中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
论文缩略词表 | 第9-10页 |
前言 | 第10-21页 |
1 动物遗传多样性研究进展 | 第11-15页 |
1.1 概述 | 第11页 |
1.2 动物遗传多样性的丧失 | 第11-12页 |
1.3 遗传多样性的检测 | 第12-13页 |
1.3.1 染色体的多样性 | 第12页 |
1.3.2 蛋白质的多样性 | 第12页 |
1.3.3 线粒体DNA的多样性 | 第12-13页 |
1.3.4 核DNA的多样性 | 第13页 |
1.4 遗传多样性的保护 | 第13-15页 |
2 微卫星标记及在动物遗传多样性研究中的应用 | 第15-20页 |
2.1 微卫星标记的结构和遗传特性 | 第15-16页 |
2.2 微卫星DNA位点的获得 | 第16-17页 |
2.3 微卫星DNA分析的一般步骤 | 第17页 |
2.3.1 DNA的提取 | 第17页 |
2.3.2 PCR扩增 | 第17页 |
2.3.3 扩增产物及大小检测 | 第17页 |
2.3.4 数据分析 | 第17页 |
2.4 生物芯片与微卫星技术 | 第17-18页 |
2.5 微卫星标记的应用 | 第18-20页 |
2.5.1 构建遗传连锁图谱 | 第18页 |
2.5.2 标记辅助选择育种 | 第18-19页 |
2.5.3 进行种群遗传多样性研究 | 第19页 |
2.5.4 进行亲子鉴定和建立遗传谱系 | 第19-20页 |
3 本研究的目的和内容 | 第20-21页 |
材料和方法 | 第21-29页 |
1 材料 | 第21-24页 |
1.1 实验材料来源和背景 | 第21-22页 |
1.2 主要试剂的购置和配制 | 第22-23页 |
1.3 主要仪器设备 | 第23页 |
1.4 微卫星引物 | 第23-24页 |
2 方法 | 第24-29页 |
2.1 基因组DNA的提取 | 第24页 |
2.1.1 毛发DNA的提取 | 第24页 |
2.1.2 组织DNA的提取 | 第24页 |
2.1.3 液DNA的提取 | 第24页 |
2.2 PCR扩增及微卫星位点的筛选 | 第24-25页 |
2.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染 | 第25页 |
2.3.1 8%聚丙烯酰胺凝胶的制备及电泳 | 第25页 |
2.3.2 凝胶银染 | 第25页 |
2.4 PCR扩增产物分子片段大小的确定 | 第25页 |
2.5 PCR产物的检测 | 第25-27页 |
2.5.1 微卫星片段的回收及再扩增 | 第25页 |
2.5.2 微卫星片段的纯化 | 第25-26页 |
2.5.3 纯化片段与pGEM-T Easy载体连接 | 第26页 |
2.5.4 感受态细胞的制备 | 第26页 |
2.5.5 连接产物转化 | 第26页 |
2.5.6 阳性克隆的鉴定 | 第26-27页 |
2.6 数据统计分析 | 第27-29页 |
2.6.1 等位基因频率 | 第27页 |
2.6.2 亲子鉴定 | 第27页 |
2.6.3 非父排除概率 | 第27-28页 |
2.6.4 基因杂合度 | 第28页 |
2.6.5 多态信息含量 | 第28页 |
2.6.6 有效等位基因数 | 第28页 |
2.6.7 种群分析 | 第28-29页 |
结果 | 第29-40页 |
1 微卫星位点的筛选 | 第29页 |
2 微卫星引物的扩增结果 | 第29-30页 |
3 微卫星扩增产物的检测 | 第30页 |
4 微卫星位点的等位基因频率 | 第30-31页 |
5 亲子鉴定 | 第31-33页 |
6 非父排除概率 | 第33页 |
7 基因杂合度 | 第33页 |
8 多态信息含量 | 第33页 |
9 有效等位基因数 | 第33-35页 |
10 种群分析 | 第35-40页 |
10.1 个体的近交系数 | 第35-37页 |
10.2 种群的出生率、成活率、年平均近交系数 | 第37-39页 |
10.3 建群者贡献 | 第39-40页 |
讨论 | 第40-46页 |
1 微卫星的多态性和保守性 | 第40页 |
2 微卫星与亲子鉴定 | 第40-41页 |
3 微卫星和遗传多样性 | 第41页 |
4 微卫星与非损伤性DNA分析法 | 第41-42页 |
5 微卫星研究中存在的一些问题 | 第42-44页 |
5.1 微卫星片段大小的测定 | 第42页 |
5.2 微卫星位点的数目 | 第42-43页 |
5.3 微卫星自身某些特性的影响 | 第43-44页 |
6 饲养东北虎的种群评价 | 第44-46页 |
6.1 饲养种群的背景 | 第44页 |
6.2 饲养种群的现状 | 第44页 |
6.3 保持种群遗传多样性的原则与方法的探讨 | 第44-46页 |
小结 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-53页 |
表5 东北虎的10个微卫星位点等位基因分布 | 第53-59页 |
附图A 微卫星位点的部分扩增结果 | 第59-64页 |
附录A 横道河子东北虎谱系记录 | 第64-66页 |
附录B 东北虎林园繁殖情况记录 | 第66-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
作者简历 | 第69页 |