中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-11页 |
1 绪论 | 第11-20页 |
1.1 引言 | 第11页 |
1.2 铁皮石斛资源概况 | 第11-12页 |
1.3 铁皮石斛药用成分的分离及其药理药效研究 | 第12-13页 |
1.3.1 铁皮石斛的化学成分 | 第12页 |
1.3.2 铁皮石斛的药理药效 | 第12-13页 |
1.4 影响石斛代谢的因素 | 第13-14页 |
1.4.1 植物生长调节剂对石斛药用化学成分含量的影响 | 第13页 |
1.4.2 环境因子对铁皮石斛药用化学成分含量的影响 | 第13-14页 |
1.5 应力刺激对植物代谢的影响 | 第14-15页 |
1.5.1 物理刺激对植物代谢的影响 | 第14-15页 |
1.5.2 环境因素对植物代谢的影响 | 第15页 |
1.6 应力刺激下植物的特异基因表达及其代谢的基因调控 | 第15-17页 |
1.6.1 应力刺激下植物基因表达 | 第15-16页 |
1.6.2 植物代谢的基因调控 | 第16-17页 |
1.7 本文的主要工作 | 第17页 |
1.7.1 应力加载的模式 | 第17页 |
1.7.2 应力刺激对铁皮石斛代谢的影响 | 第17页 |
1.7.3 应力刺激下铁皮石斛特异表达基因的筛选 | 第17页 |
1.8 本文的研究目的及意义 | 第17-18页 |
1.9 课题的研究思路与构想 | 第18页 |
1.10 课题的创新之处 | 第18-20页 |
2 实验材料的培养及声波加载实验模型的建立 | 第20-23页 |
2.1 引言 | 第20页 |
2.2 实验材料的培养 | 第20-21页 |
2.2.1 取材 | 第20页 |
2.2.2 培养基的配制 | 第20-21页 |
2.2.3 铁皮石斛原球茎的培养 | 第21页 |
2.2.4 铁皮石斛幼苗的培养 | 第21页 |
2.3 加载方式的选择 | 第21-23页 |
2.3.1 实验加载装置 | 第21-22页 |
2.3.2 实验材料处理 | 第22-23页 |
3 声波刺激对铁皮石斛药用成分含量的影响 | 第23-32页 |
3.1 引言 | 第23页 |
3.2 材料与方法 | 第23-26页 |
3.2.1 材料 | 第23页 |
3.2.2 仪器与试剂 | 第23页 |
3.2.3 多糖的提取精制 | 第23-24页 |
3.2.4 铁皮石斛多糖的提取和含量测定 | 第24-25页 |
3.2.5 铁皮石斛总生物碱的提取和含量测定 | 第25页 |
3.2.6 光合速率的测定 | 第25-26页 |
3.2.7 呼吸速率的测定 | 第26页 |
3.3 结果 | 第26-30页 |
3.3.1 声波刺激对铁皮石斛多糖含量的影响 | 第26-27页 |
3.3.2 声波刺激对铁皮石斛总生物碱含量的影响 | 第27-29页 |
3.3.3 声波对铁皮石斛苗光合速率和呼吸速率的影响 | 第29-30页 |
3.4 讨论 | 第30-32页 |
3.4.1 测定方法考察 | 第30页 |
3.4.2 声波刺激对铁皮石斛多糖代谢的影响 | 第30-32页 |
4 铁皮石斛总RNA提取和分析 | 第32-38页 |
4.1 引言 | 第32页 |
4.2 实验材料和方法 | 第32-33页 |
4.2.1 总RNA的提取流程 | 第32页 |
4.2.2 总RNA的提取流程 | 第32-33页 |
4.3 总RNA质量和完整性测定 | 第33-34页 |
4.3.1 分光光度法测定RNA质量和纯度 | 第33-34页 |
4.3.2 RNA完整性鉴定 | 第34页 |
4.4 实验结果 | 第34-36页 |
4.4.1 声波刺激组和对照组铁皮石斛总RNA质量 | 第34页 |
4.4.2 声波刺激组和对照组铁皮石斛总RNA纯度 | 第34-35页 |
4.4.3 声波刺激组和对照组铁皮石斛总RNA完整性 | 第35-36页 |
4.5 讨论 | 第36-38页 |
4.5.1 富含多糖物质中总RNA的提取 | 第36页 |
4.5.2 声波刺激对铁皮石斛中总RNA含量的影响 | 第36-38页 |
5 声波刺激下铁皮石斛的差异基因表达 | 第38-47页 |
5.1 引言 | 第38页 |
5.2 材料与方法 | 第38-42页 |
5.2.1 材料 | 第38-39页 |
5.2.2 引物 | 第39页 |
5.2.3 反转录RNA | 第39页 |
5.2.4 PCR扩增 | 第39-40页 |
5.2.5 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第40-41页 |
5.2.6 银染 | 第41页 |
5.2.7 差异条带的回收 | 第41页 |
5.2.8 差异条带的重扩增 | 第41页 |
5.2.9 重扩增产物的电泳 | 第41-42页 |
5.2.10 重扩增产物的回收和纯化 | 第42页 |
5.2.11 Northern Blot杂交 | 第42页 |
5.3 结果与分析 | 第42-45页 |
5.3.1 差异基因的凝胶筛选结果 | 第42-44页 |
5.3.2 回收差异条带及重扩增 | 第44-45页 |
5.3.3 Northern Blot杂交 | 第45页 |
5.4 讨论 | 第45-47页 |
5.4.1 声波应力与铁皮石斛特异表达基因 | 第45-46页 |
5.4.2 Northern Blot杂交中值得注意的问题 | 第46-47页 |
6 应力-代谢关系模型的初步建立及其探讨 | 第47-51页 |
6.1 引言 | 第47页 |
6.2 应力-代谢关系模型的初步建立 | 第47页 |
6.3 应力-代谢关系的初步探讨 | 第47-51页 |
6.3.1 应力刺激的物理学效应对代谢的影响 | 第47-48页 |
6.3.2 应力刺激的生物学效应对代谢的影响 | 第48-49页 |
6.3.3 声波的生物学效应对植物代谢的影响 | 第49-51页 |
7 结论 | 第51-52页 |
7.1 全文的主要结论 | 第51页 |
7.1.1 声波刺激对铁皮石斛代谢的影响 | 第51页 |
7.1.2 声波刺激下铁皮石斛代谢调控基因的表达 | 第51页 |
7.2 后续工作建议 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
附录1 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第58页 |
附录2 作者在攻读硕士学位期间参加科研项目 | 第58-59页 |
附录3 英汉对照表 | 第59-60页 |