中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
第一章 前言综述 | 第11-30页 |
1. 杆状病毒简介 | 第11-16页 |
1.1. 杆状病毒的基础研究 | 第11-13页 |
1.2. 杆状病毒的应用研究 | 第13-16页 |
2. 甜菜夜蛾核多角体病毒的研究进展 | 第16-19页 |
2.1. 甜菜夜蛾核多角体病毒的基因组结构 | 第16-18页 |
2.2. 甜菜夜蛾核多角体病毒作为病毒杀虫剂的应用 | 第18-19页 |
3. 泛素系统 | 第19-25页 |
3.1. 泛素蛋白酶水解系统 | 第19-20页 |
3.2. 泛素连接酶E | 第20-23页 |
3.3. 泛素系统调控的细胞过程 | 第23-25页 |
参考文献 | 第25-30页 |
第二章 甜菜夜蛾核多角体病毒泛素基因的克隆及原核表达 | 第30-38页 |
1. 材料和方法 | 第31-32页 |
1.1. 病毒株菌株和质粒 | 第31页 |
1.2. 病毒的提纯和DNA的提取 | 第31页 |
1.3. PCR引物设计 | 第31页 |
1.4. 聚合链反应(PCR) | 第31页 |
1.5. PCR产物的克隆和鉴定 | 第31页 |
1.6. 融合基因表达载体的构建 | 第31页 |
1.7. 融合基因在大肠杆菌中进行表达 | 第31-32页 |
1.8. 融合蛋白的Westernblot鉴定 | 第32页 |
2. 结果与分析 | 第32-36页 |
2.1. 泛素基因的克隆与鉴定 | 第32页 |
2.2 泛素基因的序列分析和同源性比较 | 第32-34页 |
2.3 融合基因表达载体的构建 | 第34页 |
2.4. 泛素蛋白在大肠杆菌中进行诱导表达 | 第34-35页 |
2.5. Westernblot检测目的蛋白 | 第35-36页 |
3. 讨论 | 第36页 |
参考文献 | 第36-38页 |
第三章 甜菜夜蛾泛素延伸基因cDNA的3'RACE-PCR扩增和原核表达 | 第38-47页 |
1. 材料和方法 | 第39-40页 |
1.1 甜菜夜蛾、菌株及质粒 | 第39页 |
1.2 甜菜夜蛾血淋巴和脂肪体中总RNA的提取 | 第39页 |
1.3 用3’RACEPCR方法扩增泛素延伸基因的cDNA | 第39-40页 |
1.4 3'RACEPCR产物克隆测序 | 第40页 |
1.5 融合基因在大肠杆菌中进行表达 | 第40页 |
1.6 融合蛋白的Westernblot鉴定 | 第40页 |
2. 结果与分析 | 第40-44页 |
2.1. 甜菜夜蛾泛素延伸基因(ubi-53aa extension gene)cDNA序列分析及同源性比较 | 第40-43页 |
2.2. 泛素蛋白在大肠杆菌中进行诱导表达 | 第43-44页 |
2.3. Westernblot检测目的蛋白 | 第44页 |
3. 讨论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-47页 |
第四章 甜菜夜蛾核多角体病毒泛素功能的初步研究 | 第47-57页 |
1. 材料和方法 | 第51-52页 |
1.1. 菌株和质粒 | 第51页 |
1.2. 含目的基因的诱饵质粒及捕获质粒的构建 | 第51-52页 |
1.3. 验证单独融合Ubi的诱饵蛋白及单独融合IAP2或IAP3捕获蛋白是否可以诱导报告基因表达 | 第52页 |
1.4. 共转化AH | 第52页 |
1.5. 阳性克隆的PCR验证 | 第52页 |
2. 结果分析 | 第52-55页 |
2.1. 含目的基因的诱饵质粒及捕获质粒的构建 | 第53页 |
2.2. 共转化AH109 | 第53-54页 |
2.3 阳性克隆的验证 | 第54-55页 |
3. 讨论 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-59页 |
总结 | 第59-60页 |
研究生期间已发表和撰写的论文及申请的专利 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |