美雄酮的核磁共振谱图(碳谱)第60页

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