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光合细菌金色蓝素基因的克隆和异源表达

致谢第1-6页
摘要第6-7页
ABSTRACT第7-10页
第一章 前言第10-27页
 1第10-19页
   ·光合作用过程概述第10-11页
   ·光合细菌分类第11页
   ·反应中心复合体和电子传递途径第11-13页
   ·丝状不放氧光合生物的研究进展第13-15页
   ·光合细菌Chloroyflexus aurantiacus研究进展第15-17页
   ·光合细菌Roseiflexus castenholzii研究进展第17-19页
 2 Auracyanins(金色蓝素)研究进展第19-25页
   ·Chloroflexus aurantiacus中的Auracyanin研究状况第19-22页
     ·Auracyanin B的结构特征第21-22页
     ·Auracyanin B的N端结构的功能假设第22页
     ·Auracyanin B的光谱特征第22页
   ·Auracyanin蛋白质的氧化还原特性第22页
   ·Auracyanin可能的功能第22-23页
   ·Auracyanin的进化意义第23页
   ·Roseiflexus castenholzii中的Auracyanin研究状况第23-25页
   ·Cupredoxins蛋白质研究进展第25页
 3 FAPs的光合作用电子传递链可能的工作原理第25-26页
 4 选题背景和意义第26-27页
第二章 可溶性Auracyanin的克隆与表达第27-46页
   ·材料与方法第27-37页
     ·菌株和质粒第27页
     ·培养基第27-28页
     ·主要生化和分子生物学试剂第28页
     ·主要仪器和设备第28-29页
     ·引物设计第29页
     ·Roseiflexus castenholzii DSM 13941细菌总DNA的提取第29-30页
     ·PCR反应第30页
     ·质粒pPAL7的提取第30-31页
     ·琼脂糖凝胶电泳第31页
     ·割胶回收DNA片段第31-32页
     ·重组克隆质粒pEASY-T1-bcd2的构建第32-34页
     ·重组表达质粒pPAL7-bcd2的构建第34-35页
     ·质粒pEASY-T1-bcd2测序第35页
     ·BCD 2基因在大肠杆菌中的诱导表达第35页
     ·异源表达的Auracyanin可溶区的蛋白质含量测定第35-36页
     ·异源表达的Auracyanin可溶区的纯化第36页
     ·Tricine-SDS-PAGE分析第36-37页
   ·结果与分析第37-45页
     ·Roseiflexus castenholzii DSM 13941总DNA的提取第37页
     ·PCR克隆的可溶性Auracyanin基因片段第37-38页
     ·pEASY-T1-bcd2测序结果第38-40页
     ·重组质粒pEASY-T1-bcd2和pPAL7-bcd2的构建第40-41页
     ·pPAL7-bcd2测序结果第41-44页
     ·Tricine-SDS-PAGE蛋白电泳分析第44-45页
     ·多克隆抗体的制备第45页
   ·本章小结第45-46页
第三章 全长Auracyanin的克隆与表达第46-57页
   ·材料与方法第46-50页
     ·菌株和质粒第46页
     ·培养基第46-47页
     ·主要生化和分子生物学试剂第47页
     ·主要仪器和设备第47页
     ·引物设计第47页
     ·液体培养第47页
     ·Roseiflexus castenholzii菌总DNA提取第47页
     ·PCR克隆Auracyanin的DNA片段第47-48页
     ·质粒pPAL7的提取第48页
     ·琼脂糖凝胶电泳第48页
     ·割胶回收DNA片段第48页
     ·重组质粒pPAL7-bcd的构建第48-49页
     ·BCD在大肠杆菌BL21(DE3)中表达第49-50页
     ·异源表达的Auracyaniti的蛋白质含量测定第50页
     ·异源表达的全长Auracyanin的层析纯化第50页
     ·Tricine-SDS-PAGE分析第50页
     ·Auracyanin的初级结构比较第50页
   ·结果与分析第50-56页
     ·PCR克隆BCD的基因片段第50-51页
     ·重组质粒pPAL7-bcd的构建第51-54页
     ·Tricine-SDS-PAGE蛋白电泳分析第54-55页
     ·吸收光谱分析第55页
     ·进化树分析第55-56页
   ·本章小结第56-57页
第四章 Auracyanin互作蛋白的分离第57-72页
   ·材料与方法第57-61页
     ·菌株和生长第57页
     ·仪器第57-58页
     ·试剂的配置第58-59页
     ·光合膜蛋白复合物的分离纯化方法第59页
     ·高效液相色谱纯化蛋白质第59-61页
     ·浓缩样品溶液第61页
     ·紫外分光光度计测量过柱后样品的吸收值第61页
     ·切胶回收蛋白质第61页
     ·MALDI-TOF分析和数据检索第61页
   ·结果与分析第61-71页
     ·初步分析过程:第一次离子交换柱第61-62页
     ·第二次离子交换柱第62-71页
   ·本章小结第71-72页
参考文献第72-74页

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