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新型纳米基因转运体与新型生物荧光纳米颗粒的研制

缩写词简表第1-12页
中文摘要第12-17页
英文摘要第17-24页
前言第24-27页
第一部分 硅纳米颗粒的合成与改性修饰第27-45页
 1.1 材料与方法第28-32页
  1.1.1 主要仪器与原料第28-29页
  1.1.2 SiNP的制备第29页
  1.1.3 正交实验第29页
  1.1.4 SiNP的电镜检测第29页
  1.1.5 X衍射分析第29页
  1.1.6 质粒DNA的小量制备第29-30页
  1.1.7 SiNP的DNA结合试验第30-31页
  1.1.8 PMS-NP的制备与优化第31页
  1.1.9 PMS-NP的DNA结合及电镜检测第31页
  1.1.10 PMS-NP的细胞毒性测定第31-32页
 1.2 结果第32-40页
  1.2.1 SiNP的电镜检测结果第32-35页
  1.2.2 SiNP的正交分析结果第35-36页
  1.2.3 SiNP的X衍射结果第36页
  1.2.4 SiNP与DNA结合试验第36-37页
  1.2.5 同种SiNP经不同溶液处理后修饰PLL与DNA结合试验第37-38页
  1.2.6 不同粒径SiNP经PLL修饰后的DNA结合试验第38页
  1.2.7 SiNP修饰后的电镜结果第38-39页
  1.2.8 SiNP修饰后(PMS-NP)的细胞毒性第39-40页
 1.3 讨论第40-45页
  1.3.1 SiNP的微乳液法合成第40-41页
  1.3.2 SiNP自身不能与质粒DNA结合第41-42页
  1.3.3 PMS-NP的制备与优化第42-43页
  1.3.4 SiNP和PMS-NP在恶性肿瘤诊断与治疗中的应用第43-45页
第二部分 PMS-NP作为质粒DNA传递载体的研究第45-58页
 2.1 材料与方法第46-50页
  2.1.1 主要材料第46-47页
  2.1.2 根据正交分析结果合成SiNP第47页
  2.1.3 PMS-NP的制备第47页
  2.1.4 SiNP及PMS-NP电子显微镜检测第47页
  2.1.5 质粒DNA大量制备与纯化第47-48页
  2.1.6 DNA结合滞留分析第48-49页
  2.1.7 DNA结合沉淀试验第49页
  2.1.8 DNA结合平衡分析第49页
  2.1.9 DNaseⅠ消化试验第49页
  2.1.10 质粒DNA转染及定性定量分析第49-50页
 2.2 结果第50-55页
  2.2.1 SiNP及PMS-NP的合成第50-51页
  2.2.2 PMS-NP可产生明显的DNA滞留现象第51页
  2.2.3 PMS-NP与质粒DNA的结合曲线第51-52页
  2.2.4 PMS-NP与DNA结合平衡曲线第52-53页
  2.2.5 PMS-NP能保护质粒DNA免遭DNaseⅠ降解第53页
  2.2.6 PMS-NP能有效转染培养细胞第53-55页
 2.3 讨论第55-58页
第三部分 PMS-NP作为反义ODN传递载体的研究第58-76页
 3.1. 材料与方法第59-64页
  3.1.1 主要材料第59-60页
  3.1.2 反义与对照ODN第60页
  3.1.3 PMS-NP的制备第60页
  3.1.4 反义ODN结合与血浆消化试验第60-61页
  3.1.5 细胞培养与转染技术第61页
  3.1.6 流式细胞仪分析第61-62页
  3.1.7 荧光显微镜与相差显微镜检测ODN细胞内定位第62页
  3.1.8 RNA的抽提第62页
  3.1.9 PMS—NP介导c-myc基因反义ODN传递后mRNA表达检测第62-63页
  3.1.10 Western印迹分析第63-64页
 3.2. 结果第64-71页
  3.2.1 PMS-NP能够结合和保护反义ODN第64-66页
  3.2.2 PMS-NP介导FITC标记ODN的反义传递第66-67页
  3.2.3 反义分子的细胞内定位第67-68页
  3.2.4 c-myc mRNA表达的反义效应第68-71页
  3.2.5 c-myc蛋白表达的反义效应第71页
 3.3. 讨论第71-76页
第四部分 多聚赖氨酸-硅纳米颗粒的生物相容性研究第76-87页
 4.1. 材料与方法第77-80页
  4.1.1 主要材料第77-78页
  4.1.2 PMS-NP的制备第78页
  4.1.3 质粒DNA转染及荧光强度分析第78页
  4.1.4 反义寡核苷酸传递及流式细胞分析第78-79页
  4.1.5 血浆蛋白反应滤过试验第79-80页
  4.1.6 红细胞聚集试验第80页
 4.2. 结果第80-85页
  4.2.1 在含血清培基中PMS-NP的质粒DNA转移能力明显减低第80-81页
  4.2.2 在含血清培基中PMS-NP介导的反义寡核苷酸传递效率显著下降第81-83页
  4.2.3 PMS-NP基因复合物可与血浆蛋白反应第83-84页
  4.2.4 PMS-NP基因复合物可致红细胞聚集第84-85页
 4.3. 讨论第85-87页
第五部分 多聚赖氨酸—硅纳米颗粒介导的口服基因传递第87-95页
 5.1. 材料与方法第88-90页
  5.1.1 主要材料第88-89页
  5.1.2 PMS—NP/DNA混合物的准备第89页
  5.1.3 PMS—NP/DNA混合物喂食小鼠第89页
  5.1.4 荧光素酶实验(luciferase assay)第89-90页
  5.1.5 LacZ报告基因表达的组织学分析第90页
 5.2. 结果第90-93页
  5.2.1 荧光素酶报道基因在胃和小肠中的表达时效第90-92页
  5.2.2 Lac Z报道基因表达的组织学分析第92-93页
 5.3. 讨论第93-95页
第六部分 生物荧光硅纳米颗粒的研制与应用第95-107页
 6.1. 材料与方法第96-99页
  6.1.1 主要材料第96-97页
  6.1.2 氧化硅纳米颗粒的合成第97页
  6.1.3 电子显微镜检测第97页
  6.1.4 荧光氧化硅纳米颗粒光谱测定第97页
  6.1.5 荧光猝灭试验第97-98页
  6.1.6 流式细胞仪分析第98-99页
  6.1.7 共聚焦显微镜检测第99页
 6.2. 结果第99-104页
  6.2.1 生物荧光硅纳米颗粒的合成第99-100页
  6.2.2 生物荧光硅纳米颗粒的波谱特性第100-101页
  6.2.3 荧光硅纳米颗粒的发光性质第101-102页
  6.2.4 流式细胞仪分析第102-103页
  6.2.5 细胞内的荧光定位第103-104页
 6.3. 讨论第104-107页
参考文献第107-117页
结论第117-118页
综述第118-138页
 纳米基因转运体:原理、研制与应用第118-131页
 纳米医学的圣殿第131-138页
致谢第138-140页
个人简历第140-144页
附件第144-145页

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