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棉花基因枪转化体系的建立

1 引言第1-21页
   ·植物转基因技术第9-12页
     ·植物遗传转化的发展第9-10页
     ·植物遗传转化的种类与新思路的研究第10-12页
   ·棉花基因工程的研究进展第12-20页
     ·农杆菌介导法的评价第12页
     ·基因枪介导法及其在棉花遗传转化中的应用第12-15页
     ·棉花的主要抗虫基因第15-20页
   ·立题依据第20-21页
2 材料和方法第21-32页
   ·材料第21-22页
     ·棉花品种第21页
     ·质粒第21页
     ·菌株第21页
     ·主要仪器第21-22页
   ·方法第22-32页
     ·培养基类型与配制第22页
     ·质粒DNA的微量提取第22-23页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化第23页
     ·质粒DNA的大量提取第23-24页
     ·DNA的琼脂糖凝胶电泳第24页
     ·棉花的茎尖培养和体细胞再生第24-26页
     ·转化方法第26-28页
     ·转化体系的建立第28-30页
     ·转基因植株的PCR检测第30-32页
3 结果与分析第32-49页
   ·基因枪和农杆菌结合转化法第32-33页
   ·棉花组织培养第33-35页
     ·棉花愈伤组织的诱导和分化第33页
     ·棉花胚性愈伤组织的继代分化第33-35页
   ·茎尖的培养第35-38页
     ·碳源对茎尖生长的影响第35-36页
     ·固化剂对茎尖生长的影响第36页
     ·不同品种茎尖的培养情况第36-37页
     ·活性炭对茎尖培养效果的影响第37页
     ·激素对茎尖培养效果的影响第37-38页
   ·基因枪转化棉花茎尖的研究第38-44页
     ·茎尖分生组织制备时间的优化第38页
     ·棉花茎尖对卡那霉素的反应第38-39页
     ·基因枪轰击后的恢复培养第39页
     ·卡那霉素抗性植株的筛选方式第39-40页
     ·基因枪轰击距离对转化率的影响第40页
     ·基因枪轰击次数对转化率的影响第40页
     ·抗性植株的获得第40-41页
     ·转化植株的PCR分析第41-42页
     ·茎尖筛选过程中非正常苗的表现第42-44页
   ·基因枪转化棉花胚性愈伤的研究第44-49页
     ·筛选剂对棉花胚性愈伤组织的作用第44-45页
     ·渗透处理方案的优化第45-46页
     ·真空度对GUS瞬间表达的影响第46页
     ·质粒DNA用量对GUS瞬间表达的影响第46页
     ·轰击距离对GUS瞬间表达的影响第46-47页
     ·轰击次数对GUS瞬间表达的影响第47页
     ·抗性胚状体的获得第47-48页
     ·GUS的稳定表达第48-49页
4 讨论第49-54页
   ·转化方法的评价第49页
   ·基因枪转化的受体材料第49-51页
     ·茎尖分生组织再生体系的建立与优化第50页
     ·棉花体细胞再生体系的建立与优化第50-51页
   ·以茎尖为受体的抗性植株的筛选方式第51-52页
   ·胚性愈伤的高渗处理对转化的影响第52页
   ·基因枪转化系统的优化第52-54页
5 结论第54-55页
参考文献第55-63页
附录第63-65页
致谢第65页

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