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应力刺激对铁皮石斛药用成分含量的影响及其特异基因的初步研究

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-11页
1 绪论第11-20页
 1.1 引言第11页
 1.2 铁皮石斛资源概况第11-12页
 1.3 铁皮石斛药用成分的分离及其药理药效研究第12-13页
  1.3.1 铁皮石斛的化学成分第12页
  1.3.2 铁皮石斛的药理药效第12-13页
 1.4 影响石斛代谢的因素第13-14页
  1.4.1 植物生长调节剂对石斛药用化学成分含量的影响第13页
  1.4.2 环境因子对铁皮石斛药用化学成分含量的影响第13-14页
 1.5 应力刺激对植物代谢的影响第14-15页
  1.5.1 物理刺激对植物代谢的影响第14-15页
  1.5.2 环境因素对植物代谢的影响第15页
 1.6 应力刺激下植物的特异基因表达及其代谢的基因调控第15-17页
  1.6.1 应力刺激下植物基因表达第15-16页
  1.6.2 植物代谢的基因调控第16-17页
 1.7 本文的主要工作第17页
  1.7.1 应力加载的模式第17页
  1.7.2 应力刺激对铁皮石斛代谢的影响第17页
  1.7.3 应力刺激下铁皮石斛特异表达基因的筛选第17页
 1.8 本文的研究目的及意义第17-18页
 1.9 课题的研究思路与构想第18页
 1.10 课题的创新之处第18-20页
2 实验材料的培养及声波加载实验模型的建立第20-23页
 2.1 引言第20页
 2.2 实验材料的培养第20-21页
  2.2.1 取材第20页
  2.2.2 培养基的配制第20-21页
  2.2.3 铁皮石斛原球茎的培养第21页
  2.2.4 铁皮石斛幼苗的培养第21页
 2.3 加载方式的选择第21-23页
  2.3.1 实验加载装置第21-22页
  2.3.2 实验材料处理第22-23页
3 声波刺激对铁皮石斛药用成分含量的影响第23-32页
 3.1 引言第23页
 3.2 材料与方法第23-26页
  3.2.1 材料第23页
  3.2.2 仪器与试剂第23页
  3.2.3 多糖的提取精制第23-24页
  3.2.4 铁皮石斛多糖的提取和含量测定第24-25页
  3.2.5 铁皮石斛总生物碱的提取和含量测定第25页
  3.2.6 光合速率的测定第25-26页
  3.2.7 呼吸速率的测定第26页
 3.3 结果第26-30页
  3.3.1 声波刺激对铁皮石斛多糖含量的影响第26-27页
  3.3.2 声波刺激对铁皮石斛总生物碱含量的影响第27-29页
  3.3.3 声波对铁皮石斛苗光合速率和呼吸速率的影响第29-30页
 3.4 讨论第30-32页
  3.4.1 测定方法考察第30页
  3.4.2 声波刺激对铁皮石斛多糖代谢的影响第30-32页
4 铁皮石斛总RNA提取和分析第32-38页
 4.1 引言第32页
 4.2 实验材料和方法第32-33页
  4.2.1 总RNA的提取流程第32页
  4.2.2 总RNA的提取流程第32-33页
 4.3 总RNA质量和完整性测定第33-34页
  4.3.1 分光光度法测定RNA质量和纯度第33-34页
  4.3.2 RNA完整性鉴定第34页
 4.4 实验结果第34-36页
  4.4.1 声波刺激组和对照组铁皮石斛总RNA质量第34页
  4.4.2 声波刺激组和对照组铁皮石斛总RNA纯度第34-35页
  4.4.3 声波刺激组和对照组铁皮石斛总RNA完整性第35-36页
 4.5 讨论第36-38页
  4.5.1 富含多糖物质中总RNA的提取第36页
  4.5.2 声波刺激对铁皮石斛中总RNA含量的影响第36-38页
5 声波刺激下铁皮石斛的差异基因表达第38-47页
 5.1 引言第38页
 5.2 材料与方法第38-42页
  5.2.1 材料第38-39页
  5.2.2 引物第39页
  5.2.3 反转录RNA第39页
  5.2.4 PCR扩增第39-40页
  5.2.5 聚丙烯酰胺凝胶电泳第40-41页
  5.2.6 银染第41页
  5.2.7 差异条带的回收第41页
  5.2.8 差异条带的重扩增第41页
  5.2.9 重扩增产物的电泳第41-42页
  5.2.10 重扩增产物的回收和纯化第42页
  5.2.11 Northern Blot杂交第42页
 5.3 结果与分析第42-45页
  5.3.1 差异基因的凝胶筛选结果第42-44页
  5.3.2 回收差异条带及重扩增第44-45页
  5.3.3 Northern Blot杂交第45页
 5.4 讨论第45-47页
  5.4.1 声波应力与铁皮石斛特异表达基因第45-46页
  5.4.2 Northern Blot杂交中值得注意的问题第46-47页
6 应力-代谢关系模型的初步建立及其探讨第47-51页
 6.1 引言第47页
 6.2 应力-代谢关系模型的初步建立第47页
 6.3 应力-代谢关系的初步探讨第47-51页
  6.3.1 应力刺激的物理学效应对代谢的影响第47-48页
  6.3.2 应力刺激的生物学效应对代谢的影响第48-49页
  6.3.3 声波的生物学效应对植物代谢的影响第49-51页
7 结论第51-52页
 7.1 全文的主要结论第51页
  7.1.1 声波刺激对铁皮石斛代谢的影响第51页
  7.1.2 声波刺激下铁皮石斛代谢调控基因的表达第51页
 7.2 后续工作建议第51-52页
致谢第52-53页
参考文献第53-58页
附录1 作者在攻读硕士学位期间发表的论文第58页
附录2 作者在攻读硕士学位期间参加科研项目第58-59页
附录3 英汉对照表第59-60页

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