中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
1. 文献综述 | 第10-25页 |
1.1 水稻转基因的主要方法及原理 | 第10-13页 |
1.1.1 PEG法 | 第10-11页 |
1.1.2 电击法 | 第11页 |
1.1.3 基因枪法 | 第11页 |
1.1.4 农杆菌介导法 | 第11-12页 |
1.1.5 基因枪法和农杆菌介导法的比较 | 第12-13页 |
1.2 基因工程在水稻育种中的应用 | 第13-18页 |
1.2.1 改良品质 | 第13页 |
1.1.2 提高抗病性 | 第13-14页 |
1.2.2.1 抗病毒基因工程 | 第13页 |
1.2.2.2 抗真菌性病害基因工程 | 第13-14页 |
1.2.2.3 抗细菌病害基因工程 | 第14页 |
1.2.3 提高抗虫性 | 第14-15页 |
1.2.4提高抗逆能力 | 第15-16页 |
1.2.5 抗除草剂育种 | 第16页 |
1.2.6 进一步提高水稻产量 | 第16-17页 |
1.2.7 创造新的不育系、保持系和恢复系 | 第17页 |
1.2.8 植物生物反应器研究 | 第17-18页 |
1.3 水稻基因工程面临的主要问题和对策 | 第18-21页 |
1.3.1 转化率低 | 第18页 |
1.3.2 基因沉默 | 第18-19页 |
1.3.3 外源基因的低效表达 | 第19页 |
1.3.4 生物安全性问题 | 第19-21页 |
1.3.4.1 转基因植物对环境的潜在威胁 | 第20页 |
1.3.4.2 转基因食品的风险性 | 第20页 |
1.3.4.3 有可能成为超级病毒或杂草 | 第20页 |
1.3.4.4 积极、正确对待生物安全性问题 | 第20-21页 |
1.4 水稻基因工程的发展趋势 | 第21-23页 |
1.4.1 我田转基因水稻商品化现状 | 第22页 |
1.4.2 转基因顺利实现商品化的必要条件 | 第22-23页 |
1.5 论文开题设想 | 第23-25页 |
1.5.1 水稻转基因模式材料的筛选 | 第23-24页 |
1.5.2 水稻常用恢复系和保持系抗性的改良 | 第24-25页 |
2. 材料与方法 | 第25-31页 |
2.1 材料 | 第25页 |
2.2 外源基因 | 第25页 |
2.3 主要的实验仪器和试剂 | 第25页 |
2.4 培养基 | 第25-26页 |
2.5 实验方法 | 第26-30页 |
2.5.1 愈伤组织的准备 | 第26页 |
2.5.2 潮霉素敏感性实验 | 第26页 |
2.5.3 转化 | 第26-28页 |
2.5.3.1 基因枪轰击法 | 第26-27页 |
2.5.3.2 农杆菌介导 | 第27-28页 |
2.5.4 转基因植株的分子检测 | 第28-30页 |
2.5.4.1 转基因植株的PCR检测 | 第28-29页 |
2.5.4.2 Southern杂交 | 第29-30页 |
2.6 转基因植株的田间鉴定 | 第30页 |
2.7 转基因植株后代的遗传分析 | 第30-31页 |
2.7.1 转基因植株T_0代自交种的潮霉素发芽实验 | 第30页 |
2.7.2 转基因植株T_1代的潮霉素抗性筛选实验 | 第30页 |
2.7.3 T_2代植株的遗传稳定性分析 | 第30-31页 |
3. 结果与分析 | 第31-46页 |
3.1 供试材料不同类型外植体愈伤组织诱导率的统计与分析 | 第31-33页 |
3.2 不同基因型材料潮霉素筛选浓度的确立 | 第33-34页 |
3.3 不同基因型材料的抗性愈伤组织产生率及绿苗再生率的统计及分析 | 第34-41页 |
3.3.1 各材料用基因枪轰击的转化率比较与分析 | 第34-36页 |
3.3.2 农杆菌介导法的转化率比较与分析 | 第36-38页 |
3.3.3 基因枪轰击和农杆菌介导转化率的比较 | 第38-41页 |
3.4 转基因蜘蛛的分子检测结果 | 第41-42页 |
3.4.1 PCR扩增结果 | 第41页 |
3.4.2 Southern杂交 | 第41-42页 |
3.5 转基因植株后代的遗传分析和田间鉴定 | 第42-46页 |
3.5.1 转基因植株T_0代自交种的潮霉素发芽实验结果与分析 | 第42-43页 |
3.5.2 转基因植株T_1代的田间鉴定 | 第43-45页 |
3.5.3 转基因植株T_1代自交种的潮霉素抗性筛选 | 第45页 |
3.5.4 T_2代植株的遗传稳定性分析 | 第45-46页 |
4. 讨论 | 第46-51页 |
4.1 基因转化受体系统的建立 | 第46页 |
4.2 筛选试剂及浓度的确立 | 第46-47页 |
4.3 水稻的转基因方法 | 第47-48页 |
4.3.1 基因枪转化参数的优化 | 第47页 |
4.3.2 农杆菌转化参数的优化 | 第47-48页 |
4.4 外源基因在转基因植株中的遗传和表达 | 第48页 |
4.5 水稻转基因模式材料的选择及其在水稻基因工程中的应用 | 第48-50页 |
4.5.1 水稻转基因模式材料的选择 | 第49页 |
4.5.2 基因组计划与水稻转基因模式材料 | 第49页 |
4.5.3 转基因模式材料与水稻基因工程产业化 | 第49-50页 |
4.6 转基因模式材料的推广 | 第50-51页 |
4.7 有关提高植物多抗性的研究 | 第51页 |
5. 后续研究的设想 | 第51-52页 |
6. 参考文献 | 第52-57页 |
7. 附录 | 第57-58页 |
致谢 | 第58页 |