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河南省烟草马铃薯Y病毒体外特性及血清学检测技术的研究

致谢第1-9页
中文摘要第9-11页
第一部分 文献综述第11-35页
 1 马铃薯Y病毒在烟草上的发生、危害及流行因素分析第11-13页
   ·烟草PVY的发生、危害概况第11-12页
   ·烟草PVY病毒病的流行因素第12-13页
 2 烟草PVY的生物学特性第13-14页
 3 植物病毒检测技术研究进展第14-28页
   ·病毒的指示植物法(Diagnosing host method)第14页
   ·电子显微镜法(Electron microscope method)第14-15页
   ·血清学方法(Serology method)第15-19页
     ·酶联免疫吸附法(ELISA)第15-18页
       ·双抗体夹心法(Double antibody Sandwich,ELISA)第16-17页
       ·间接法(indirect ELISA)第17-18页
     ·点免疫吸附分析法(Dot Immunobinding Assay,DIBA)第18页
     ·其他免疫学方法第18-19页
   ·分子生物学检测法(Molecule biology methord)第19-26页
     ·核酸分子杂交技术第20-22页
       ·Southern杂交(Southern blot hybridization)第20-21页
       ·Northern杂交(Northern blot hybridization)第21页
       ·点杂交(Dot blot hybridization)第21-22页
     ·多聚酶链式反应(PCR)第22-25页
       ·RT-PCR(即逆转录PCR方法)第24-25页
       ·PCR微量板杂交法第25页
       ·套式PCR(nested-PCR)第25页
     ·双链RNA电泳技术(double-stranded RNA)第25-26页
   ·其他方法第26-28页
     ·免疫电镜法第26-27页
     ·免疫捕获PCR(IC-PCR)第27-28页
 4 烟草马铃薯Y病毒检测技术的研究第28-35页
   ·指示植物法第28-30页
   ·电镜技术第30页
   ·以抗体为基础的免疫学方法第30-33页
   ·以分子生物学技术为基础的PVY检测方法第33-35页
引言第35-37页
第二部分 河南省烟草马铃薯Y病毒的体外特性研究第37-43页
 1 材料和方法第37-40页
   ·供试材料第37页
     ·鉴别寄主种子来源第37页
     ·病毒来源第37页
   ·方法第37-40页
     ·PVY病毒的分离纯化第37页
     ·鉴别寄主的接种适期第37-38页
     ·人工汁液摩擦接种第38-39页
     ·河南省PVY体外特性研究方法第39页
       ·稀释限点测定第39页
       ·致死温度的测定第39页
       ·体外存活期的测定第39页
     ·PVY与CMV、TMV之间的相互作用试验第39-40页
 2 结果与分析第40页
   ·河南省PVY的体外特性研究结果第40页
   ·PVY与CMV、TMV之间的相互作用结果第40页
 3 结论与讨论第40-43页
   ·结论第40页
   ·讨论第40-43页
第三部分 烟草马铃薯Y病毒的血清学检测技术研究及应用第43-58页
 1 材料和方法第43-49页
   ·试验材料第43页
     ·PVY抗血清来源第43页
     ·主要供试仪器第43页
     ·供试病毒第43页
       ·供提纯用病毒第43页
       ·其他供试病毒第43页
   ·试验方法第43-49页
     ·烟草马铃薯Y病毒提纯所需缓冲液的配制第44页
     ·烟草马铃薯Y病毒的提纯及结果检测方法第44-45页
       ·烟草马铃薯Y病毒提纯步骤第44页
       ·烟草马铃薯Y病毒提纯结果的检测第44-45页
     1 )血清学检测第44页
     2 )紫外吸收光谱测定第44-45页
     ·血清学检测技术第45-47页
       ·烟草马铃薯Y病毒检测所需缓冲液的配制第45页
       ·1.2.3.2抗原包被ELISA(ACP-ELISA,)第45-46页
       ·双抗体夹心法(DAS-ELISA)第46-47页
     ·血清学检测技术的研究第47-48页
       ·两种检测方法对结果的影响第47页
       ·样品不同稀释度对结果的影响第47页
       ·样品不同孵育时间对结果的影响第47-48页
       ·一抗不同孵育时间对结果的影响第48页
       ·二抗不同孵育时间对结果的影响第48页
     ·血清学检测技术的应用第48-49页
       ·河南省主要烟区PVY的分布危害情况第48页
       ·病株上采收的种子带毒情况第48页
       ·田间及田边作物和杂草带毒情况第48页
       ·病残体中病毒的存活力第48-49页
 2 结果与分析第49-55页
   ·烟草马铃薯Y病毒提纯结果第49-51页
     ·血清学检测结果第49页
     ·紫外吸收光谱测定结果第49-51页
   ·血清学检测技术的研究结果第51-52页
     ·两种ELISA检测方法的比较结果第51页
     ·样品不同稀释度对结果的影响第51-52页
     ·样品不同孵育时间对结果的影响第52页
     ·一抗不同孵育时间对结果的影响第52页
     ·二抗不同孵育时间对结果的影响第52页
   ·血清学检测技术的应用第52-55页
     ·河南省主要烟区PVY的分布危害情况第52-55页
     ·病株上采收的种子带毒情况第55页
     ·田间及田边作物和杂草带毒情况第55页
     ·病残体中病毒的存活力第55页
 3 结论与讨论第55-58页
   ·结论第55-56页
   ·讨论第56-58页
附录第58-59页
附图片第59-61页
参考文献第61-68页
英文摘要第68-69页

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