中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
缩略语及英汉对照 | 第10-11页 |
第一部分 文献综述 | 第11-29页 |
第一章 马铃薯抗病育种现状 | 第12-18页 |
1.1 抗病毒研究 | 第12-15页 |
1.1.1 现存植物抗源 | 第12-13页 |
1.1.1.1 马铃薯病毒抗性遗传 | 第12-13页 |
1.1.1.2 抗病毒基因的利用 | 第13页 |
1.1.2 创造新型抗病毒种质 | 第13-15页 |
1.1.2.1 诱发突变 | 第13-14页 |
1.1.2.2 基因工程技术 | 第14-15页 |
1.2 抗晚疫病研究 | 第15-17页 |
1.2.1 抗晚疫病基因定位 | 第15页 |
1.2.2 通过杂交培育抗晚疫病品系 | 第15-16页 |
1.2.3 通过细胞工程技术创造抗晚疫病品系 | 第16页 |
1.2.4 通过基因工程技术创造抗晚疫病品系 | 第16-17页 |
1.3 抗细菌病害研究 | 第17-18页 |
第二章 抗微生物肽Magainin及其衍生物MSI-99 | 第18-21页 |
2.1 Magainin及其抗病分子机制 | 第18-19页 |
2.2 Magainin及其衍生物MSI-99在植物基因工程中的应用 | 第19-21页 |
第三章 植物遗传转化方法 | 第21-28页 |
3.1 农杆菌介导的植物遗传转化 | 第21-24页 |
3.1.1 根癌农杆菌介导植物遗传转化机制 | 第21-22页 |
3.1.2 根癌农杆菌介导植物遗传转化方法 | 第22-23页 |
3.1.3 根癌农杆菌介导法在单子叶植物上的应用 | 第23-24页 |
3.1.4 Ri质粒介导的植物遗传转化 | 第24页 |
3.2 基因枪法 | 第24-25页 |
3.3 化学药剂诱导转化 | 第25页 |
3.4 花粉管通道法 | 第25-26页 |
3.5 电击法 | 第26页 |
3.6 脂质体转化法 | 第26页 |
3.7 低能离子束法 | 第26-27页 |
3.8 病毒载体转化 | 第27-28页 |
第四章 研究目的与意义 | 第28-29页 |
4.1 目的 | 第28页 |
4.2 意义 | 第28-29页 |
第二部分 研究报告 | 第29-57页 |
第五章 材料与方法 | 第30-41页 |
5.1 材料 | 第30-31页 |
5.2 试验方法 | 第31-41页 |
5.2.1 马铃薯再生体系的筛选 | 第31-32页 |
5.2.2 卡那霉素选择压力的确定 | 第32-33页 |
5.2.2.1 对愈伤形成的选择压力 | 第32-33页 |
5.2.2.2 对生根的选择压力 | 第33页 |
5.2.3 细菌细胞的转化及质粒的扩增、提取与酶切检测 | 第33-36页 |
5.2.3.1 DH5α感受态细胞的制备 | 第33页 |
5.2.3.2 大肠杆菌的转化 | 第33页 |
5.2.3.3 大肠杆菌质粒的微量提取与鉴定(碱法) | 第33-34页 |
5.2.3.4 质粒的大量提取 | 第34-35页 |
5.2.3.5 农杆菌LBA4404的电转化 | 第35页 |
5.2.3.6 农杆菌质粒DNA提取与鉴定 | 第35-36页 |
5.2.4 马铃薯的转化及转化体的筛选 | 第36-37页 |
5.2.5 马铃薯基因组DNA的简易提取与PCR检测 | 第37页 |
5.2.6 PCR阳性再生植株的Southern blot分析 | 第37-40页 |
5.2.6.1 马铃薯基因组DNA大量提取 | 第37-38页 |
5.2.6.2 马铃薯基因组DNA的酶切及转膜 | 第38-39页 |
5.2.6.3 Southern杂交 | 第39-40页 |
5.2.7 转化植株的移栽及微型薯的收获 | 第40-41页 |
第六章 结果分析 | 第41-52页 |
6.1 马铃薯再生体系的筛选 | 第41-44页 |
6.1.1 叶片再生培养基 | 第41-42页 |
6.1.2 茎节间切段再生培养基 | 第42-43页 |
6.1.3 块茎切片再生培养基 | 第43-44页 |
6.2 培养基中卡那霉素的适合浓度 | 第44-45页 |
6.2.1 愈伤诱导过程中卡那霉素适合浓度 | 第44页 |
6.2.2 生根过程中卡那霉素适合筛选浓度 | 第44-45页 |
6.3 细菌转化与质粒检测 | 第45-46页 |
6.4 外植体的转化与植株再生 | 第46页 |
6.5 再生植株MSI-99基因的PCR检测 | 第46-47页 |
6.6 PCR阳性植株的Southern blot分析 | 第47-48页 |
6.7 转基因植株的移栽及微型薯的收获 | 第48-52页 |
第七章 讨论 | 第52-57页 |
7.1 培养基中的激素效应 | 第52页 |
7.2 基因型效应 | 第52页 |
7.3 外植体效应 | 第52-53页 |
7.4 抗生素对转化的影响 | 第53-54页 |
7.5 农杆菌与外植体的共培养 | 第54-55页 |
7.6 再生率与转化率 | 第55-56页 |
7.7 转基因植株表型变异 | 第56-57页 |
全文结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-66页 |
附录Ⅰ:培养基基本成份 | 第66-68页 |
附录Ⅱ:试剂 | 第68-69页 |
附录Ⅲ:试验数据 | 第69-71页 |
致谢 | 第71页 |