缩略语表 | 第6-7页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
前言 | 第13-15页 |
文献回顾 | 第15-22页 |
第一部分 内皮细胞SIRT1及APOE基因双敲小鼠的构建 | 第22-36页 |
1 材料 | 第22-25页 |
1.1 实验动物 | 第22页 |
1.2 试剂和材料 | 第22-24页 |
1.3 仪器和设备 | 第24-25页 |
2 方法 | 第25-33页 |
2.1 小鼠剪鼠尾 | 第25页 |
2.2 消化鼠尾 | 第25页 |
2.3 提取鼠尾DNA | 第25-26页 |
2.4 SIRT1~(floxed/floxed)小鼠基因型鉴定 | 第26页 |
2.5 Tie2-Cre小鼠基因型鉴定 | 第26-27页 |
2.6 ApoE~(-/-)小鼠鉴定 | 第27-28页 |
2.7 电泳 | 第28页 |
2.8 SIRT1~(endo-/-)与ApoE~(-/-)双敲小鼠的构建及分组 | 第28-29页 |
2.9 内皮特异敲除SIRT1效率检测 | 第29-33页 |
2.10 数据分析 | 第33页 |
3 结果 | 第33-34页 |
3.1 PCR鉴定小鼠基因型 | 第33页 |
3.2 验证内皮上的SIRT1敲除效率 | 第33-34页 |
3.3 小鼠外观、行为、体重和血脂的分析 | 第34页 |
4 讨论 | 第34-36页 |
第二部分 白藜芦醇对小鼠动脉粥样硬化斑块内血管新生的影响 | 第36-47页 |
1 材料 | 第36-38页 |
1.1 实验动物 | 第36页 |
1.2 主要试剂和药品 | 第36-37页 |
1.3 主要仪器及设备 | 第37-38页 |
1.4 饲料 | 第38页 |
2 方法 | 第38-41页 |
2.1 动物模型分组及处理因素 | 第38页 |
2.2 观察小鼠状况 | 第38-39页 |
2.3 血液样本的采集 | 第39页 |
2.4 病理学检测 | 第39-41页 |
2.5 数据分析 | 第41页 |
3 结果 | 第41-45页 |
3.1 小鼠一般情况及血脂代谢情况 | 第41-43页 |
3.2 HE染色结果 | 第43页 |
3.3 免疫组化染色结果 | 第43-45页 |
4 讨论 | 第45-47页 |
第三部分 高浓度的白藜芦醇对于内皮细胞的作用机制探究 | 第47-58页 |
1 材料 | 第47-49页 |
1.1 试剂和材料 | 第47-49页 |
1.2 仪器和设备 | 第49页 |
2 方法 | 第49-52页 |
2.1 细胞培养 | 第49页 |
2.2 Annexin V-FITC法测内皮细胞凋亡 | 第49-50页 |
2.3 Transwell侵袭实验检测HUVECs迁移能力 | 第50页 |
2.4 Wound assay划痕实验检测HUVECs迁移能力 | 第50-51页 |
2.5 Western Blot检测目标蛋白变化情况,操作见第一部分实验 | 第51页 |
2.6 siRNA转染实验 | 第51-52页 |
2.7 数据分析 | 第52页 |
3 结果 | 第52-55页 |
3.1 不同浓度白藜芦醇对内皮细胞凋亡的影响 | 第52页 |
3.2 不同浓度白藜芦醇对内皮细胞迁移率的影响 | 第52-54页 |
3.3 低氧环境下,观察 SIRT1 及 HIF-1α在内皮细胞中的表达 | 第54-55页 |
3.4 高浓度白藜芦醇抑制内皮细胞相关信号通路 | 第55页 |
4 讨论 | 第55-58页 |
小结 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-68页 |
个人简历与研究成果 | 第68-70页 |
致谢 | 第70页 |