| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-15页 |
| 第一部分：MEKK2参与T细胞受体信号中JNK激活和IL-2基因表达 | 第15-32页 |
| 一、前言 | 第15页 |
| 二、材料和方法 | 第15-22页 |
| 1.质粒、蛋白和抗体 | 第15-16页 |
| 2.Northern杂交 | 第16页 |
| 3.细胞培养和转染 | 第16-17页 |
| 4.体外激酶JNK和MEKK2活性测定 | 第17-20页 |
| 免疫沉淀法检测JNK激酶活性 | 第17-18页 |
| 免疫沉淀法检测MEKK2激酶活性 | 第18-20页 |
| 5.荧光酶报告基因检测 | 第20-21页 |
| 6.蛋白印迹 | 第21-22页 |
| 三、结果 | 第22-26页 |
| 1.T细胞中MEKK2激活JNK级联 | 第22-23页 |
| 2.MEKK2参与转导T细胞TCR／CD3信号 | 第23-24页 |
| 3.抗CD3抗体刺激时MEKK2的酪氨酸磷酸化 | 第24-25页 |
| 4.T细胞共刺激中JNK激活和IL-2基因表达需要MEKK2参与 | 第25-26页 |
| 四、讨论 | 第26-27页 |
| 五、小结 | 第27-28页 |
| 参考文献 | 第28-32页 |
| 第二部分：小鼠MEKK2基因损毁揭示其在T细胞受体信号转导中起特殊调制作用 | 第32-66页 |
| 一、前言 | 第32-33页 |
| 二、材料和方法 | 第33-43页 |
| 1.基因打靶制备MEKK2缺陷小鼠 | 第33页 |
| 2.免疫沉淀和蛋白印迹方法分析 | 第33-37页 |
| 3.T细胞制备和纯化 | 第37页 |
| 4.流式仪分析T细胞和B细胞亚群 | 第37-38页 |
| 5.细胞增值检测 | 第38页 |
| 6.ELISA测定细胞因子 | 第38-39页 |
| 7.体内胸腺细胞死亡检测 | 第39页 |
| 8.体外细胞凋亡检测 | 第39-40页 |
| 9.免疫印迹法检测磷酸化JNK、ERK和p38 | 第40-42页 |
| 10.洗脱和再杂交检测JNK、ERK和p38蛋白 | 第42-43页 |
| 三、结果 | 第43-59页 |
| 1.同源重组损坏MEKK2基因及表达 | 第43-44页 |
| 2.MEKK2突变型小鼠表型 | 第44-46页 |
| 3.MEKK2的损坏不改变正常的T细胞、B细胞发展 | 第46-48页 |
| 4.MEKK2缺陷T细胞在抗CD3单抗刺激时增殖显著 | 第48-49页 |
| 5.MEKK2缺陷型T细胞细胞因子表达的改变 | 第49-51页 |
| 6.MEKK2保护胸腺细胞抵抗激活诱导细胞死亡的作用 | 第51-57页 |
| 1.抗CD3抗体体内诱导胸腺细胞凋亡 | 第51-52页 |
| 2.培养条件下胸腺细胞的自发凋亡 | 第52-53页 |
| 3.抗CD3抗体体外诱导胸腺细胞凋亡 | 第53-54页 |
| 4.UV诱导胸腺细胞凋亡 | 第54页 |
| 5.抗Fas抗体诱导胸腺细胞凋亡 | 第54-56页 |
| 6.Dex诱导的胸腺细胞凋亡 | 第56-57页 |
| 7.MEKK2损坏不阻断TCR介导的JNK、ERK和p38的激活 | 第57-59页 |
| 四、讨论 | 第59-61页 |
| 五、小结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| 第三部分：激素对人肺成纤维细胞MAPK信号传导途径的作用 | 第66-80页 |
| 一、前言 | 第66页 |
| 二、材料和方法 | 第66-68页 |
| 1.仪器和试剂 | 第66-67页 |
| 2.细胞培养和处理 | 第67页 |
| 3.细胞增殖试验 | 第67页 |
| 4.流式细胞仪分析细胞周期 | 第67页 |
| 5.蛋白印迹检测JNK、ERK和p38蛋白的磷酸化 | 第67页 |
| 6.膜抗体洗脱再杂交 | 第67-68页 |
| 7.蛋白印迹检测JNK、ERK和p38 | 第68页 |
| 三、结果 | 第68-73页 |
| 1.地塞米松抑制肺成纤维细胞增殖 | 第68-69页 |
| 2.地塞米松阻断肺成纤维细胞的细胞周期 | 第69-70页 |
| 3.激素对JNK的作用 | 第70-71页 |
| 4.激素对ERK的作用 | 第71-72页 |
| 5.激素对p38的作用 | 第72-73页 |
| 四、讨论 | 第73-74页 |
| 五、小结 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-80页 |
| 综述一：丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)级联及其作用机制 | 第80-114页 |
| 一、引言 | 第80页 |
| 二、MAPK途径的发现 | 第80-81页 |
| 三、MAPK途径基本特点 | 第81-83页 |
| 1.三酶级联反应 | 第81-82页 |
| 2.MAPK的双磷酸化激活 | 第82-83页 |
| 四、ERK MAPK级联 | 第83-88页 |
| 1.激活因素 | 第83-85页 |
| 2.三酶模体构成 | 第85-86页 |
| 3.作用底物 | 第86页 |
| 4.途径功能 | 第86-87页 |
| 5.ERK途径的调节 | 第87-88页 |
| 五、JNK MAPK级联 | 第88-91页 |
| 1.激活因素 | 第88-89页 |
| 2.三酶模体构成 | 第89-90页 |
| 3.作用底物 | 第90-91页 |
| 4.途径功能 | 第91页 |
| 六、P38 MAPK级联 | 第91-94页 |
| 1.激活因素 | 第92页 |
| 2.三酶模体构成 | 第92-93页 |
| 3.作用底物 | 第93-94页 |
| 4.途径功能 | 第94页 |
| 七、MAPK对基因表达的调控 | 第94-96页 |
| 八、MAPK途径特异性的实现 | 第96-99页 |
| 1.酶—底物相互作用 | 第96-97页 |
| 2.分子平台 | 第97-98页 |
| 3.胞内作用的空间位置 | 第98-99页 |
| 4.胞内作用的时间顺序 | 第99页 |
| 5.信号的交叉与整合 | 第99页 |
| 九、MAPK和淋巴细胞的激活 | 第99-100页 |
| 十、结语 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-114页 |
| 综述二：核受体和辅调因子对基因表达的组合调控——核受体和辅调因子的相互作用 | 第114-123页 |
| 一、核受体超家族的基本结构 | 第114-115页 |
| 二、核受体的激活功能区 | 第115页 |
| 三、核受体辅激活子 | 第115-117页 |
| 四、几种辅激活子与核受体的作用 | 第117-118页 |
| 1.雄激素受体相关蛋白70 | 第117页 |
| 2.中性粒细胞募集抑制因子3 | 第117页 |
| 3.CBP/p300相互作用转激活子 | 第117-118页 |
| 4.选择性雌激素受体调制子 | 第118页 |
| 五、核受体辅阻遏子 | 第118-119页 |
| 六、几种辅阻遏子与核受体的相互作用 | 第119-120页 |
| 1.SMRT与RXR的作用 | 第119页 |
| 2.过氧化体增殖子激活受体δ | 第119-120页 |
| 3.雌激素受体活性阻遏子 | 第120页 |
| 参考文献 | 第120-123页 |
| 缩略语表 | 第123-126页 |
| 致谢 | 第126-127页 |
