| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 英文缩略语表 | 第11-13页 |
| 文献回顾 | 第13-33页 |
| 一 核酶与基因治疗 | 第13-25页 |
| (一) 核酶的分类 | 第13-18页 |
| (二) 核酶的设计 | 第18-19页 |
| (三) 核酶的细胞导入 | 第19-21页 |
| (四) 核酶的体内表达及影响其活性的因素 | 第21-23页 |
| (五) 核酶的应用 | 第23-25页 |
| 二 c-erbB-2与胃癌 | 第25-33页 |
| (一) c-erbB-2基因及其产物 | 第25-27页 |
| (二) c-erbB-2与细胞活化信号传递 | 第27-28页 |
| (三) c-erbB-2基因在胃癌中的表达 | 第28-30页 |
| (四) c-erbB-2癌基因产物在胃癌诊断中的意义 | 第30-31页 |
| (五) 以c-erbB-2癌蛋白为基础的靶向治疗研究 | 第31-32页 |
| (六) c-erbB-2与胃癌予后 | 第32-33页 |
| 主要实验材料 | 第33-40页 |
| 一 质粒与菌种 | 第33-34页 |
| 二 细胞系及实验动物 | 第34页 |
| 三 主要试剂 | 第34-35页 |
| 四 主要溶液的配制 | 第35-38页 |
| 五 主要仪器 | 第38-40页 |
| 主要实验方法 | 第40-56页 |
| 一 核酶基因设计 | 第40-41页 |
| 二 核酶RZ1基因的合成 | 第41页 |
| 三 载体的构建 | 第41-43页 |
| 四 主要分子克隆方法 | 第43-46页 |
| 五 核酶及其底物的体外转录和体外切割反应 | 第46-49页 |
| 六 重组逆转录病毒表达载体转染胃癌细胞SGC-7901 | 第49-50页 |
| 七 细胞基因组DNA提取 | 第50页 |
| 八 细胞总RNA提取 | 第50-51页 |
| 九 核酸分子杂交 | 第51-53页 |
| 十 细胞生长速度测定 | 第53-54页 |
| 十一 细胞周期测定 | 第54页 |
| 十二 流式细胞仪测定细胞癌蛋白表达 | 第54页 |
| 十三 透射电镜标本的制备 | 第54页 |
| 十四 裸鼠体内移植瘤生长实验 | 第54-56页 |
| 结果 | 第56-83页 |
| 一 c-erbB-2核酶的计算机设计 | 第56-58页 |
| 二 pSV2erbB2的初步酶切鉴定 | 第58页 |
| 三 核酶RZ1基因的合成、体外转录载体的构建及正负筛选法快速鉴定 | 第58-59页 |
| 四 重组子DNA序列分析 | 第59-60页 |
| 五 靶基因体外转录载体的克隆及酶切鉴定 | 第60-63页 |
| 六 核酶RZ1对靶RNA的体外切割作用 | 第63-65页 |
| 七 重组RZ1逆转录病毒表达载体pDOR-RZ1的鉴定 | 第65-67页 |
| 八 重组反义核酸真核表达载体pDOR-AE的构建及鉴定 | 第67-69页 |
| 九 pDOR-RZ1和pDOR-AE对胃癌细胞的转染 | 第69页 |
| 十 核酸杂交 | 第69-72页 |
| 十一 流式细胞仪测定胃癌细胞P185的表达 | 第72-74页 |
| 十二 转染胃癌细胞生长速度测定 | 第74页 |
| 十三 转染胃癌细胞周期测定 | 第74-77页 |
| 十四 转染胃癌细胞超微结构变化 | 第77-79页 |
| 十五 转染胃癌细胞裸鼠体内抑瘤试验 | 第79-83页 |
| 讨论 | 第83-90页 |
| 一 核酶的计算机设计 | 第83-85页 |
| 二 核酶基因的克隆与筛选 | 第85-87页 |
| 三 c-erbB-2反义核酸真核表达载体的构建 | 第87页 |
| 四 P185在胃癌细胞系中的表达 | 第87-88页 |
| 五 核酶对c-erbB-2靶RNA的体外切割 | 第88页 |
| 六 核酶对肿瘤恶性表型的逆转 | 第88-90页 |
| 小结 | 第90-91页 |
| 附录 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-107页 |
