致谢 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
第一部分 文献综述 | 第11-35页 |
1 马铃薯Y病毒在烟草上的发生、危害及流行因素分析 | 第11-13页 |
·烟草PVY的发生、危害概况 | 第11-12页 |
·烟草PVY病毒病的流行因素 | 第12-13页 |
2 烟草PVY的生物学特性 | 第13-14页 |
3 植物病毒检测技术研究进展 | 第14-28页 |
·病毒的指示植物法(Diagnosing host method) | 第14页 |
·电子显微镜法(Electron microscope method) | 第14-15页 |
·血清学方法(Serology method) | 第15-19页 |
·酶联免疫吸附法(ELISA) | 第15-18页 |
·双抗体夹心法(Double antibody Sandwich,ELISA) | 第16-17页 |
·间接法(indirect ELISA) | 第17-18页 |
·点免疫吸附分析法(Dot Immunobinding Assay,DIBA) | 第18页 |
·其他免疫学方法 | 第18-19页 |
·分子生物学检测法(Molecule biology methord) | 第19-26页 |
·核酸分子杂交技术 | 第20-22页 |
·Southern杂交(Southern blot hybridization) | 第20-21页 |
·Northern杂交(Northern blot hybridization) | 第21页 |
·点杂交(Dot blot hybridization) | 第21-22页 |
·多聚酶链式反应(PCR) | 第22-25页 |
·RT-PCR(即逆转录PCR方法) | 第24-25页 |
·PCR微量板杂交法 | 第25页 |
·套式PCR(nested-PCR) | 第25页 |
·双链RNA电泳技术(double-stranded RNA) | 第25-26页 |
·其他方法 | 第26-28页 |
·免疫电镜法 | 第26-27页 |
·免疫捕获PCR(IC-PCR) | 第27-28页 |
4 烟草马铃薯Y病毒检测技术的研究 | 第28-35页 |
·指示植物法 | 第28-30页 |
·电镜技术 | 第30页 |
·以抗体为基础的免疫学方法 | 第30-33页 |
·以分子生物学技术为基础的PVY检测方法 | 第33-35页 |
引言 | 第35-37页 |
第二部分 河南省烟草马铃薯Y病毒的体外特性研究 | 第37-43页 |
1 材料和方法 | 第37-40页 |
·供试材料 | 第37页 |
·鉴别寄主种子来源 | 第37页 |
·病毒来源 | 第37页 |
·方法 | 第37-40页 |
·PVY病毒的分离纯化 | 第37页 |
·鉴别寄主的接种适期 | 第37-38页 |
·人工汁液摩擦接种 | 第38-39页 |
·河南省PVY体外特性研究方法 | 第39页 |
·稀释限点测定 | 第39页 |
·致死温度的测定 | 第39页 |
·体外存活期的测定 | 第39页 |
·PVY与CMV、TMV之间的相互作用试验 | 第39-40页 |
2 结果与分析 | 第40页 |
·河南省PVY的体外特性研究结果 | 第40页 |
·PVY与CMV、TMV之间的相互作用结果 | 第40页 |
3 结论与讨论 | 第40-43页 |
·结论 | 第40页 |
·讨论 | 第40-43页 |
第三部分 烟草马铃薯Y病毒的血清学检测技术研究及应用 | 第43-58页 |
1 材料和方法 | 第43-49页 |
·试验材料 | 第43页 |
·PVY抗血清来源 | 第43页 |
·主要供试仪器 | 第43页 |
·供试病毒 | 第43页 |
·供提纯用病毒 | 第43页 |
·其他供试病毒 | 第43页 |
·试验方法 | 第43-49页 |
·烟草马铃薯Y病毒提纯所需缓冲液的配制 | 第44页 |
·烟草马铃薯Y病毒的提纯及结果检测方法 | 第44-45页 |
·烟草马铃薯Y病毒提纯步骤 | 第44页 |
·烟草马铃薯Y病毒提纯结果的检测 | 第44-45页 |
1 )血清学检测 | 第44页 |
2 )紫外吸收光谱测定 | 第44-45页 |
·血清学检测技术 | 第45-47页 |
·烟草马铃薯Y病毒检测所需缓冲液的配制 | 第45页 |
·1.2.3.2抗原包被ELISA(ACP-ELISA,) | 第45-46页 |
·双抗体夹心法(DAS-ELISA) | 第46-47页 |
·血清学检测技术的研究 | 第47-48页 |
·两种检测方法对结果的影响 | 第47页 |
·样品不同稀释度对结果的影响 | 第47页 |
·样品不同孵育时间对结果的影响 | 第47-48页 |
·一抗不同孵育时间对结果的影响 | 第48页 |
·二抗不同孵育时间对结果的影响 | 第48页 |
·血清学检测技术的应用 | 第48-49页 |
·河南省主要烟区PVY的分布危害情况 | 第48页 |
·病株上采收的种子带毒情况 | 第48页 |
·田间及田边作物和杂草带毒情况 | 第48页 |
·病残体中病毒的存活力 | 第48-49页 |
2 结果与分析 | 第49-55页 |
·烟草马铃薯Y病毒提纯结果 | 第49-51页 |
·血清学检测结果 | 第49页 |
·紫外吸收光谱测定结果 | 第49-51页 |
·血清学检测技术的研究结果 | 第51-52页 |
·两种ELISA检测方法的比较结果 | 第51页 |
·样品不同稀释度对结果的影响 | 第51-52页 |
·样品不同孵育时间对结果的影响 | 第52页 |
·一抗不同孵育时间对结果的影响 | 第52页 |
·二抗不同孵育时间对结果的影响 | 第52页 |
·血清学检测技术的应用 | 第52-55页 |
·河南省主要烟区PVY的分布危害情况 | 第52-55页 |
·病株上采收的种子带毒情况 | 第55页 |
·田间及田边作物和杂草带毒情况 | 第55页 |
·病残体中病毒的存活力 | 第55页 |
3 结论与讨论 | 第55-58页 |
·结论 | 第55-56页 |
·讨论 | 第56-58页 |
附录 | 第58-59页 |
附图片 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-68页 |
英文摘要 | 第68-69页 |