| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-23页 |
| ·HSP 的发现 | 第12页 |
| ·热激蛋白的分类及各家族成员及组成特点 | 第12-15页 |
| ·HSP100 家族 | 第12-13页 |
| ·HSP90 家族 | 第13页 |
| ·HSP70 家族 | 第13页 |
| ·HSP60 家族 | 第13-14页 |
| ·HSP40 家族 | 第14页 |
| ·sHsp 家族 | 第14-15页 |
| ·HSP 在生物体中的表达研究 | 第15-17页 |
| ·HSP 在植物中的表达 | 第15-16页 |
| ·HSP 在动物中的表达 | 第16-17页 |
| ·HSP 作用机理、生理功能及其基因的表达调控 | 第17-19页 |
| ·作用机理及其生理功能 | 第17-18页 |
| ·HSP 基因转录及表达调控 | 第18-19页 |
| ·HSP 与生物进化 | 第19-20页 |
| ·HSP 体外表达研究 | 第20-23页 |
| 第二章 家蚕低分子量热激蛋白信息分析 | 第23-33页 |
| ·数据来源及分析方法 | 第23-24页 |
| ·分析结果 | 第24-31页 |
| ·家蚕低分子量热激蛋白数目、核酸结构及预测蛋白分子量 | 第24页 |
| ·家蚕低分子量热激蛋白氨基酸二级结构 | 第24-26页 |
| ·家蚕低分子量热激蛋白保守区的相似性及其系统学分析 | 第26-30页 |
| ·家蚕基因的串联重复现象 | 第30页 |
| ·家蚕低分子量热激蛋白基因表达及其在组织、器官中的分布 | 第30-31页 |
| ·小结 | 第31-33页 |
| 第三章 家蚕低分子量热激蛋白基因HSP20.8的克隆表达 | 第33-62页 |
| ·试验材料、仪器及试剂 | 第33-34页 |
| ·供试试验材料 | 第34页 |
| ·供试仪器 | 第34页 |
| ·供试试剂 | 第34页 |
| ·克隆所用试剂 | 第34页 |
| ·测序所用试剂 | 第34页 |
| ·结果与分析 | 第34-60页 |
| ·家蚕基因组的提取 | 第35-37页 |
| ·试剂配制 | 第35页 |
| ·家蚕后部丝腺取材 | 第35页 |
| ·利用抽提缓冲液提取家蚕基因组 DNA | 第35-36页 |
| ·斑迹抽提液提取家蚕基因组 DNA | 第36-37页 |
| ·引物设计 | 第37-38页 |
| ·家蚕基因组特异引物扩增 | 第38-40页 |
| ·家蚕 HSP20.8A 的测序载体克隆与鉴定 | 第40-46页 |
| ·感受态细菌制备 | 第40页 |
| ·感受态细菌效率检测 | 第40-41页 |
| ·HSP20.8A 基因与 pGEM? Teasy 载体连接 | 第41页 |
| ·质粒转化与培养 | 第41页 |
| ·质粒 DNA 的提取 | 第41-43页 |
| ·重组 pGEM?T Easy 载体 PCR 扩增鉴定 | 第43-44页 |
| ·重组质粒酶切鉴定 | 第44-45页 |
| ·重组 pGEM?T Easy 质粒测序 | 第45-46页 |
| ·重组测序载体永久保存 | 第46页 |
| ·重组转移载体的构建与鉴定 | 第46-49页 |
| ·测序载体与转移载体酶切与酶切片段回收 | 第46-47页 |
| ·HSP20.8A 及转移载体 pBacPAK8 酶切片段的连接 | 第47页 |
| ·连接载体转化与培养 | 第47-48页 |
| ·重组 pBacPAK8 转化菌落培养 | 第48页 |
| ·重组 pBacPAK8 质粒提取 | 第48页 |
| ·质粒鉴定 | 第48-49页 |
| ·细胞的培养 | 第49-51页 |
| ·细胞基本培养基的配制 | 第49-50页 |
| ·细胞复苏 | 第50页 |
| ·单层细胞的培养 | 第50页 |
| ·细胞活力鉴定(台盼蓝染色法) | 第50-51页 |
| ·细胞冷藏 | 第51页 |
| ·细胞转染 | 第51-60页 |
| ·空斑鉴定预实验 | 第52-53页 |
| ·重组 pBacPAK8 载体与线性化杆状病毒共感染草地贪夜蛾细胞 | 第53-56页 |
| ·重组杆状病毒 DNA 提取 | 第56-57页 |
| ·重组杆状病毒电泳检测及 PCR 扩增检测 | 第57页 |
| ·重组蛋白检测 | 第57-60页 |
| ·电泳槽的安装 | 第57页 |
| ·分离胶的配制 | 第57-58页 |
| ·压缩胶配制 | 第58页 |
| ·电泳缓冲液配制(10*) | 第58页 |
| ·样品变性剂(3*) | 第58-59页 |
| ·蛋白质 marker 及样品的变性处理 | 第59页 |
| ·上样与电泳 | 第59页 |
| ·硝酸银染色 | 第59-60页 |
| ·小结 | 第60-62页 |
| 第四章 家蚕 HSP20.8A 的染色体荧光原位杂交 | 第62-71页 |
| ·材料及方法 | 第62页 |
| ·试验过程 | 第62-68页 |
| ·家蚕染色体制备 | 第62页 |
| ·探针的制备 | 第62-66页 |
| ·探针的随机标记 | 第62-63页 |
| ·乙醇沉淀法回收探针 | 第63-64页 |
| ·效率检测 | 第64-66页 |
| ·所用试剂及配制 | 第64页 |
| ·标记探针的梯度稀释 | 第64-65页 |
| ·标记效率免疫检测 | 第65-66页 |
| ·荧光原位杂交 | 第66-68页 |
| ·试剂配制 | 第66-67页 |
| ·染色体及探针的处理 | 第67页 |
| ·杂交 | 第67页 |
| ·杂交后处理 | 第67页 |
| ·抗体结合及负染 | 第67-68页 |
| ·小结 | 第68-71页 |
| 第 五章 讨论 | 第71-74页 |
| ·低分子量热激蛋白信息分析 | 第71-72页 |
| ·家蚕功能基因克隆 | 第72-73页 |
| ·家蚕染色体荧光原位杂交 | 第73-74页 |
| 第六章 结论 | 第74-77页 |
| ·家蚕低分子量热激蛋白的数量及基因结构 | 第74页 |
| ·串联重复现象 | 第74页 |
| ·基因表达 EST 证据 | 第74-75页 |
| ·低分子量热激蛋白系统进化分析 | 第75页 |
| ·低分子量热激蛋白 HSP20.8A 的克隆与表达 | 第75-76页 |
| ·HSP20.8A 染色体荧光原位杂交 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-94页 |
| 英文摘要 | 第94-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 攻读学位期间发表文章 | 第98页 |
